青蒿素的提取純化方法
分離純化工藝主要有溶劑外加能量協助提取法、提取重結晶法、超臨界CO2萃取法和溶劑提取層析法。溶劑提取重結晶法一般采用的溶劑汽油法，乙醇法和堿水提取酸沉淀法進行生產，此類方法明顯增加了青蒿素植物的有效利用率。堿水提取酸沉淀法：取一定量的青蒿枝葉干粉加入乙醇攪拌浸提，得到乙醇提取液，減壓干燥，將其溶于乙醚-水兩相溶液中，分別得到青蒿素和青蒿酸。此種方法的青蒿酸收率達到90%，青蒿素的提取率為57%。乙醇法：取一定量的青蒿枝葉干粉，用稀乙醇浸泡24h，得到乙醇提取液，將其注入連續萃取裝置，再用含苯和乙酸乙酯的溶劑汽油萃取，得到醇相和萃取相，醇相可循環使用，萃取相用活性炭脫色，過濾，回收溶劑，然后得到濃溶液，再冷卻結晶得到青蒿素粗晶物，再用乙醇重結晶得到青蒿素成品。此方法有收率較高，成本較低，步驟較少，操作簡單，安全等優點。溶劑汽油法：取一定量的青蒿枝葉干粉，用8～10倍120號溶劑汽油浸泡3次，得到溶劑汽油提取液，再減壓濃縮并放置結晶......閱讀全文
酶的提取和分離純化介紹
許多酶都存在于細胞內。為了提取這些胞內酶，首先需要對細胞進行破碎處理。細胞破碎的方法很多，主要包括機械破碎法、物理破碎法、化學破碎法和酶學破碎法等。機械破碎法是指利用搗碎機、研磨器或勻漿器等將細胞破碎開來。物理破碎法是指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細胞破碎開來。化學破碎法是指利用甲醛、丙酮等有機溶
RNA提取純化的注意事項
由于RNA酶的廣泛存在與難以滅活的頑固特性。使得RNA的提取純化和后續工作變得非常困難。關于 RNA and RNases，你應該了解些什么？RNases 是非常穩定和活躍的一種酶，一般不需要輔助因子的功能，因而在實驗室內 RNA 很容易被降解如果不預先消除可能的 RNase 污染，請不要使用任何塑
信使RNA的mRNA提取分離純化
真核細胞的mRNA分子最顯著的結構特征是具有5’端帽子結構（m7G）和3’端的Poly(A）尾巴。絕大多數哺乳類動物細胞mRNA的3’端存在20-30個腺苷酸組成的Poly（A）尾，通常用Poly（A+）表示。這種結構為真核mRNA的提取 ，提供了極為方便的選擇性標志，寡聚（dT）纖維素或寡聚（U）
鐵蛋白的提取及純化
鐵蛋白以肝、脾含量較高，其中馬脾臟含量最高，標記用的鐵蛋白主要是從馬脾臟中提取。馬脾臟來源不便，可用市售鐵蛋白相對分子質量45000。棕紅色結晶。商品為4次結晶品，懸浮于飽和硫酸銨溶液中。一種結合鐵離子輔基的蛋白質，它以脫鐵蛋白為外殼，環繞著4個分開的羥化鐵-磷酸鹽，形成電子致密的結合型蛋白質。在制
凝乳酶（curdling－enzyme）的提取純化
一、實驗目的通過發酵液中凝乳酶的提取純化，了解酶提取純化的方法，學習凝膠層析法的工作原理和基本操作技術。二、實驗原理凝乳酶是一種酸性蛋白酶，其主要的生物學功能是有限剪切Phe105- Met106連接的κ-酪蛋白，導致牛奶凝結，從而被廣泛應用干酪生產中。有機溶劑對于許多蛋白質（酶）、核酸、多糖和小分
DNA提取純化新技術淺談——核酸電泳純化技術
核酸的提取和純化是法醫DNA物證檢驗的關鍵技術之一，目前實驗室最常用的方法包括核酸純化柱（Spin column）磁珠法和clean-up系統，磁珠法由于操作簡便、快速，能夠提取到高純度的核酸DNA,并且可以自動化，因此成為目前法醫DNA實驗室核酸提取純化的主要手段。但磁珠法由于磁珠吸附DN
動物組織RNA提取及純化
實驗概要提取樣品組織中的RNA并消除DNA污染實驗原理Trizol裂解細胞使RNA釋放beta巰基乙醇一直RNase活性酚-氯仿抽提分離RNARNase-Free DNase消除DNA污染主要試劑Trizol無水乙醇氯仿（三氯甲烷）異丙醇RQ1 RNase-Free DNase（Promega，M6
蛋白提取純化注意事項
1、操作盡可能置于冰上或者在冷庫內進行。 2、不要太稀，蛋白濃度維持在μg/mL～mg/mL。 3、合適的pH，除非是進行聚焦層析，所使用的緩沖溶液pH避免與pI相同，防止蛋白質的沉淀。 4、使用蛋白酶抑制劑，防止蛋白酶對目標蛋白的降解；在純化細胞中的蛋白質時，加入DNA酶，降解DNA，防
