弗氏佐劑的配制方法
按比例將羊毛脂與石蠟油置容器內,用超聲波使之混勻,高壓滅菌,置4℃下保存備用。在免疫動物前,先將弗氏佐劑與抗原按一定比例混合,佐劑和抗原體積比一般為1:1,制備成"油包水"乳狀液。因為含SDS很易促使其乳化成油包水抗原乳化復合物,注射入動物體內時一定要保持乳化狀態。抗原用量視抗原分子量不同及免疫原性及免疫動物不同而有一定差異,無統一標準和固定模式。一般是每兔(約2kg重)或每羊(約20kg重)第1次注射抗原1mg,以后逐次增加抗原量,最多每次不超過3mg。......閱讀全文
弗氏佐劑的配制方法
按比例將羊毛脂與石蠟油置容器內,用超聲波使之混勻,高壓滅菌,置4℃下保存備用。在免疫動物前,先將弗氏佐劑與抗原按一定比例混合,佐劑和抗原體積比一般為1:1,制備成"油包水"乳狀液。因為含SDS很易促使其乳化成油包水抗原乳化復合物,注射入動物體內時一定要保持乳化狀態。抗原用量視抗原分子量不同及免疫原性
弗氏佐劑的配制方法
按比例將羊毛脂與石蠟油置容器內,用超聲波使之混勻,高壓滅菌,置4℃下保存備用。在免疫動物前,先將弗氏佐劑與抗原按一定比例混合,佐劑和抗原體積比一般為1:1,制備成"油包水"乳狀液。因為含SDS很易促使其乳化成油包水抗原乳化復合物,注射入動物體內時一定要保持乳化狀態。抗原用量視抗原分子量不同及免疫原性
弗氏佐劑的配制方法
按比例將羊毛脂與石蠟油置容器內,用超聲波使之混勻,高壓滅菌,置4℃下保存備用。在免疫動物前,先將弗氏佐劑與抗原按一定比例混合,佐劑和抗原體積比一般為1:1,制備成"油包水"乳狀液。因為含SDS很易促使其乳化成油包水抗原乳化復合物,注射入動物體內時一定要保持乳化狀態。抗原用量視抗原分子量不同及免疫原性
弗氏佐劑的使用方法
(1)研磨法:先將佐劑加熱并取適量放入無菌的玻璃研缽內,待冷卻后再緩緩滴入等體積的抗原溶液,邊滴邊按同一方向研磨,滴加抗原的速度要慢。待抗原全部加入后,繼續研磨一段時間,使之成為乳白色粘稠的油包水乳劑。本法適于制備大量的佐劑抗原,缺點是研缽壁上粘附大量乳劑,抗原損失較大。(2)注射器混合法:將等量的
弗氏佐劑的功能特點
弗氏體即弗氏佐劑是動物實驗中最常用的佐劑,分為不完全弗氏佐劑和完全弗氏佐劑。不完全弗氏佐劑是液體石蠟與羊毛脂混合而成,組分比為1~5:1,可根據需要而定,通常為2:1。不完全佐劑中加卡介苗(最終濃度為2~20mg/ml)或死的結核分枝桿菌,即為完全弗氏佐劑(FCA)。一般首次注射時用1/2體積FCA
弗氏佐劑的概念和作用
弗氏體即弗氏佐劑是動物實驗中最常用的佐劑,分為不完全弗氏佐劑和完全弗氏佐劑。不完全弗氏佐劑是液體石蠟與羊毛脂混合而成,組分比為1~5:1,可根據需要而定,通常為2:1。不完全佐劑中加卡介苗(最終濃度為2~20mg/ml)或死的結核分枝桿菌,即為完全弗氏佐劑(FCA)。一般首次注射時用1/2體積FCA
福氏佐劑的成分和配制方法
常用的佐劑是福氏佐劑(Freund adjuvant),其成分通常是羊毛脂1份、石臘油5份,羊毛脂與石臘油的比例,視需要可調整為1:2~9(V/V),這是不完全福氏佐劑,在每毫升不完全佐劑加入1~20mg卡介苗就成為完全佐劑。配制方法:按比例將羊毛脂與石蠟油置容器內,用超聲波使之混勻,高壓滅菌,置4
多克隆抗體制備實驗_弗氏佐劑免疫法
抗原通常是由多個抗原決定簇組成的,由一種抗原決定簇刺激機體,由一個B淋巴細胞接受該抗原所產生的抗體稱之為單克隆抗體(Monclone antibody)。由多種抗原決定簇刺激機體,相應地就產生各種各樣的單克隆抗體,這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體,機體內所產生的抗體就是多克隆抗體;除了抗原決定
Bouin氏固定液的配制方法
Bouin氏固定液 苦味酸飽和水溶液 75ml 福爾馬林(40%甲醛) 25ml 冰醋酸 5ml 1g苦味酸可制成75ml飽和水溶液。 先將苦味酸溶解成水溶液,然后再加入福爾馬林和冰醋酸搖勻即成。
弗氏細胞壓碎器的用途
弗氏細胞壓碎器(French press)是破碎細胞和制備無細胞提取物的裝置,利用壓力破碎細胞。一種用于破碎細胞和制備無細胞提取物的裝置。細胞懸液置于高壓下強力擠出小孔,壓力突然降低以及剪切力的作用導致細胞爆裂破碎。
米氏散射與弗朗和弗衍射有何差別?
