DEAE纖維素柱的原理
DEAE-纖維素為二乙氨乙基纖維素,是陰離子交換劑.其原理基于離子交換層析：離子交換層析中,基質是由帶有電荷的樹脂或纖維素組成.由于蛋白質也有等電點,當蛋白質處于不同的pH條件下,其帶電狀況也不同.陰離子交換基質結.........閱讀全文
免疫球蛋白提取技術（二）
（12）IgG的純度鑒定，可采用下列方法之一鑒定。①玻片瓊脂或醋酸纖維膜電泳均可加樣電泳后，只在γ—球蛋白的遷移部位出現一條帶。操作時，同時可用全血清樣品，不同濃度（NH4）2SO4鹽析樣品進行電泳，以資比較。②瓊脂雙相雙擴散鑒定預先準備該IgG免疫異種動物所獲的抗IgG血清。將IgG與抗IgG血清
免疫球蛋白提取技術：IgG的分離與提純2
⑴ 區帶電泳：玻片瓊脂或醋酸纖維膜電泳均可。加樣電泳后，只在γ—球蛋白的遷移部位出現一條帶。操作時，同時可用全血清樣品，不同濃度 (NH4)2SO4鹽析樣品進行電泳，以資比較。⑵ 瓊脂雙相雙擴散鑒定：預先準備該IgG免疫異種動物所獲的抗IgG血清。將IgG與抗 IgG血清進行雙相雙擴散，如IgG提純
多克隆抗體提取實驗——批量提取法
由多種抗原決定簇刺激機體，相應地就產生各種各樣的單克隆抗體，這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體。主要用于（1）批量提取多個抗體（2）為進一步驗證抗體的作用進行基礎操作。實驗方法原理由多種抗原決定簇刺激機體，相應地就產生各種各樣的單克隆抗體，這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體，機體內所產生的抗
層析技術(Layeranalise－technique)(1)
離子交換層析技術是以離子交換纖維素或以離子交換葡聚糖凝膠為固定相，以蛋白質等樣品為移動相，分離和提純蛋白質、核酸、酶、激素和多糖等的一項技術。 （一）原理 在纖維素與葡聚糖分子上結合有一定的離子基團，當結合陽離子基團時，可換出陰離子，則稱為陰離子交換劑。如二乙氨乙基（Dicthy
離子交換色譜儀多糖基離子交換劑
離子交換色譜儀多糖基離子交換劑有纖維素離子交換劑、葡聚糖離子交換劑和瓊脂糖離子交換劑等。一、纖維素離子交換劑：又稱離子交換纖維素，是以微晶纖維素為基質，引入電荷基團而制成。?微晶纖維素（纖維素膠或結晶纖維素）是將纖維性植物材料與無機酸搗成漿狀，經處理使之降解后漂洗、研磨、脫水、烘干和粉碎制成的。微
離子交換色譜儀親水性離子交換介質
離子交換色譜儀親水性離子交換介質（多糖基離子交換劑）與水親和力較大，有纖維素離子交換劑、葡聚糖離子交換劑和瓊脂糖離子交換劑等。一、纖維素離子交換劑：又稱離子交換纖維素，是以微晶纖維素為基質，引入電荷基團而制成。微晶纖維素（纖維素膠或結晶纖維素）是將纖維性植物材料與無機酸搗成漿狀，經處理使之降解后漂
高效離子交換色譜儀親水性離子交換介質
?? 高效離子交換色譜儀親水性離子交換介質（多糖基離子交換劑）與水親和力較大，有纖維素離子交換劑、葡聚糖離子交換劑和瓊脂糖離子交換劑等。一、纖維素離子交換劑：??????? 又稱離子交換纖維素，是以微晶纖維素為基質，引入電荷基團而制成。??????? 微晶纖維素（纖維素膠或結晶纖維素）是將纖維性植物
離子交換色譜儀離子交換劑（三）
第二節 親水性離子交換劑?親水性離子交換劑（多糖基離子交換劑）與水親和力較大，有纖維素離子交換劑、葡聚糖離子交換劑和瓊脂糖離子交換劑等。一、纖維素離子交換劑：又稱離子交換纖維素，是以微晶纖維素為基質，引入電荷基團而制成。微晶纖維素（纖維素膠或結晶纖維素）是將纖維性植物材料與無機酸搗成漿狀，經處理使之
