配體印跡法的技術用途
中文名稱配體印跡法英文名稱ligand blotting定 義受體或配體經電泳或層析等方法分離后,轉移到適宜的薄膜上,再與相應的配體或受體結合,是檢測配體與受體相互作用的技術。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)......閱讀全文
配體印跡法的技術用途
中文名稱配體印跡法英文名稱ligand blotting定 義受體或配體經電泳或層析等方法分離后,轉移到適宜的薄膜上,再與相應的配體或受體結合,是檢測配體與受體相互作用的技術。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
菌落印跡法的技術用途
中文名稱菌落印跡法英文名稱colony blotting定 義將固體培養平板上的菌落吸印轉移到濾膜上的技術。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
菌落免疫印跡法的技術用途
中文名稱菌落免疫印跡法英文名稱colony immunoblotting定 義對吸印轉移到濾膜上的菌落作免疫學分析鑒定的技術。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
DNA-印跡法的技術特點
中文名稱DNA 印跡法英文名稱Southern blotting定 義DNA經酶切和凝膠電泳分離后轉移至尼龍膜或硝酸纖維素薄膜上,用探針進行雜交后分析目的DNA片段的方法。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
DNA印跡法的技術原理
這種方法最初是由Southern于1975年建立的。方法中DNA轉移的方式和復印的過程一樣,比較準確地保持了特異DNA順序在電泳圖譜中的位置,也可將變性的凝膠負壓干燥后與特定的DNA探針進行原位雜交。它把電泳分離和雜交結合起來,不但能檢測出特異的DNA序列片段,而且能進行定位和測定分子量。即先以電泳
電印跡法的技術方法介紹
中文名稱電印跡法英文名稱electroblotting定 義將經凝膠電泳分離的蛋白質、DNA或RNA條帶通過電泳按原位轉移到另外的固體支持物上形成印跡的方法。此法比靠毛細管作用的印跡法效率高,速度快。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
Southern印跡法的技術方法介紹
Southern印跡法(Southern Blot)是將基因組 DNA經限制性內切酶酶解、瓊脂糖凝膠電泳分離,使DNA片段按分子量大小排列在瓊脂糖凝膠上。經堿處理凝膠使DNA變性(使雙鏈DNA變成單鏈),通過具有一定鹽離子濃度溶液的毛細管作用,將凝膠中變性的單鏈DNA片段原位地吸印到硝酸纖維素濾膜或
印跡膜的用途
中文名稱印跡膜英文名稱blotting membrane定 義在印跡時接受被轉移樣品的膜介質。如硝酸纖維素膜、尼龍膜等。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
蛋白質印跡法的用途及原理
蛋白質印跡法(免疫印跡試驗)即Western Blot。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中表達情況的信息。
斑點印跡法的技術方法介紹
中文名稱斑點印跡法英文名稱dot blotting定 義將點狀樣品吸印到特定的膜上進行檢測的方法。如用硝酸纖維素膜吸印固體培養基上的菌落或噬斑,在膜上原位裂菌或裂解噬菌體后,與特定的標記探針雜交,從而直接從轉化的DNA文庫或噬菌體文庫中篩選所需要的克隆;將不同稀釋度的蛋白質吸附在膜上進行顯色反應,
Southern-印跡實驗——印跡法
Southern印跡法是將DNA片段從電泳凝膠中轉移至膜支持物上,使DNA片段固定,因此該膜半永久性地重現出凝膠電泳的帶型。實驗方法原理本方案是專門為將瓊脂糖凝膠印跡至不帶電荷或帶正電荷的尼龍膜上而設計的,稍作修改后同樣可用于硝酸纖維素膜方法。實驗材料DNA試劑、試劑盒HClNaClTrisNaOH
蛋白質印跡法的技術原理
與Southern Blot或Northern Blot雜交方法類似,但Western Blot法采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測物是蛋白質,“探針”是抗體,“顯色”用標記的二抗。經過PAGE(聚丙烯酰胺凝膠電泳)分離的蛋白質樣品,轉移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)上,固相載體以非共價鍵形式吸附
蛋白質印跡法的技術分類
Western Blot顯色的方法主要有以下幾種:i.?放射自顯影ii.?底物化學發光ECLiii. 底物熒光ECFiv. 底物DAB呈色現常用的有底物化學發光ECL和底物DAB呈色,體同水平和實驗條件的是用第一種方法,發表文章通常是用底物化學發光ECL。只要買現成的試劑盒就行,操作也比較簡單,原理
免疫印跡法的技術特點和應用
免疫印跡法 (Western Blot) 是一種將高分辨率凝膠電泳和免疫化學分析技術相結合的雜交技術。免疫印跡法具有分析容量大、敏感度高、特異性強等優點,是檢測蛋白質特性、表達與分布的一種最常用的方法,如組織抗原的定性定量檢測、多肽分子的質量測定及病毒的抗體或抗原檢測等。免疫印跡法 (immunob
Western印跡法
這種技術是把電泳分離的組分從凝膠轉移到一種固相支持體,并以針對特定氨基酸序列的特異性試劑作為探針檢測之。Western使用的探針是抗體,它與附著于固相支持體的靶蛋白所呈現的抗原表位發生特異性反應。這種技術的作用是對非放射性標記蛋白組成的復雜混合物中的某些特異蛋白進行鑒別和鑒定。儀器:高壓鍋、玻璃勻漿
