概述活體電穿孔法在基因治療方面的應用
原來在基因治療中利用活體電穿孔法將抗體或化療藥物導入腫瘤中,促進抗體和化療藥物的運送來進行治療,現在則以特異的外源基因替代了抗體的應用,簡化操作步驟同時降低了費用。 首先,在皮膚瘤和腦瘤的治療中,電穿孔法可有效地將藥物基因導入治療部位。電穿孔法導入人單核細胞趨化物蛋白基因到大鼠腦瘤后,該蛋白在腫瘤的局部表達,同時在基因導入的部位可觀察到巨噬細胞和白細胞的聚集。 同時有科學家從另一角度研究電穿孔對治療腫瘤方面的作用,利用高電場強度的陡脈沖促使腫瘤細胞發生不可逆性電擊穿而最終死亡,這種方法很適于局部組織腫瘤的治療。 此外,活體電穿孔法還可以參與癌癥的治療,通過活體電穿孔法將基因導入機體后,導入組織可成為分泌抗體等物質的臨時分泌器官,以抵抗癌細胞的侵蝕或代償由于癌細胞的侵蝕而造成的機體多種生理機能的喪失。 除了可以利用活體電穿孔法對腫瘤進行局部治療外,還可以治療機體的內分泌系統和免疫系統的疾病。可在機體局部以活體電穿孔法導......閱讀全文
概述活體電穿孔法在基因治療方面的應用
原來在基因治療中利用活體電穿孔法將抗體或化療藥物導入腫瘤中,促進抗體和化療藥物的運送來進行治療,現在則以特異的外源基因替代了抗體的應用,簡化操作步驟同時降低了費用。 首先,在皮膚瘤和腦瘤的治療中,電穿孔法可有效地將藥物基因導入治療部位。電穿孔法導入人單核細胞趨化物蛋白基因到大鼠腦瘤后,該蛋白在
活體電穿孔法在基因治療方面的應用
活體電穿孔法(in vivo electroporation) 是將外源基因通過電場作用，導入動物目標組織或器官。這種方法能有效導入外源基因，可在多種組織器官上應用,并且效率較高。活體電穿孔法的原理很簡單,在直流電場作用的瞬間,細胞膜表面產生疏水或親水的微小通道105～115μm ,這種
概述活體電穿孔法在不同組織上的應用
肌肉組織 在肌肉組織中最初進行外源基因活體導入是采用電穿孔法。選擇肌肉組織作為靶組織是因為肌肉組織在體內所占比例很大,約占40 % ,而且外源基因可在肌肉中長期表達、分泌,在基因治療中經常會用到。此外,外源基因也不會因肌細胞的分裂而丟失。 皮膚 皮膚組織相對于其他組織較難進行電穿孔法的基因
概述活體電穿孔的法的特點
活體電穿孔法基因導入和表達效率較高,它的特點主要在以下幾個方面: 1、首先,靶器官的選擇面廣 理論上任何組織和器官都可以作為活體電穿孔的靶器官。 在用于基因治療方面，要考慮到靶器官組織生理特性。如果所選擇的局部組織細胞不能把所轉移基因的表達產物分泌到外周血液循環中,則在某種意義上說已失去了
活體電穿孔法介紹
1、什么是活體電穿孔 活體電穿孔法（in vivo electroporation）是將外源基因通過電場作用，導入動物目標組織或器官。由于這種方法能有效導入外源基因，可在多種組織器官上應用，并且效率較高。活體電穿孔法的原理很簡單，在直流電場作用的瞬間，細胞膜表面產生疏水或親水的微小通道105～115
活體電穿孔法介紹
1、什么是活體電穿孔活體電穿孔法(in vivo electroporation) 是將外源基因通過電場作用，導入動物目標組織或器官。由于這種方法能有效導入外源基因，可在多種組織器官上應用,并且效率較高。活體電穿孔法的原理很簡單,在直流電場作用的瞬間,細胞膜表面產生疏水或親水的微小通道105～115
活體電穿孔法介紹
1、什么是活體電穿孔 活體電穿孔法(in vivo electroporation) 是將外源基因通過電場作用，導入動物目標組織或器官。由于這種方法能有效導入外源基因，可在多種組織器官上應用，并且效率較高。活體電穿孔法的原理很簡單，在直流電場作用的瞬間，細胞膜表面產生疏水或親水的微小通
活體電穿孔法介紹-3
肝 臟由于肝臟的生理代謝十分旺盛，因此外源基因在肝臟中的表達時間往往很短暫，而且表達產物的水平也較低。為減少出血，可從小靜脈注入，然后在肝臟上施加電場，能顯著增強基因的表達。睪 丸相對于其他的轉基因方法，活體電穿孔法可使外源基因在睪丸中產生大量和持久的表達。此外，很多研究人員希望利用活體電穿孔法將外
活體電穿孔法介紹-1
