細胞培養的具體步驟
一、細胞復蘇將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。移入15ml離心管中,加入10ml預熱的DMEM完全培養基,輕輕吹勻,離心,2000rpmX2min,棄上清液。加入10ml DMEM培養基清洗,棄上清液。加入10ml DMEM完全培養基,輕輕吹打,接種于10cm盤中,在含5%CO2的細胞培養箱中培養。二、細胞傳代細胞密度達到80%~90%時.去培養基,10ml PBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶,放入細胞培養箱3min。加人1ml DMEM完全培養基終止胰酶消化,轉移至15ml離心管。加入10ml PBS清洗細胞培養盤,轉移至15ml離心管,2000rpmX2min,棄上清液。再加入10ml PBS(經高壓滅菌,保存于40C),吹勻,吸取10微升進行計數,按照1×105/盤接種,在含5%CO2的細胞培養箱繼續培養。三、細胞凍存細胞密度達到80%~90%時,去培養基,10ml PBS......閱讀全文
northern,southern,western雜交的具體步驟
所用于分析的對象不同。 Northern雜交用于分析RNA; Southern雜交用于分析DNA; Western雜交用于分析蛋白質。大致過程如下: (1) 酶切DNA, 凝膠電泳分離各酶
免疫組化的具體步驟
免疫組化操作步驟一 免疫組化( LP 法)操作步驟 :1. 切片常規脫蠟至水。如需抗原修復,可在此步后進行2. 緩沖液洗 3min/2 次。3. 為了降低內源性過氧化物酶造成的非特異性背景染色 , 將切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分鐘。4. 緩沖液洗
金相分析實驗的具體步驟
金相分析實驗的具體步驟分為五步:一、試樣制備:1.1 試樣截取的方向,垂直于徑向,長度不超過8mm。1.2 試樣可用手鋸或切割機床等切取,不論用何種方法取樣均應注意試樣的溫度條件,必要時用水冷卻,以避免正式試樣因過熱而改變其組織。二、試樣的研磨2.1 準備好的試樣,先在粗砂輪上磨平,候磨痕均勻一致后
免疫組化的具體步驟
一 免疫組化( LP 法)操作步驟 :1. 切片常規脫蠟至水。如需抗原修復,可在此步后進行2. 緩沖液洗 3min/2 次。3. 為了降低內源性過氧化物酶造成的非特異性背景染色 , 將切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分鐘。4. 緩沖液洗 5min/2 次
凱氏定氮的具體步驟
1、消化:精密稱取大豆樣品1.0g左右,放入干燥的250 ml消化管中,加入0.4g CuSO4 7g K2SO4 10ml H2SO4先200'C炭化,待泡沫停止后提高溫度到450'C,加熱至液體沸騰,待瓶內液體呈藍綠色透明后,再繼續加熱0.5h。冷卻后加入20ml水,移入100m
免疫組化的具體步驟
一 免疫組化( LP 法)操作步驟 :1. 切片常規脫蠟至水。如需抗原修復,可在此步后進行2. 緩沖液洗 3min/2 次。3. 為了降低內源性過氧化物酶造成的非特異性背景染色 , 將切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分鐘。4. 緩沖液洗 5min/2 次
免疫組化的具體步驟
一 免疫組化( LP 法)操作步驟 :1. 切片常規脫蠟至水。如需抗原修復,可在此步后進行2. 緩沖液洗 3min/2 次。3. 為了降低內源性過氧化物酶造成的非特異性背景染色 , 將切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分鐘。4. 緩沖液洗 5min/2 次
金相分析實驗的具體步驟
金相分析實驗的具體步驟分為五步:一、試樣制備:1.1 試樣截取的方向,垂直于徑向,長度不超過8mm。1.2 試樣可用手鋸或切割機床等切取,不論用何種方法取樣均應注意試樣的溫度條件,必要時用水冷卻,以避免正式試樣因過熱而改變其組織。二、試樣的研磨2.1 準備好的試樣,先在粗砂輪上磨平,候磨痕均勻一致后
細胞克隆實驗操作的具體步驟
