電穿孔技術的應用
當細胞置于非常高的電場中,細胞膜就變得具有通透性,能讓外界的分子擴散進細胞內,這一現象稱為電穿孔。運用這一技術,許多物質,包括DNA、RNA、蛋白質、藥物、抗體和熒光探針都能載入細胞。作為一種基因轉導方法,電穿孔已被廣泛用于各種細胞類型,包括細菌、酵母、植物和動物細胞;而且,它還能作為注射方法(稱為電注射),把各種外源物質引入活細胞。......閱讀全文
電穿孔技術的應用
當細胞置于非常高的電場中,細胞膜就變得具有通透性,能讓外界的分子擴散進細胞內,這一現象稱為電穿孔。運用這一技術,許多物質,包括DNA、RNA、蛋白質、藥物、抗體和熒光探針都能載入細胞。作為一種基因轉導方法,電穿孔已被廣泛用于各種細胞類型,包括細菌、酵母、植物和動物細胞;而且,它還能作為注射方法(稱為
電穿孔技術醫療應用
不可逆的電穿孔在Gustave Roussy研究所,由Lluis M Mir領導的第一批研究醫療應用的電穿孔。在這種情況下,他們研究了使用可逆電穿孔與不可滲透的大分子。東弗吉尼亞醫學院和奧多明尼昂大學的研究人員首先研究了如何在人類細胞上使用納秒脈沖,并于2003年出版。關于不可逆的電穿孔,2007年
電穿孔技術的醫學應用特點
不可逆的電穿孔在Gustave Roussy研究所,由Lluis M Mir領導的第一批研究醫療應用的電穿孔。在這種情況下,他們研究了使用可逆電穿孔與不可滲透的大分子。東弗吉尼亞醫學院和奧多明尼昂大學的研究人員首先研究了如何在人類細胞上使用納秒脈沖,并于2003年出版。關于不可逆的電穿孔,2007年
電穿孔技術應用與藥物和基因傳遞
電穿孔還可以用于通過施加瞬時透化細胞膜的短且強烈的電脈沖來幫助將藥物或基因遞送到細胞中,從而允許運輸分子,否則不能通過細胞膜運輸。當待輸送的分子是DNA時,這個過程被稱為電化學療法,當待輸送的分子是化學治療劑或基因電轉移時。來自卡羅林斯卡研究所和牛津大學的科學家使用外來體的電穿孔在全身注射(在血液中
電穿孔的技術特點
電穿孔(Electroporation)也叫電轉染,是通過高強度的電場作用,瞬時提高細胞膜的通透性,從而吸收周圍介質中的外源分子。這種技術可以將核苷酸、DNA 與RNA、蛋白、糖類、染料及病毒顆粒等導入原核和真核細胞內。電轉化相對其它物理和化學轉化方法,是一種有價值和有效的替代方法。電穿孔是功能強大
電穿孔的技術簡介
電穿孔或電滲透是微生物學技術,其中將電場施加到細胞以增加細胞膜的滲透性,從而允許化學品,藥物或DNA被引入細胞。在微生物學中,電穿孔過程通常用于通過引入新的編碼DNA來轉化細菌,酵母或植物原生質體。如果細菌和質粒混合在一起后,質粒可以在電穿孔后轉移到細菌中,盡管取決于正在轉移的細胞穿透肽或CellS
電穿孔技術簡介
電穿孔(Electroporation)也叫電轉染,是通過高強度的電場作用,瞬時提高細胞膜的通透性,從而吸收周圍介質中的外源分子。這種技術可以將核苷酸、DNA 與RNA、蛋白、糖類、染料及病毒顆粒等導入原核和真核細胞內。電轉化相對其它物理和化學轉化方法,是一種有價值和有效的替代方法。
電穿孔技術的技術優勢
與其他常用的導入外源物質的方法相比,電穿孔具有很多優點。首先,不必象顯微注射那樣使用玻璃針,不需要技術培訓和昂貴的設備,可以一次對成百萬的細胞進行注射。第二,與用化學物質相比,電穿孔幾乎沒有生物或化學副作用。第三,因為電穿孔是一種物理方法,較少依賴細胞類型,因而應用廣泛。實際上,對大多數細胞類型,用
電穿孔技術的方法步驟
除了能使細胞膜具有通透性,讓外界的分子擴散入胞液中以外,高強度的電場脈沖也能引起細胞融合,這一現象叫做電融合。然而,在用電脈沖融合前必須使細胞相互緊密接觸,這一電融合方法在原生質融合制取雜交植物,胚胎細胞相互融合制備動物克隆方面非常有用,尤其在制取雜交瘤細胞制備單克隆抗體方面用處很大。幾個實驗室已證
電穿孔技術的物理機制
