蛋白芯片技術的常用載體介紹
常用的材質有玻片、硅、云母及各種膜片等。理想的載體表面是滲透濾膜(如硝酸纖維素膜)或包被了不同試劑(如多聚賴氨酸)的載玻片。外形可制成各種不同的形狀。Lin,SR等人引采用APTS-BS3技術增強芯片與蛋白質的結合。......閱讀全文
蛋白芯片技術的常用載體介紹
常用的材質有玻片、硅、云母及各種膜片等。理想的載體表面是滲透濾膜(如硝酸纖維素膜)或包被了不同試劑(如多聚賴氨酸)的載玻片。外形可制成各種不同的形狀。Lin,SR等人引采用APTS-BS3技術增強芯片與蛋白質的結合。
常用的基因轉染技術病毒載體介紹
1、逆轉錄病毒載體 逆轉錄病毒為RNA病毒,它們的基因組編碼在一條單鏈RNA上,病毒進入細胞通過逆轉錄作用,病毒RNA即轉變為雙鏈DNA分子,DNA進入細胞核并整合在細胞染色體中,這種整合的病毒稱為原病毒。在原病毒的兩端各有一長末端重復序列(LTR),LTR內側還有為復制所必需的其他順序,包括
固定化細胞技術載體要求及常用載體介紹
①載體應是親水的,疏水載體與有機溶劑相同的變性影響。②載體也是要求有一定的機械強度和穩定性。③常用的載體包括:1、天然高分子(纖維素、瓊脂糖、淀粉、葡萄糖凝膠、膠原及其衍生物等)2、合成高聚物(尼龍。多聚氨基酸等)3、無機支持物(多孔玻璃、金屬氧化物等)
分子克隆的常用載體介紹
DNA片段的克隆需要合適的載體,載體或是質粒,或是噬菌體,或是病毒,通常大多經過人工改造[地的。作為載體必須具備兩條件:一是該載體在細胞內必須能自主復制,即必須具備復制原點;二是該載體必須具備適合的酶切位點,且這些酶切位點不在復制原點區域內。以上兩條,保證了載體的可繁殖性和可利用性。為了便于獲得陽隆
蛋白芯片技術的原理
蛋白芯片技術的研究對象是蛋白質,其原理是對固相載體進行特殊的化學處理,再將已知的蛋白分子產物固定其上(如酶、抗原、抗體、受體、配體、細胞因子等),根據這些生物分子的特性,捕獲能與之特異性結合的待測蛋白(存在于血清、血漿、淋巴、間質液、尿液、滲出液、細胞溶解液、分泌液等),經洗滌、純化,再進行確認和生
分子克隆的常用載體
DNA片段的克隆需要合適的載體,載體或是質粒,或是噬菌體,或是病毒,通常大多經過人工改造[地的。作為載體必須具備兩條件:一是該載體在細胞內必須能自主復制,即必須具備復制原點;二是該載體必須具備適合的酶切位點,且這些酶切位點不在復制原點區域內。以上兩條,保證了載體的可繁殖性和可利用性。為了便于獲得陽隆
分子克隆常用載體
分子克隆常用載體 DNA片段的克隆需要合適的載體,載體或是質粒,或是噬菌體,或是病毒,通常大多經過人工改造[地的。作為載體必須具備兩條件:一是該載體在細胞內必須能自主復制,即必須具備復制原點;二是該載體必須具備適合的酶切位點,且這些酶切位點不在復制原點區域內。以上兩條,保證了載體的可繁殖性和可利用
蛋白芯片技術解析(一)
人類基因組測序計劃完成之后,科學家們憑借良好的DNA芯片及堅實的生物信息學平臺可以全面地了解生命細胞系統。然而在不同的細胞生理 ?狀態下,細胞內蛋白表達及蛋白的功能存在著差異,細胞蛋白質組存在著差異。而且多種因素影響著細胞在不同環境下的生理狀態,比如,細胞信號分子,細胞間及細胞與基質的相互作用
蛋白芯片技術解析(二)
蛋白芯片應用:蛋白芯片檢測蛋白芯片檢測技術按照模式和應用的不同可以分為:正相和反相檢測技術。目前廣泛使用的是正相蛋白芯片分析技術,它利用不同樣品與固定在芯片上的大量已知捕捉分子的相互作用,來同時進行多參數的檢測分析。這項技術包括了用于識別和定量目標蛋白的抗體芯片技術和用于分析蛋白和固定結合分子相互作