一、細胞復蘇將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。移入15ml離心管中,加入10ml預熱的DMEM完全培養基,輕輕吹勻,離心,2000rpmX2min,棄上清液。加入10ml DMEM培養基清洗,棄上清液。加入10ml DMEM完全培養基,輕輕吹打,接種于10cm盤中,在含5
金相分析實驗的具體步驟
金相分析實驗的具體步驟分為五步:一、試樣制備:1.1 試樣截取的方向,垂直于徑向,長度不超過8mm。1.2 試樣可用手鋸或切割機床等切取,不論用何種方法取樣均應注意試樣的溫度條件,必要時用水冷卻,以避免正式試樣因過熱而改變其組織。二、試樣的研磨2.1 準備好的試樣,先在粗砂輪上磨平,候磨痕均勻一致后
土壤取樣的具體步驟和方法
土壤取樣的具體方法步驟:?1.布點:按照土壤類型和作物種植品種分布,按土壤肥力高、中、低分別采樣。一般150-300畝(不同地區可根據情況確定)采取一個耕層混合樣,每個示范村的主要農作土種至少采集3-4個混合農化土樣。采樣點以鋸齒型或蛇型分布,要做到盡量均勻和隨機。應用土壤底圖確定采樣地塊和采樣點,
光澤度儀測試的具體步驟
?? 光澤度儀(英文:Gloss meter)又稱作:光澤機、光澤度測量儀、光澤度測定儀、光澤度測試儀、光澤度檢測儀、光澤度試驗儀。是用來測量物體表面的光澤程度的儀器。高精度光澤度儀按照角度分為高光澤、中光澤和低光澤三種類型。?1、用擦鏡紙將隨機附帶的標準板擦干凈。將儀器的測量頭置于標準板框內。2、
RT-PCR檢測方法的具體步驟
RT-PCR檢測方法的具體步驟如下:(一)RNA提取1、根據標本數量分裝RLT液:從Kit中取出RLT液,用1.5mL離心管分裝,每管500μL(在體系配制區操作)。2、在生物安全柜內將采樣液(鼻拭子、咽拭子、胸水等)或病毒培養物(雞胚尿囊液或細胞培養液)取100μL加入RLT液管中,充分混勻。 3
包被ELISA試劑盒的具體步驟
包被:用0.05M?PH9.6碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。包被緩沖液(PH9.6?0.05M碳酸鹽緩沖液):Na?CO3 ? ?1.59克NaHCO3 ?2.93克加
RT-PCR檢測方法的具體步驟
RT-PCR檢測方法的具體步驟如下:(一)RNA提取1、根據標本數量分裝RLT液:從Kit中取出RLT液,用1.5mL離心管分裝,每管500μL(在體系配制區操作)。2、在生物安全柜內將采樣液(鼻拭子、咽拭子、胸水等)或病毒培養物(雞胚尿囊液或細胞培養液)取100μL加入RLT液管中,充分混勻。 3
RT-PCR檢測方法的具體步驟
RT-PCR檢測方法的具體步驟如下:(一)RNA提取1、根據標本數量分裝RLT液:從Kit中取出RLT液,用1.5mL離心管分裝,每管500μL(在體系配制區操作)。2、在生物安全柜內將采樣液(鼻拭子、咽拭子、胸水等)或病毒培養物(雞胚尿囊液或細胞培養液)取100μL加入RLT液管中,充分混勻。 3
免疫瓊脂雙向擴散實驗具體步驟
瓊脂擴散( agar diffusion )為可溶性抗原與抗體在瓊脂凝膠中所呈現的一種沉淀反應。當對應的抗原、抗體在半固體瓊脂終相遇,且二者比例適當時,便出現可見的白色沉淀線,這組沉淀線是一組抗原、抗體的特異性復合物。當瓊脂中有多組不同的抗原、抗體存在時,便各自依其擴散速度的差異,再適當的部位形成獨
使用塵埃粒子計數器的具體步驟
塵埃粒子計數器就是對塵埃粒子個數進行統計的儀器,從而為空氣潔凈度的評定提供依據。作為一種用于檢測潔凈環境中單位體積內塵埃粒子數目及其分布的儀器,其具有檢測速度快、測量精度高、可靠性高、使用靈活度高、測量性能穩定等優點,被廣泛應用于為血液中心、防疫站、疾控中心、質量監督所等權威機構、電子行業、制藥車間
磷酸鈷鋰正極材料制備的具體步驟
(1)將聚偏氟乙烯加入N-甲基吡咯烷酮中,攪拌至完全溶解,然后加入改性多壁碳納米管,超聲分散28min,再加入磷酸鋰、四氧化三鈷、三氧化二鐵,轉移至球磨罐中進行球磨;各原料的重量份為,聚偏氟乙烯1重量份、N-甲基吡咯烷酮69重量份、改性多壁碳納米管5重量份、磷酸鋰10重量份、四氧化三鈷12重量份、三
使用普通光學顯微鏡的具體步驟