采用米氏理論能更準確地反映不同粒徑顆粒的散射規律,使激光粒度儀的測試下限更小,結果更準確。弗朗和弗衍射理論是米氏理論的近似,對細顆粒的誤差較大。百特公司的激光粒度儀目前已采用全程米氏散射理論。?
瑞氏(Wright)染色液的配制方法
瑞氏(Wright)染色液 瑞氏染料粉末 0.3g 甘油 3ml 甲醇 97ml 將染料粉末置于干燥的乳缽內研磨,先加甘油,后加甲醇,放玻璃瓶中過夜,過濾即可。
關于弗氏鏈霉菌的基本介紹
弗氏鏈霉菌氣絲落英淡粉色或粉色。基絲無色或微黃色。在大部分培養基內無可溶色素。克氏合成1號瓊脂:氣絲荷花白色。 蔗糖硝酸鹽瓊脂:基絲麥芽糖黃色。可溶色素無或微黃色。葡糖天冬素瓊脂:氣絲落英淡粉色。基絲微黃色。高氏合成1號瓊脂:氣絲荷花白色、淺粉色。基絲淡黃色。淀粉合成瓊脂:氣絲微白色。基絲無色
佐劑(adjuvant)的制備和作用
一、概念 ?佐劑(adjuvant)是指能夠增強免疫應答或改變免疫應答類型的物質,應用時可與抗原同時或預先注射于機體。佐劑本身可以有免疫原性,也可以沒有免疫原性。?應用佐劑的目的是為了提高抗原對機體的免疫原性,從而提高抗體的效價。顆粒性抗原(如細菌、細胞)因具有較強的免疫原性,一般情況下不使用佐劑即
免疫佐劑的種類都有哪些?
1. 化合物:包括氫氧化鋁、礦物油、吐溫-80、弗氏不完全佐劑(羊毛脂與液狀石蠟的混合物)以及人工合成的多聚肌苷酸:胞苷酸、脂質體等。 2. 生物制劑:①經處理改造的細菌及其代謝產物,如卡介苗、脂多糖(LPS)和類脂A、源于分枝桿菌的胞壁酰二肽等;②細胞因子及熱休克蛋白等。 最常用于免疫動物
小鼠免疫實驗
實驗方法原理 實驗材料 任意品系小鼠(6~8 周)試劑、試劑盒 PBS完全和不完全弗氏佐劑抗原儀器、耗材 22-G 注射針頭帶塞的 3 ml 注射器雙頭帶塞的連接器無菌剪刀剃須刀片解剖刀片木制涂棒實驗步驟 1. 準備等體積 PBS 含 25~100 μg 抗原和弗氏完全佐劑的乳化液(200~40
弗布利氏綜合征的病因
弗布利氏綜合征為性連鎖顯性遺傳疾病,致病基因定位于X染色體長臂中段Xq21至Xq24。因此,半合子男性病情重,而雜合子女性病情表現多樣,多數輕度異常(如僅有角膜環生狀混濁),甚至無癥狀,少數重如男性。該基因突變導致α-半乳糖苷酶A(一種溶酶體水解酶)缺乏,使終端α-半乳糖殘基不能從中性糖鞘脂(n
弗氏細胞壓碎器的原理和作用
弗氏細胞壓碎器是破碎細胞和制備無細胞提取物的裝置,利用壓力破碎細胞。一種用于破碎細胞和制備無細胞提取物的裝置。細胞懸液置于高壓下強力擠出小孔,壓力突然降低以及剪切力的作用導致細胞爆裂破碎。
弗布利氏綜合征的診斷
弗布利氏綜合征雖有許多特征性表現,但臨床誤診10年以上者并不少見。一般來講,Fabrys病患者的發病年齡在兒童晚期或青少年早期,男性發病,女性為攜帶者或輕癥患者,B型和AB型血型者發病早且較嚴重。患者平均存活年齡為50歲,女性基因攜帶者的生存年齡較長,約70歲。死因主要是腎衰或心腦血管并發癥。
弗布利氏綜合征的概述
鑒別診斷 臨床需要與其他類型肌強直鑒別 (1)先天性肌強直(congenital myotonia):Thomsen(1876)描述了他本人及其家族的四代患者,又稱為Thomsen病。通常為常染色體顯性遺傳病,與7q35染色體突變有關。通常自出生就存在全身性肌強直,不伴肌無力和肌萎縮,但至兒
富爾根氏核染色液的配制方法
富爾根氏核染色液 1.席夫氏(Schiff)試劑 將1g堿性復紅加入200ml煮沸的蒸餾水中,振蕩5分鐘,冷至50℃左右過濾,再加入1mol/LHC120ml,搖勻。待冷至25℃時,加Na2S2O5(偏重亞硫酸鈉)3g,搖勻后裝在棕色瓶中,用黑紙包好,放置暗處過夜,此時試劑應為淡黃色(如為粉紅色