脂雙層力學電穿孔允許細胞引入高度帶電荷的分子,例如不會被動地擴散穿過疏水性雙層核心的DNA。這一現象表明,該機制是在膜上形成納米級的充水空穴。雖然電穿孔和介電擊穿這兩者都是由電場的應用引起的,所涉及的機制是根本不同的。在電介質擊穿中,阻擋材料被電離,產生導電通路。材料的變化因此是化學性質的。相比之下
電穿孔技術物理機制
脂雙層力學電穿孔允許細胞引入高度帶電荷的分子,例如不會被動地擴散穿過疏水性雙層核心的DNA。這一現象表明,該機制是在膜上形成納米級的充水空穴。雖然電穿孔和介電擊穿這兩者都是由電場的應用引起的,所涉及的機制是根本不同的。在電介質擊穿中,阻擋材料被電離,產生導電通路。材料的變化因此是化學性質的。相比之下
電穿孔技術在轉基因及動物克隆中的應用
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu第四軍醫大學全軍骨腫瘤研究所 西安 710038Institute of Orthopedi
電穿孔技術在轉基因及動物克隆中的應用
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning 郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四軍醫大學全軍骨腫瘤研究所 西安 710038 Insti
電穿孔技術在轉基因及動物克隆中的應用
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning 郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四軍醫大學全軍骨腫瘤研究所 西安 710038 Institute of Orthop
電穿孔技術在轉基因及動物克隆中的應用
郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四軍醫大學全軍骨腫瘤研究所 西安 710038 Institute of Orthopedic Oncology, Fourth Military Medical University, Xi''an 710038
不可逆的電穿孔技術簡介
在Gustave Roussy研究所,由Lluis M Mir領導的第一批研究醫療應用的電穿孔。在這種情況下,他們研究了使用可逆電穿孔與不可滲透的大分子。東弗吉尼亞醫學院和奧多明尼昂大學的研究人員首先研究了如何在人類細胞上使用納秒脈沖,并于2003年出版。關于不可逆的電穿孔,2007年,一組科學家在
CRISPR重要成果:電穿孔技術
簡單的電穿孔似乎使T細胞更容易接受新的遺傳物質,這可以加速免疫療法的發展。 加州大學舊金山分校的研究人員發表了題為“Reprogramming human T cell function and specificity with non-viral genome targeting”的文章,指
電穿孔和電融合技術
實驗概要了解細胞電穿孔(electroporation)和電融合(Electrofusion Method)的基本原理。學習電穿孔和電融合基本技術。實驗原理當細胞置于非常高的電場中,細胞膜就變得具有通透性,能讓外界的分子擴散進細胞內,這一現象稱為電穿孔。運用這一技術,許多物質,包括DNA、 ? RN
電穿孔的方法概念和應用特點
電穿孔(Electroporation)也叫電轉染,是通過高強度的電場作用,瞬時提高細胞膜的通透性,從而吸收周圍介質中的外源分子。這種技術可以將核苷酸、DNA 與RNA、蛋白、糖類、染料及病毒顆粒等導入原核和真核細胞內。電轉化相對其它物理和化學轉化方法,是一種有價值和有效的替代方法。
電穿孔或電滲透的醫療應用
不可逆的電穿孔在Gustave Roussy研究所,由Lluis M Mir領導的第一批研究醫療應用的電穿孔。在這種情況下,他們研究了使用可逆電穿孔與不可滲透的大分子。東弗吉尼亞醫學院和奧多明尼昂大學的研究人員首先研究了如何在人類細胞上使用納秒脈沖,并于2003年出版。關于不可逆的電穿孔,2007年