DNA印跡法的定義
Southern印跡法(Southern Blot)是將基因組 DNA經限制性內切酶酶解、瓊脂糖凝膠電泳分離,使DNA片段按分子量大小排列在瓊脂糖凝膠上。經堿處理凝膠使DNA變性(使雙鏈DNA變成單鏈),通過具有一定鹽離子濃度溶液的毛細管作用,將凝膠中變性的單鏈DNA片段原位地吸印到硝酸纖維素濾膜或
DNA-印跡法的概念
中文名稱DNA 印跡法英文名稱Southern blotting定 義DNA經酶切和凝膠電泳分離后轉移至尼龍膜或硝酸纖維素薄膜上,用探針進行雜交后分析目的DNA片段的方法。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
RNA-印跡法的概念
中文名稱RNA 印跡法英文名稱Northern blotting定 義將電泳分離的RNA從凝膠中轉移到纖維素膜或尼龍膜上,用32P標記的RNA或DNA雜交進行檢測的方法。主要用于檢測目的基因的轉錄水平。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
免疫印跡法
Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。一、原理與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被
Southern印跡技術
實驗原理:Southern印跡是將DNA片斷從電泳凝膠上直接轉移至膜支持物(如硝酸纖維素膜、尼龍膜)上,使DNA片斷固定的技術。先將DNA經限制性內切酶消化成一系列片段,進行瓊脂糖凝膠電泳,各片段因分子量不同而彼此分開,然后經堿處理凝膠,使DNA的片段被變性、中和并通過毛細作用在高鹽緩沖液中在原位將
RNA蛋白質印跡法的技術應用
中文名稱RNA-蛋白質印跡法英文名稱Northwestern blotting定 義將經過電泳分離的蛋白質轉移到膜上再與某種特異的RNA探針雜交,是研究蛋白質與RNA特異結合的技術。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
DNA蛋白質印跡法的技術應用
中文名稱DNA-蛋白質印跡法英文名稱Southwestern blotting定 義將經過電泳分離的蛋白質轉移到膜上再與某些特定序列的DNA片段相互作用,是研究蛋白質與DNA特異結合的技術。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
免疫印跡法的階段
免疫印跡法分三個階段進行.第一階段為SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE):抗原等蛋白樣品經SDS處理后帶陰電荷,在聚丙烯酰胺凝膠中從陰極向陽極泳動,分子量越小,泳動速度就越快.此階段分離效果肉眼不可見(只有在染色后才顯出電泳區帶).第二階段為電轉移:將在凝膠中已經分離的條帶轉移至硝酸纖維素
DNA印跡法的實驗步驟
注意注意,操作戴手套。凝膠處理1)凝膠照相后切去包括標記帶在內的多余部分。將凝膠的一角(·點第一個樣品的一側)切去作為標記 以便于定位。精確測量凝膠大小然后將凝膠放入一個方形瓷盤中 。2)變性:將凝膠浸泡于適量的堿變性液中,室溫下變性30分鐘。期間更換變性液一次,不斷地輕輕搖動。如果先進行酸變性酸變
分子印跡技術的原理
當模板分子(印跡分子)與聚合物單體接觸時會形成多重作用點,通過聚合過程這種作用就會被記憶下來,當模板分子除去后,聚合物中就形成了與模板分子空間構型相匹配的具有多重作用點的空穴,這樣的空穴將對模板分子及其類似物具有選擇識別特性。
分子印跡技術的概況
Southern在1975年首先提出了分子印漬的概念。他將瓊脂糖凝膠電泳分離的 DNA片段在凝膠中進行變性使其成為單鏈,然后將一張硝酸纖維素(nitrocellulose, NC)膜放在凝膠上,上面放上吸水紙巾,利用毛細管作用原理使凝膠中的DNA片段轉移到 NC膜上,使之成為固相化分子。載有DN
分子印跡技術的分類
目前,根據模板分子和聚合物單體之間形成多重作用點方式的不同,分子印跡技術可以分為兩類: 1.共價鍵法(預組裝方式) 聚合前印跡分子與功能單體反應形成硼酸酷、西夫堿、亞胺、縮醛等衍生物,通過交聯劑聚合產生高分子聚合物,用水解等方法除去印跡分子即得到共價結合型分子印跡聚合物。 2.非共價鍵法(
免疫印跡法過程
免疫印跡法 是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。 1、SDS-PAGE試劑:見電泳實驗。2、勻漿緩沖液:1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.Oml;10%SDS 6.0ml;β-巰基乙醇 0
Western印跡法檢測蛋白
實驗概要Western印跡法檢測蛋白的敏感性約為1-5ng,0.75mm厚的SDS-PAGE板的一個孔可上總蛋白量約為100μg,所以只要被檢蛋白不低于總蛋白量的萬分之一,即可被檢測出來。如果所分析的樣品為未知時,應同時作陽性對照。雜交技術主要有NC膜的封閉,靶蛋白與第一抗體的反應,結合靶蛋白的一抗
Western印跡法檢測蛋白
實驗概要Western印跡法檢測蛋白的敏感性約為1-5ng,0.75mm厚的SDS-PAGE板的一個孔可上總蛋白量約為100μg,所以只要被檢蛋白不低于總蛋白量的萬分之一,即可被檢測出來。如果所分析的樣品為未知時,應同時作陽性對照。雜交技術主要有NC膜的封閉,靶蛋白與第一抗體的反應,結合靶蛋白的一抗