察氏培養基的配制操作方法
察氏培養基的配制操作方法1.牛流行性腹瀉病毒PCR-熒光探針試劑盒培養基成分蔗糖 3gNaN03 0.3gK2HP04 0.1gKCl 0.05gMgSO4·7H2O 0.05 gFeS04 0.001 g瓊脂 1.5-2g蒸餾水
弗布利氏綜合征的輔助檢查
腎活檢病理檢查 光鏡檢查 光鏡下腎小球臟層上皮細胞(有時還有壁層上皮細胞、內皮細胞及腎小管上皮細胞)增大,含無數空泡,空泡中充滿脂質,偏光鏡下見雙折光脂質體,形似馬耳他十字架;腎小球壁局灶性增厚,腎小球周圍及間質纖維化。 弗布利氏綜合征腎小球變化最顯著,石蠟切片顯示腎小球臟層上皮細胞擴大,
弗布利氏綜合征的鑒別診斷
遺傳性出血性毛細血管擴張癥 遺傳性出血性毛細血管擴張癥與本病不同之處是皮損略大,數量多,外形極不規則,不波及下半身,也無發作性疼痛和發熱。 Fordyce血管角質瘤 Fordyce血管角質瘤見于30歲以上的男性,皮損局限于陰囊。 巖藻糖苷貯積癥 巖藻糖苷貯積癥雖然出現血管角質瘤,但起病
弗布利氏綜合征的發病機制
1967年Brady等闡明了弗布利氏綜合征的生物化學缺陷。他們認為溶酶體酶酰基鞘氨醇己三糖苷酶活性缺陷導致了神經氨醇分解代謝減低,從而導致細胞內神經氨醇半乳糖苷酰基鞘氨醇的沉積。上述細胞內沉積物a末端連接一個半乳糖苷殘基。由于人們對這一特異酶缺陷的認識,現在可以準確地診斷半合子的男性,并可以辨認
小鼠免疫實驗_ 制備免疫脾細胞:用可溶性抗原致敏
實驗材料任意品系小鼠(6~8 周)試劑、試劑盒PBS完全和不完全弗氏佐劑抗原儀器、耗材22-G 注射針頭帶塞的 3 ml 注射器雙頭帶塞的連接器無菌剪刀剃須刀片解剖刀片木制涂棒實驗步驟1. 準備等體積 PBS 含 25~100 μg 抗原和弗氏完全佐劑的乳化液(200~400 μl/鼠)。用雙頭帶塞
多抗制備動物免疫
制備好抗原后,就要進行動物免疫了,免疫這一步除了動物自身的因素外,實驗者也要有良好的計劃才能得到更好的免疫效果。這里就幾個常見的問題作一下簡單的討論。?動物的選擇。常見的可以用來制備抗體的動物有:小鼠(Mouse)、大鼠(Rat)、豚鼠(Guinea pig)、倉鼠(Hamster)、兔(Rab
免疫球蛋白IgG的提取-1
一、目的及要求了解和掌握免疫球蛋白的提取方法。 二、概 念 抗體是在抗原物質刺激下,人或脊椎動物免疫系統的漿細胞產生的,能與抗原發生特異性反應的免疫球蛋白,主要存在于人和動物的血清及其體液中。 三、免疫血清的制備 (一)動物的選擇 實驗室常用的動物是家兔和羊,有時也用豚鼠或雞,大
免疫佐劑的主要分類
1.生物性佐劑是細菌或其產物,其本身具有免疫原性,如分枝桿菌(結核桿菌、卡介苗)、短小棒狀桿菌、百日咳桿菌、革蘭陰性桿菌內毒素等。此外發現粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子、白細胞介素-l、白細胞介素-2、干擾素-γ等的佐劑活性。2.無機佐劑如氫氧化鋁、明礬、磷酸鋁等。3.人工合成佐劑雙鏈多聚肌苷酸、胞苷
單克隆抗體制備
1. 免疫動物:三只Balb/c小鼠?2. 佐劑:首先用完全弗氏佐劑(CFA),后用不完全弗氏佐劑(IFA)。?3. 免疫原:蛋白或KLH偶聯多肽。每次免疫使用50-100μg免疫原。?4. 免疫:用PBS稀釋免疫原,然后與相應的佐劑1:1混合。抗原和佐劑完全混合形成穩定的乳劑,將該乳劑在小鼠雙