蛋白質提取和純化
蛋白質提取和純化（主要內容如下）Protein Extraction?Protein PurificationProtein PrecipitationColumn PreparatioinQ & A Posted in the Method ForumProtein ExtractionWhole
核酸提取純化原則和要求
1、保證核酸一級結構的完整性 2、排除其它分子的污染（如提取DNA時排除RNA的干擾） 3、核酸樣品中不應存在對酶有抑制作用的有機溶劑和高濃度的金屬離子 4、盡可能降低蛋白質、多糖和脂類等大分子物質
青蒿素檢測方法
青蒿素是從中藥黃花蒿中分離的具有抗惡性瘧疾激勵的一種化合物，呈無色針狀結晶。黃花蒿（Artemisia annua Linn）為中國傳統中草藥。其有效成分—青蒿素具有良好的抗瘧效果。目前青蒿素用于瘧疾防治的價值已被人類認識和接受，世界衛生組織已把青蒿素的復方制劑列為國際上防治瘧疾的首選藥物。
青蒿素的制備方法介紹
化學合成以 R －（+）－ 香茅醛為原料合成青蒿素過程?1983年，化學家HofheinzW等通過化學研究發現了青蒿素的化學合成方法，以（－）－2－異薄勒醇為原料，利用光氧化反應引進氧基得到中間體，再經過環合反應合成了最終產物。合成倍半萜內酯，主要有兩個限速步驟：倍半萜母核的折疊和環化；含過氧橋的倍
β葡萄糖苷酶的提取、純化及酶活測定方法
β-葡萄糖苷酶的提取方法不同來源的β-葡萄糖苷酶，其提取方法也有所不同。動植物體及大型真菌中的糖苷酶一般需要對酶源進行組織搗碎，然后用緩沖液浸提。常用的緩沖液有磷酸鹽緩沖液、醋酸鹽緩沖液、檸檬酸鹽緩沖液等。pH值一般選用酶的穩定pH值；提取溫度適于低溫，一般為4 ℃。利用微生物發酵法生產β-葡萄糖苷
質粒DNA的大量提取和純化實驗
堿法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細菌 試劑、試劑盒 ST
質粒DNA的大量提取和純化實驗
實驗材料 細菌試劑、試劑盒 STE酚 氯仿NaClPEG乙醇儀器、耗材 離心管離心機抽干機實驗步驟 1、取培養至對數生長后期的含pBS質粒的細菌培養液250 ml，4 ℃下5000 g離心15分鐘,棄上清,將離心管倒置使上清液全部流盡。2、將細菌沉淀重新懸浮于50 ml用冰預冷的STE中（此步可省略
細菌蛋白提取與純化的實驗手冊
不同的蛋白質分離純化的方法不同，但蛋白質分離純化的操作步驟基本類似，那么如何進行細菌蛋白的提取呢？這里總結細菌蛋白的提取的實驗試劑、操作步驟以及一些注意事項。實驗試劑采用T7? Tag Affinity Purification KitT7?Tag抗體瓊脂。B/W緩沖液：4.29mM Na2HPO4
質粒DNA的提取與純化——堿解法
質粒DNA提取可以：（1）快速純化質粒；（2）用于測序、體外轉錄與翻譯、限制性內切酶消化、細菌轉化等分子生物學實驗。一、實驗目的與原理質粒多為一些雙鏈、環狀的DNA分子，是獨立于細菌染色體之外進行復制和遺傳的輔助性遺傳單位。質粒是進行分子生物學實驗操作，進行遺傳工程改良物種等工作時最主要的DNA載體
植物總RNA的快速提取與純化
一、原理RNA包括rRNA、tRNA和mRNA等，大部分通常是以核蛋白復合物的形式存在的。通過SDS、苯酚處理使蛋白質變性并沉淀。利用LiCl溶解雙鏈DNA的特性去除DNA，經乙醇沉淀得到總RNA。純度高、完整性好的RNA，即可用于Northern雜交、純化mRNA、cDNA合成和體外翻譯等進一步的
Trizol法提取總RNA的純化要求
1.純化后不應存在對酶（如逆轉錄酶）有抑制作用的物質。2.排除有機溶劑和金屬離子的污染。3.蛋白質、多糖和脂類分子等的污染降到最低程度。4.排除DNA分子的污染。
關于魚精蛋白的提取和純化介紹