間接凝集反應的概念和常用載體介紹
間接凝集反應是將可溶性抗原(或抗體)先吸附或偶聯與免 疫無關的,大小合適的顆粒狀載體表面,使 之形成致敏顆粒,然后與相應抗體反應(抗 原)作用,在適宜的電解質存在條件下,出 現特異性的凝集現象,稱為間接凝集反應。?常用的載體顆粒有人o型紅細胞、綿羊紅 細胞、乳膠顆粒等。如載體顆粒是紅細胞,稱間接血凝
常用的質粒載體有哪些
載體種類:質粒、噬菌體、腺病毒載體、逆轉錄病毒載體質粒特點:存在于細菌染色體外的小型環狀DNA分子。具有自我復制功能。帶有抗性基因及表型識別等遺傳性標記物。經改造后具有多克隆位點。舉例:pMD-18T質粒、pUCl9質粒、pBR322質粒等
蛋白芯片技術的探針的制備方法
低密度蛋白質芯片的探針包括特定的抗原、抗體、酶、吸水或疏水物質、結合某些陽離子或陰離子的化學集團、受體和免疫復合物等具有生物活性的蛋白質。制備時常常采用直接點樣法,以避免蛋白質的空間結構改變。保持它和樣品的特異性結合能力。高密度蛋白質芯片一般為基因表達產物,如一個cDNA文庫所產生的幾乎所有蛋白質均
滴丸制備的常用載體有哪些
(1)水溶性:聚乙二醇(PEG) 類,以PEG4000或6000為宜。它們的熔點低(55-60℃),毒性較低,化學性質穩定(在100℃以上才分解)。能與多數藥物配伍,具有良好的水溶性,亦能溶于多種有機溶劑,能使難溶性藥物以分子狀態分散于載體中。在溶劑蒸發過程中,粘度逐漸增大,可阻止藥物分子聚集。(2
生物芯片技術的載體種類介紹
玻璃片、PVDF膜、聚丙烯酰氨凝膠、聚苯乙烯微珠、磁性微珠。
微孔板蛋白芯片技術的特點和應用
Mendoza等在傳統微滴定板的基礎上,利用機械手在96孔的每一個孔的平底上點樣成同樣的四組蛋白質,每組36個點(4×36陣列),含有8種不同抗原和標記蛋白。可直接使用與之配套的全自動免疫分析儀,測定結果。適合蛋白質的大規模、多種類的篩選。
常用的無損檢測技術介紹
①射線照相檢查。當穿透被測物體的每個部分時,通過利用強度衰減的差異,使用X射線或γ射線檢測被測物體的缺陷。如果吸收的光線投射到X射線膠片上,則在顯影之后,可以獲得顯示物體厚度變化和內部缺陷的照片。如果使用熒光屏而不是膠片,則可以直接觀察被檢物體的內部狀況。 ②超聲波測試。利用對象本身或缺陷的聲
常用的破乳技術介紹
①加鹽;②使用加熱 - 冷卻萃取容器;③通過玻璃棉塞過濾乳化液樣品;④通過相過濾紙過濾乳化液樣品;⑤通過離心作用;⑥加進少量的不同的有機溶劑。
質粒載體的載體大小的介紹
大的質粒(大于15kb)不會很好轉化而且DNA產量通常很低。在設計實驗時要考慮到加入插入片段的最終載體大小,盡量用更小的載體。 兼容性 當多于一個質粒載體必須同時存在于同一個細菌細胞中,這兩個質粒的復制子必須是兼容的。當他們不能穩定地共存時,則認為這兩個質粒是不兼容的。 選擇/檢測插入片段
常用顯帶技術介紹
1.G帶這是目前使用最廣泛的一種帶型,操作簡單,帶紋清晰,標本可長期保存,重復性好。其方法是將染色體標本經胰蛋白酶、NaOH、檸檬酸鹽或尿素等試劑處理后,再經吉姆薩染色,顯示的深淺交替的橫紋便是G帶。染色體的G帶在普通光學顯微鏡下即可觀察。2.Q帶是指染色體標本經氮芥喹吖因等熒光染料處理后顯示的帶。
催化劑載體的概念和常用種類