電穿孔或電滲透的技術簡介
電穿孔或電滲透是微生物學技術,其中將電場施加到細胞以增加細胞膜的滲透性,從而允許化學品,藥物或DNA被引入細胞。在微生物學中,電穿孔過程通常用于通過引入新的編碼DNA來轉化細菌,酵母或植物原生質體。如果細菌和質粒混合在一起后,質粒可以在電穿孔后轉移到細菌中,盡管取決于正在轉移的細胞穿透肽或CellS
腫瘤治療新技術:不可逆電穿孔技術
不可逆電穿孔技術(Irreversible electroporation,IRE)是一種電能產生的生物效應。當細胞暴露于短脈沖的高壓電場時,細胞膜對于離子和大分子的通透性增加,形成納米級孔隙,使細胞內外物質交換程度加大,該效應即為電穿孔。電穿孔可以是可逆的,也可以是不可逆的。特定條件(如極大的
電穿孔技術實驗室實踐
電穿孔是用電穿孔器,在細胞溶液中產生靜電場的專用器具進行的。將細胞懸浮液被吸取到一具有兩個鋁玻璃或塑料比色皿電極在其兩側。對于細菌電穿孔,通常使用約50微升的懸浮液。在電穿孔之前,將這種細菌懸液與質粒混合被改變。將混合物移液到比色杯中,設定電壓和電容,并將比色杯插入電穿孔儀中。該過程需要電極和懸架之
電穿孔的
脂雙層力學電穿孔允許細胞引入高度帶電荷的分子,例如不會被動地擴散穿過疏水性雙層核心的DNA。這一現象表明,該機制是在膜上形成納米級的充水空穴。雖然電穿孔和介電擊穿這兩者都是由電場的應用引起的,所涉及的機制是根本不同的。在電介質擊穿中,阻擋材料被電離,產生導電通路。材料的變化因此是化學性質的。相比之下
電穿孔的概念
電穿孔(Electroporation)也叫電轉染,是通過高強度的電場作用,瞬時提高細胞膜的通透性,從而吸收周圍介質中的外源分子。這種技術可以將核苷酸、DNA 與RNA、蛋白、糖類、染料及病毒顆粒等導入原核和真核細胞內。電轉化相對其它物理和化學轉化方法,是一種有價值和有效的替代方法。電穿孔是功能強大
電穿孔技術增強艾滋病疫苗的響應
肌肉細胞:電讓它們的膜在短時間里具有通透性 ????? 一場國際艾滋病會議的與會者得知,一種DNA疫苗給藥的新方法可能導致更廉價和更有效的針對艾滋病病毒和其它病毒的保護方法。 DNA疫苗是由遺傳物質的環組成,其中插入了來自致病微生物的基因。一旦進入人類細胞,這些基因就引發了細胞制造來
釀酒酵母的電穿孔轉化法實驗_電穿孔轉化法
實驗材料細胞試劑、試劑盒PEG3350儀器、耗材YPAD 液體培養基渦旋振蕩器實驗步驟1. 將菌株接種 100 ml 的 YPAD 液體培養基,30℃ 振蕩培養過夜,使細胞滴度達到每毫升 1X108?到 2X108?個細胞。2. 3000 g 離心 5 分鐘沉淀細胞,用 100 ml 滅菌水洗兩遍,
活體電穿孔法在基因治療方面的應用
活體電穿孔法(in vivo electroporation) 是將外源基因通過電場作用,導入動物目標組織或器官。這種方法能有效導入外源基因,可在多種組織器官上應用,并且效率較高。活體電穿孔法的原理很簡單,在直流電場作用的瞬間,細胞膜表面產生疏水或親水的微小通道105~115μm ,這種
概述活體電穿孔法在不同組織上的應用
肌肉組織 在肌肉組織中最初進行外源基因活體導入是采用電穿孔法。選擇肌肉組織作為靶組織是因為肌肉組織在體內所占比例很大,約占40 % ,而且外源基因可在肌肉中長期表達、分泌,在基因治療中經常會用到。此外,外源基因也不會因肌細胞的分裂而丟失。 皮膚 皮膚組織相對于其他組織較難進行電穿孔法的基因
概述活體電穿孔法在基因治療方面的應用
原來在基因治療中利用活體電穿孔法將抗體或化療藥物導入腫瘤中,促進抗體和化療藥物的運送來進行治療,現在則以特異的外源基因替代了抗體的應用,簡化操作步驟同時降低了費用。 首先,在皮膚瘤和腦瘤的治療中,電穿孔法可有效地將藥物基因導入治療部位。電穿孔法導入人單核細胞趨化物蛋白基因到大鼠腦瘤后,該蛋白在