1、魚精蛋白的提取： 成熟精巢組織——均漿——硫酸酸解——NACL溶液提取——四層紗布過濾——加乙醇沉淀雜蛋白——離心——上清液——加TCA溶液沉淀——離心——魚精蛋白硫酸鹽 [1] 2、魚精蛋白的純化： 分離提取后的魚精蛋白必須純化。利用魚精蛋白的電荷和分子大小，分別采用聚丙烯酰胺等電聚
酶的提取、分離、純化及其活力測定
一、實驗目的酶是植物體內具有催化作用的蛋白質，植物體內的生化反應，一般都是在酶的作用下進行的，沒有酶的催化反應，植物的生命也就停止了，因此對酶的研究是闡明生命現象本質中十分重要的部分。為要研究酶首先要將酶從組織中提取出來，加以分離、純化，不同的研究目的對酶制劑的純度要求也不相同，有些工作只需要粗的酶
酶的提取、分離、純化及其活性測定
? 原理 ? 酶是植物體內具有催化作用的蛋白質，植物體內的生化反應，一般都是在酶的作用下進行的，沒有酶的催化反應，植物的生命也就停止了，因此對酶的研究是闡明生命現象本質中十分重要的部分。 為要研究酶首先要將酶從組織中提取出來，加以分離、純化，不同的研究目的對酶制劑的純度要求也
核酸：理化性質、純化原則要求、提取方法介紹
核酸是分子生物學的基礎，而核酸提取是整個分子行業繞不過去的門檻，很多時候一份樣本的核酸提取的好壞直接決定了檢測結果的有效性。核酸分為脫氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA），其中RNA又可以根據功能的不同分為核糖體RNA(rRNA)，信使RNA（mRNA）和轉移RNA（tRNA）。DNA主要集中在
概述青蒿素的檢測方法
化學分析法中的碘量法是利用氧化還原性質對青蒿素進行定量分析的經典方法。而改進的橋式有機過氧物碘量法以2.5mol·L-1硫酸-無水乙醇為酸性介質，減少碘的自身氧化，提高了此法的準確性。但該法操作相對繁雜，目前已少用。生物化學法以其專一性強、靈敏度高的優點受到關注，而使用特異性強的酶聯免疫法（EL
藥學專家解讀屠呦呦獲得諾貝爾獎引發的爭議
近日，屠呦呦獲得諾貝爾獎的消息再次引發關于中藥與西藥的口水戰： 有人認為此獎意味著中藥終于得到了國際社會認可，揚眉吐氣，不再因藥理機制不明確、作用成分不明等原因受人詬病；也有人指出，青蒿素的發現是借助了嚴格的現代化制藥手段，現代醫學才是最大功臣，中藥的“不科學性”依舊存在。 當然也有人指出
藥學專家解讀屠呦呦獲得諾貝爾獎引發的爭議
近日，屠呦呦獲得諾貝爾獎的消息再次引發關于中藥與西藥的口水戰： 有人認為此獎意味著中藥終于得到了國際社會認可，揚眉吐氣，不再因藥理機制不明確、作用成分不明等原因受人詬病；也有人指出，青蒿素的發現是借助了嚴格的現代化制藥手段，現代醫學才是最大功臣，中藥的“不科學性”依舊存在。 當然也有人指出
蛋白質提取與純化技術
?選擇材料及預處理 以蛋白質和結構與功能為基礎，從分子水平上認識生命現象，已經成為現代生物學發展的主要方向，研究蛋白質，首先要得到高度純化并具有生物活性的目的物質。蛋白質的制備工作涉及物理、化學和生物等各方面知識，但基本原理不外乎兩方面。一是得用混合物中幾個組分分配率的差別，把它們分配到可用機械方
蛋白質提取與純化技術
實驗概要大腸桿菌表達蛋白以可溶和不溶兩種形式存在，需要不同的純化策略。現在，許多蛋白質正在被發現而事先并不知道它們的功能，這些自然需要將蛋白質分離出來后，進行進一步的研究來獲得。分析蛋白質的方法學現已極大的簡化和改進。必須承認，蛋白質純化比起DNA克隆和操作來是更具有藝術性的，盡管DNA序列具有異乎
辛酸提取法純化多克隆抗體
該法可用于分離提取人、兔、小鼠血清中的Ig及雜交瘤誘生的腹水和培養上清液中McAb。 【材料和試劑】? （1）正辛酸。? （2）60mmol/L，pH4.0醋酸緩沖液，PBS。? （3）透析袋。? （4）高速低溫離心機。? 【操作步驟】 （1）將待提取樣品用60mmol/L，pH4.0
蛋白質提取與純化技術
以蛋白質和結構與功能為基礎，從分子水平上認識生命現象，已經成為現代生物學發展的主要方向，研究蛋白質，首先要得到高度純化并具有生物活性的目的物質。蛋白質的制備工作涉及物理、化學和生物等各方面知識，但基本原理不外乎兩方面。一是得用混合物中幾個組分分配率的差別，把它們分配到可用機械方法分離的兩個或幾個