催化劑載體又稱擔體(support),是負載型催化劑的組成之一,是催化劑活性組分的骨架,支撐活性組分,使活性組分得到分散,同時還可以增加催化劑的強度。但載體本身一般并不具有催化活性。多數載體是催化劑工業中的產品,常用的有氧化鋁載體、硅膠載體、活性炭載體及某些天然產物如浮石、?硅藻土等。常用“活性組分
克隆載體的技術要求
①能在宿主細胞中復制繁殖,而且最好要有較高的自主復制能力。②容易進入宿主細胞,而且進入效率越高越好。③容易插入外來核酸片段,插入后不影響其進入宿主細胞和在細胞中的復制。這就要求載體DNA上要有合適的限制性核酸內切酶位點。④容易從宿主細胞中分離純化出來, 這才便于重組操作。⑤有容易被識別篩選的標志,當
基因治療時代到來:常用基因治療載體的介紹與選擇
基因治療載體分為兩大類:病毒載體(主要包括慢病毒、腺病毒、逆轉錄病毒、腺相關病毒等),非病毒載體(主要包括裸露DNA、脂質體、納米載體等) 在講基因治療載體前,我們先講一下基因治療中的兩個概念:in vivo和ex vivo。 in vivo:活體直接轉移,將帶有遺傳物質的載體直接注射到實驗
病毒包裝技術5——腺病毒載體的制備介紹
1 菌液的準備 1.1. 取含目的質粒的甘油菌液(-80℃或-20℃冰箱中),待菌液融化后,在超凈臺用接種環劃線于氨芐抗性的平板上,37℃倒置培養12-16h。待平板長出菌落,挑選生長狀態良好的單克隆菌落。若無目的質粒的菌液,則需取庫存質粒進行轉化,然后挑單克隆搖菌。 1.2. 將單
蛋白芯片的主要類型
蛋白芯片主要有三類:蛋白質微陣列、微孔板蛋白質芯片、三維凝膠塊芯片等。
蛋白芯片的主要種類
蛋白芯片主要有三類:蛋白質微陣列、微孔板蛋白質芯片、三維凝膠塊芯片等。蛋白質微陣列哈佛大學的Macbeath和SchreiberL等報道了:通過點樣機械裝置制作蛋白質芯片的研究,將針尖浸入裝有純化的蛋白質溶液的微孔中,然后移至載玻片上,在載玻片表面點上1nl的溶液,然后機械手重復操作,點不同的蛋白質
藥物載體的介紹
藥物載體,是指能改變藥物進入人體的方式和在體內的分布、控制藥物的釋放速度并將藥物輸送到靶向器官的體系。
蛋白芯片檢測ENA
?大淵自身抗體九項IgG抗體蛋白芯片檢測系統是一種定性的蛋白芯片,共集合有抗dsDNA抗體、抗Histone抗體、 抗Smith抗體、抗SSA抗體、抗SSB抗體、抗Scl-70抗體、抗JO-1抗體、抗Rib-P抗體、抗RNP抗體九個指標。采用間接法原理,特異性強,靈敏度高。標記方法為膠體金標
蛋白芯片檢測Hp
大淵幽門螺旋桿菌(HP)IgG抗體蛋白芯片檢測系統(PBT-HP-01-A型芯片)是一種定性的蛋白芯片,共放有細胞毒素相關蛋白(CagA),尿素酶C(ureC)二個指標,采用間接法原理,特異性強,靈敏度高。標記方法為免疫金標記。 大淵幽門螺旋桿菌(HP)現癥蛋白芯片鑒定檢測系統(PBT-HP-02
蛋白芯片的基本原理及技術研究現狀
隨著分子生物學芯片技術研究工作的進一步深入開展,DNA芯片技術已經被逐漸應用于對生物樣品中的各種已知或未知的核酸序列表達的檢測和比較研究。但是,作為生物體細胞中實施化學反應功能成分的蛋白質,其相當部分與活性基因所表達的mRNA之間未能顯示出直接的關系,因此使作為高通量基因表達分析平臺的cDNA芯片技
蛋白芯片的基本原理及技術研究現狀
作者:陳瑋瑩 來源:《國外醫學臨床生物化學及檢驗學分冊》汕頭大學醫學院 陳瑋瑩 綜述 溫博貴 隨著分子生物學芯片技術研究工作的進一步深入開展,NDA芯片技術已經被逐漸應用于對生物樣品中的各種已知或未知的核酸序列表達的檢測和比較研究。但是,作為生物體細胞中實施化學反應功能成分的蛋白質,其相當部分與活性