1、什么是活體電穿孔活體電穿孔法(in vivo electroporation) 是將外源基因通過電場作用，導入動物目標組織或器官。由于這種方法能有效導入外源基因，可在多種組織器官上應用，并且效率較高。活體電穿孔法的原理很簡單，在直流電場作用的瞬間，細胞膜表面產生疏水或親水的微小通道105～1
活體電穿孔法介紹（一）
1、什么是活體電穿孔活體電穿孔法(in vivo electroporation) 是將外源基因通過電場作用，導入動物目標組織或器官。由于這種方法能有效導入外源基因，可在多種組織器官上應用,并且效率較高。活體電穿孔法的原理很簡單,在直流電場作用的瞬間,細胞膜表面產生疏水或親水的微小通道105～1
活體電穿孔法介紹（二）
電 壓電穿孔時在能量導入一定的情況下設計施加電壓的值。電壓過低或過高都會影響外源基因的表達。電壓過低時,無法造成細胞膜表面狀態的改變,因而外源D不能進入細胞內。電壓過高時,局部組織積聚過多熱量,造成細胞的死亡或組織失去功能,即使外源基因導入細胞,也無法進行正常的表達。哺乳動物常用的活體電壓大多為20
活體電穿孔法介紹-2
電 壓電穿孔時在能量導入一定的情況下設計施加電壓的值。電壓過低或過高都會影響外源基因的表達。電壓過低時，無法造成細胞膜表面狀態的改變，因而外源D 不能進入細胞內。電壓過高時，局部組織積聚過多熱量，造成細胞的死亡或組織失去功能，即使外源基因導入細胞，也無法進行正常的表達。哺乳動物常用的活體電壓大多
關于活體電穿孔法的基本介紹
活體電穿孔法(in vivo electroporation) 是將外源基因通過電場作用，導入動物目標組織或器官。由于這種方法能有效導入外源基因，可在多種組織器官上應用,并且效率較高。活體電穿孔法的原理很簡單,在直流電場作用的瞬間,細胞膜表面產生疏水或親水的微小通道105～115μm ,這種通道
活體電穿孔法的基本信息介紹
近年來活體電穿孔法用于轉基因研究的報道不斷增多,在基因治療方面的優勢也日趨顯著,是一種很好的活體基因導入方法。 活體電穿孔法可用于檢測瞬時表達系統中載體的表達狀況。大量的研究表明活體電穿孔法在基因治療方面有非常好的應用前景。因此目國內外對活體電穿孔法介導外源基因轉移的研究越來越多。
活體電穿孔法與其他活體基因導入方法的比較
到目前為止,非病毒載體的活體基因導入方法有直接注射法、脂質體法、基因槍法、電穿孔法等。每一種方法都有其各自的特殊性,因此很難將這幾種方法進行簡單的比較。 1、直接注射法 可將外源基因直接注射到靶位點或血管中,但此種方法不適合以肌肉作為靶器官,它的外源基因表達效率極低,僅為電穿孔法的百分之一。
皮膚干細胞在基因治療方面的應用介紹
干細胞除應用于外傷性皮膚缺損以及皮膚潰瘍等導致的嚴重皮膚缺損的移植治療外，還可以用來研究基因的作用以及某些疾病發病的基因機制，同時也可以用來對一些遺傳性皮膚病進行基因治療，包括導入標志性基因或一個異源基因，使細胞內原有基因過度表達(增加功能)，或基因打靶(失去功能)以及誘導某個基因的突變等。由于
分子克隆技術在基因治療方面的應用
通過遺傳工程看到癌細胞具有逆轉為正常細胞的可能性，例如SV40病毒引起的小鼠腫瘤細胞，在溫度高時可逆轉為正常細胞。為治療半乳糖血癥，用帶有大腸桿菌乳糖操縱子的λ噬菌體去感染半乳糖血癥患者的離體培養細胞，發現這種細胞的半乳糖苷酶達到了正常水平，并確實能代謝半乳糖。
知識課堂之活體電穿孔法其他活體基因導入方法的比較
活體電穿孔法(in vivo electroporation) 是將外源基因通過電場作用，導入動物目標組織或器官。由于這種方法能有效導入外源基因，可在多種組織器官上應用,并且效率較高。活體電穿孔法的原理很簡單,在直流電場作用的瞬間,細胞膜表面產生疏水或親水的微小通道105～115μm ,這種通道
概述RNAi在基因治療領域中的應用
RNAi作為一種高效的序列特異性基因剔除技術在傳染性疾病和惡性腫瘤基因治療領域發展極為迅速。在利用RNAi技術對HⅣ-1、乙型肝炎、丙型肝炎等進行基因治療研究中發現，選擇病毒基因組中與人類基因組無同源性的序列作為抑制序列可在抑制病毒復制的同時避免對正常組織的毒副作用。同時將抑制序列選擇在特定的位