普通光學顯微鏡的使用方法裝在鏡臺下方,包括反光鏡,集光器。(1)反光鏡:裝在鏡座上面,可向任意方向轉動,它有平、凹兩面,其作用是將光源光線反射到聚光器上,再經通光孔使用方法:(一)顯微鏡的主要構造普通光學顯微鏡的構造主要分為三部分:機械部分、照明部分和光學部分。1.機械部分(1)鏡座:是顯微鏡的底座
使用普通光學顯微鏡的具體步驟
普通光學顯微鏡的使用方法裝在鏡臺下方,包括反光鏡,集光器。(1)反光鏡:裝在鏡座上面,可向任意方向轉動,它有平、凹兩面,其作用是將光源光線反射到聚光器上,再經通光孔使用方法:(一)顯微鏡的主要構造普通光學顯微鏡的構造主要分為三部分:機械部分、照明部分和光學部分。1.機械部分(1)鏡座:是顯微鏡的底座
使用普通光學顯微鏡的具體步驟
普通光學顯微鏡的使用方法裝在鏡臺下方,包括反光鏡,集光器。(1)反光鏡:裝在鏡座上面,可向任意方向轉動,它有平、凹兩面,其作用是將光源光線反射到聚光器上,再經通光孔使用方法:(一)顯微鏡的主要構造普通光學顯微鏡的構造主要分為三部分:機械部分、照明部分和光學部分。1.機械部分(1)鏡座:是顯微鏡的底座
使用普通光學顯微鏡的具體步驟
普通光學顯微鏡的使用方法裝在鏡臺下方,包括反光鏡,集光器。(1)反光鏡:裝在鏡座上面,可向任意方向轉動,它有平、凹兩面,其作用是將光源光線反射到聚光器上,再經通光孔使用方法:(一)顯微鏡的主要構造普通光學顯微鏡的構造主要分為三部分:機械部分、照明部分和光學部分。1.機械部分(1)鏡座:是顯微鏡的底座
全鋼實驗臺安裝的具體步驟
1. 全鋼實驗臺為落地型底柜:?a)?將各單元底柜按圖標位置直立擺放并調整水平,將各單元底柜以同樣的水平位置連結,如為獨立之單元底柜亦應予以適當的方式固定于實驗室地板上。b)?安裝配件,并注意各類公用系統管線不可有任何的纏繞或糾結。c)?如有需要,各單元將以同一水平做緊密結合,鄰接的抽屜及門片均在同
使用普通光學顯微鏡的具體步驟
一、取鏡1.右手握住鏡臂,左手托住鏡座。2.把顯微鏡放在實驗臺上,略偏左。安裝好目鏡和物鏡。?二、對光3.轉動轉換器,使低倍物鏡對準通光孔(物鏡的前端與載物臺要保持2厘米的距離)。4.把一個較大的光圈對準通光孔。左眼注視目鏡內(右眼睜開,便于以后同時畫圖)。轉動反光鏡,使光線通過通光孔反射到鏡筒內。
瓊脂糖親和層析的具體步驟
親和層析法親和層析是利用待分離物質和它的特異性配體間具有特異的親和力,從而達到分離目的的一類特殊層析技術。具有專一親和力的生物分子對主要有:抗原與抗體、DNA與互補DNA或RNA、酶與它的底物或競爭性抑制劑、激素(或藥物)與它們的受體、維生素和它的特異結合蛋白、糖蛋白與它相應的植物凝集素等。可親和的
雜交瘤技術的原理及具體步驟
雜交瘤技術的基本原理是通過融合兩種細胞而同時保持兩者的主要特征。這兩種細胞分別是經抗原免疫的小鼠脾細胞和小鼠骨髓瘤細胞。被特異性抗原免疫的小鼠脾細胞(B淋巴細胞)的主要特征是它的抗體分泌功能,但不能在體外連續培養,小鼠骨髓瘤細胞則可在培養條件下無限分裂、增殖,即具有所謂永生性。在選擇培養基的作用下,
定量PCR的技術原理及實驗的具體步驟
多年以來PCR技術只作為一種高靈敏的定性技術而被應用,既制約了PCR質量控制的建立,又大大制約了PCR技術的應用,近年來定量PCR的出現為PCR的應用開拓了廣闊的前景。 原理:經典PCR一般分為擴增和檢測兩個階段,常用溴乙錠染色,凝膠電泳為定性檢測手段。由于定性實際上就是定量的一種粗約表現,因此只要
細胞培養技術的細胞培養方式
高等生物是由多細胞構成的整體,在整體條件下要研究單個細胞或某一群細胞在體內(in vivo)的功能活動是十分困難的。但是如果把活細胞拿到體外(in vitro)培養進行觀察和研究,則要方便得多。活細胞離體后要在一定的生理條件下才能存活和進行生理活動,特別是高等動植物細胞要求的生存條件極其嚴格,稍有不
使用推拉測力計容易忽視的具體步驟
計量是生產的眼睛,而測力計又是計量的眼睛,每一個使用測力計的人都應該像愛護自己眼睛一樣地愛護測力計.但僅僅愛護是不夠的了解測力計的工作原理和各項技術要求,延長測力計的壽命是一個儀器操作員的基本職責,也是衡量一個技術員和測力計操作者能力水平高低的重要標準之一,而操作者在使用測力計容易忽視的細節有哪些?