自旋標記法的原理及方法特點
因自由基有不成對電子自旋,所以稱自旋標記(H.M.McConnell)。開始是用氯丙嗪陽離子自由基研究其與DNA的相互作用,后來則用穩定的硝酰(基)自由基類。有N-羥四甲基六氫吡啶(四氫吡咯)衍生物以及N-羥二甲基1,3-氧氮雜環戊烷衍生物等。有合成在標記物的局部含有反應性的官能團,使之與活體高分子等反應而結合于特定的部位;或合成與活體有關的含硝基氧(ni-troxide)基的低分子化合物,加于活體以觀察其相互作用等方法。一般標記蛋白質的胱氨酸基,通過標記物的動的變化來檢查局部環境的變化。另外通過自旋標記的磷脂已查明了生物膜或類脂雙層膜內類脂分子的擴散類脂的烷基鏈的彎曲性,為探明生物膜的行動的結構作出了貢獻。......閱讀全文
自旋標記法的原理及方法特點
因自由基有不成對電子自旋,所以稱自旋標記(H.M.McConnell)。開始是用氯丙嗪陽離子自由基研究其與DNA的相互作用,后來則用穩定的硝酰(基)自由基類。有N-羥四甲基六氫吡啶(四氫吡咯)衍生物以及N-羥二甲基1,3-氧氮雜環戊烷衍生物等。有合成在標記物的局部含有反應性的官能團,使之與活體高分子
自旋標記法的方法介紹
自旋標記 (spin label), 很多物質的分子不表現電子自旋共振(ESR),但對這些分子,人工地使之與自由基(free radical)結合從而得以用ESR法來研究,獲得獨特的ESR信息,這就是自旋標記法。
電子順磁共振譜儀自旋標記法
由美國的 H·M·麥康奈爾于1965年創立,系指將一種穩定的自由基(最常用者為氮氧自由基)結合到單個分子或處于較復雜系統內的分子上的特定部位,而從電子順磁共振波譜取得有關標記物環境的信息。在進行自旋標記時,應注意到盡量保持專一性和減少對天然系統的生物特性和分子特性引起的擾動。 自旋標記物有4個
酶標分析儀的功能特點及工作原理
酶標分析儀的功能特點 酶標分析儀在實驗室中應用的主要作用就是用于酶聯免疫吸附試驗,可以分為單通道酶標分析儀、多通道酶標分析儀、全自動酶標分析儀和半自動酶標分析儀。 酶標分析儀的工作原理 酶標分析儀的工作原理簡單點來說,其實就是將光信號轉化成電信號,在進行處理計算的過程,而具體的工作
微衛星標記法的特點
與其它標記技術相比,具有以下特點:首先,在每個微衛星DNA?兩端的序列多是相對保守的單拷貝序列,尤其在親緣關系相近的物種間是保守的,而且在一些緊密相關的物種中其重復單位和重復次數具有一定的相似性。其次,這些小的、串聯排列的重復序列經常是通過核苷酸鏈的滑動錯配或者其它未知的過程來改變它們的長度,從而導
連續標記法的技術特點
連續標記法是指在植物生長某個生育期,甚至整個生育期內,對植物進行不間斷標記的一種方法。連續標記法有助于定量全部生育期或某一生育期全部投入,但由于成本高以及技術困難,運用受到限制。
免疫酶標方法的方法原理
免疫酶標方法是繼免疫熒光后,于60年代發展起來的技術。基本原理是先以酶標記的抗體與組織或細胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產物或具有一定電子密度的顆粒,通過光鏡或電鏡,對細胞表面和細胞內的各種抗原成分進行定位研究。免疫酶標技術是最常用的技術。本方法與免疫熒光技術相比的主要優點是:定位準確,
酶聯免疫吸附酶標記法的方法特點介紹
酶與抗體交聯,常用戊二醛法和過碘酸鹽氧化法。郭春祥建立的HRP標記抗體的改良過碘酸鈉法簡單易行,標記效果好,特別適用于實驗室的小批量制備。其標記程序為:將5μg HRP溶于0.5ml蒸餾水中,加入新鮮配制的0.06 mol/L的過碘酸鈉(NaIO4)水溶液0.5ml,混勻置4℃冰箱30分鐘 , 取出
改良過碘酸鈉標記法制備酶標抗體
HRP分子中與酶活性無關的糖基被過碘酸鈉氧化為醛基,再與抗體蛋白的氨基形成Schiff堿。為了防止酶蛋白的氨基與醛基發生自身偶聯,在標記前先用2,4-二硝基氟苯(DNFB)封閉酶蛋白中殘留的a-和e-氨基。酶與抗體的結合反應后,再加入硼氫化鈉還原成穩定的結合物。 (1) 取HRP 5mg溶
免疫電鏡膠體金標記法(簡稱金標法)
1、 包埋后染色 (超薄切片的金標記法)(1)超薄切片厚50~70nm左右,載于200~300網孔的鎳網上;(2)滴1%的H2O2液1滴于蠟板上,將網的載片面輕浮于液滴上10min至1h;(3)雙蒸水洗3次,每次10分鐘。第1、2次洗法如(2),浮于液面上,第3次以盛雙蒸水的注射器沿鎳網面沖洗,水流