概述啤酒酵母在釀酒方面的應用
啤酒酵母是啤酒生產上常用的典型的上面發酵酵母。除用于釀造啤酒、酒精及其他的飲料酒外，還可發酵面包。菌體維生素、蛋白質含量高，可作食用、藥用和飼料酵母，還可以從其中提取細胞色素C、核酸、谷胱甘肽、凝血質、輔酶A和三磷酸腺苷等。在維生素的微生物測定中，常用啤酒酵母測定生物素、泛酸、硫胺素、吡哆醇和肌
概述殼聚糖在醫藥行業方面的應用
國家藥典（四部）中規定，殼聚糖用于藥用輔料，崩解劑，增稠劑等。 1.載體材料 用殼聚糖作為藥物載體可以穩定藥物中的成分，促進藥物吸收，延緩或控制藥物的溶解速度，幫助藥物達到靶器官，并且抗酸、抗潰瘍，防止藥物對胃的刺激。 殼聚糖可用于制備微球，制成的微球黏附性好，比較適于口、鼻、胃腸等黏膜給
釀酒酵母的電穿孔轉化法實驗_電穿孔轉化法
實驗材料細胞試劑、試劑盒PEG3350儀器、耗材YPAD 液體培養基渦旋振蕩器實驗步驟1. 將菌株接種 100 ml 的 YPAD 液體培養基，30℃ 振蕩培養過夜，使細胞滴度達到每毫升 1X108?到 2X108?個細胞。2. 3000 g 離心 5 分鐘沉淀細胞，用 100 ml 滅菌水洗兩遍，
簡述薄層色譜法在食品和營養方面的應用
食品中的營養成分是蛋白質、氨基酸、糖類、油和脂肪、維生素、食用色素等。與食品和營養有害的物質則有殘留農藥、致癌的黃曲霉素等。這些成分都可用薄層色譜法定性和定量。蛋白質和多肽水解為氨基酸，對不同來源的動物性和植物性蛋白水解后產生不同的氨基酸進行定性和定量，有助于解決蛋白質的結構和食品營養問題。二十
薄層色譜法在藥物和藥物代謝方面的應用
薄層色譜法在合成藥物和天然藥物中的應用很廣。有些文獻和內容偏重于合成藥物、化合物及其代謝產物，有文獻為在中草藥分析中的應用。每一類藥物，例如磺胺、巴比妥、苯駢噻嗪、甾體激素、抗菌素、生物堿、強心甙、黃酮、揮發油和萜等，都包括幾種或十幾種化學結構和性質非常相似的化合物，可以在上述文獻中找出一、二種
薄層色譜法在食品和營養方面的應用介紹
食品中的營養成分是蛋白質、氨基酸、糖類、油和脂肪、維生素、食用色素等。與食品和營養有害的物質則有殘留農藥、致癌的黃曲霉素等。這些成分都可用薄層色譜法定性和定量。蛋白質和多肽水解為氨基酸，對不同來源的動物性和植物性蛋白水解后產生不同的氨基酸進行定性和定量，有助于解決蛋白質的結構和食品營養問題。二十
質構儀在造紙法煙草薄片脆性方面的應用
造紙法煙草薄片是運用煙葉再造技術將煙草生產過程中的煙梗、煙末以及部分煙葉按造紙原理經過加工處理，制成接近天然煙葉的薄片，在卷煙配方中添加一定的煙草薄片，可以改善煙支的燃燒性能和降低焦油釋放量，降低卷煙成本，還可以回收利用煙梗、煙末、碎煙絲減少資源浪費。???煙草薄片的脆性直接影響著煙草脆片的耐加工型
活體成像概述
一、引子 ?自從Roentgen發現了X光的用途，動物活體成像就走進了科學家的視野。活體成像有很多種模式，除了X光的離子輻射成像，還有聲音、磁鐵甚至光光成像。每種都有缺點和優點，舉例來說，要確定解剖結構的位置和形狀，CT掃描、MRI、超聲波可能是較好的選擇，但涉及到腫瘤細胞的注射位置、表達層面，他們
蜂蠟在農業方面的應用
在農業方面，主要是將蜂蠟用于保存果蔬和用于飼料添加方面。果蔬保存陳秀芳等認為，涂于新鮮果蔬表面的可食用膜通過控制新鮮果蔬的呼吸強度，阻止果蔬組織的水分損失，從而延長果蔬的貨架壽命。可食用膜，顧名思義，是一種由可食用的成分組成的膜。因為采后的果蔬仍進行著旺盛的生命活動，最典型的是它的呼吸作用。呼吸過程
電穿孔法穩定轉染
? ? ? ? ? ? 實驗材料 L8057-Y10細胞 D-PBSA 儀器、耗材 培養瓶 培養板
電穿孔法穩定轉染
實驗材料L8057-Y10細胞D-PBSA儀器、耗材培養瓶培養板F12 FB培養基G418(Invitrogen)選擇性培養基電穿孔電穿孔專用杯電穿孔儀II電穿孔儀-II配套的效能擴增器-Plus實驗步驟表達載體與 DNA 制備：pSVTKGH，線性化 [ Selden et al.，1986]此載