苯酚法制備酵母tRNA
通過 DEAE 纖維素柱純化，除去少量 DNA、大分子 RNA、蛋白質、多糖等雜質，最后得到各種氨基酸專一性 tRNA 的混合物.試劑、試劑盒DEAE 纖維素二乙醇胺 (TEA) 溶液0.lmol LTEA 緩沖液0.lmol L 氯化鈉含 0.lmoi. LTEA 緩沖液12mol L 氯化鈉含
DEAE葡聚糖轉染試劑的功能特點
DEAE-葡聚糖是最早應用哺乳動物細胞轉染試劑之一，DEAE-葡聚糖是陽離子多聚物，它與帶負電的核酸結合后接近細胞膜而被攝取，用DEAE-葡聚糖轉染成功地應用于瞬時表達的研究，但用于穩定轉染卻不是十分可靠。
化學轉染法DEAE葡聚糖法應用
DEAE-葡聚糖是最早應用哺乳動物細胞轉染試劑之一，DEAE-葡聚糖是陽離子多聚物，它與帶負電的核酸結合后接近細胞膜而被攝取，用DEAE-葡聚糖轉染成功地應用于瞬時表達的研究，但用于穩定轉染卻不是十分可靠。
DEAE葡聚糖凝膠的概念和用途
中文名稱DEAE-葡聚糖凝膠英文名稱diethylaminoethyl dextran gel;DEAE-dextran gel定 義親水性交聯葡聚糖離子交換劑。是以交聯葡聚糖G25或G50為基質，通過化學方法引入電荷基團二乙氨乙基，制成外形呈珠狀的弱堿型陰離子交換劑，此類交換劑對核酸和蛋白質有較
纖維素酶能否酶解纖維素
成熟棉纖維的主要成分是纖維素，纖維素是天然高分子化合物，由葡萄糖分子按β-1，4糖苷鍵連接而成。棉纖維中大分子的排列比較復雜，纖維內某些區域由于大分子的橫向吸引使大分子排列比較整齊密實，縫隙孔洞較少，這稱為結晶區。相反，另一些區域大分子排列比較紊亂，堆砌比較疏松，其中有較多的縫隙孔洞，密度較低，這稱
免疫球蛋白提取實驗注意事項及原因
IgG的分離與提純（一）材料與試劑配制1．動物血清2．硫酸銨飽和溶液硫酸銨 800g~850gH2O 1 000ml加熱至絕大部分溶質溶解為止，趁熱過濾，置室溫過夜，然后以28％NH4OH調pH至7.0（不調pH值也可以）。注：硫酸銨以質量優者為佳，因次品中含有少量重金屬對蛋白質巰基有影響。如次品必
血清γ球蛋白的分離純化與鑒定（凝膠層析法）2
（5）20%磺基水楊酸溶液（6）奈氏(Nessler)試劑應用液貯存液；稱取碘化鉀(KI)7.58g于250ml三角燒瓶中，用蒸餾水5ml溶解，再加入碘（I2） 5.5g溶解，加7～7.5gHg用力振搖10min(此時產生高熱，須冷卻)，直至棕紅色的碘轉變成帶綠色的碘化汞鉀液為止，過濾上清液傾入
Western－Blot詳解(原理、試劑、步驟及問題解答)4
HH. 跑電泳的時候配的膠總是“縮”是什么原因呢？是有的成分不對嗎？ 解答：沒什么問題，就是你膠里的水分被蒸發了。過夜時拿保鮮膜包起來，在里面加點水保持濕度就可以了。如果過夜，膠里的水分被蒸發，采用保鮮膜包上也可以；也可能母液（30%聚丙酰胺）有問題，你可以重新配制一份觀察；能夠替換的試劑，盡量
免疫球蛋白提取技術
免疫球蛋白提取技術可應用于：（1）推知機體的體液免疫功能；（2）診斷某些疾病引起的Ig的過高和過低。實驗方法原理隨著免疫學的發展和需要，免疫球蛋白的純化和其成分的提純成為必不可少的手段。純化的方法很多，有單一法，但大多數采用二步法以上相結合的方法，特別是以硫酸銨提純為基礎，再經過層析柱的方法來提高免
免疫球蛋白提取技術（一）
免疫球蛋白（Immunoglobulin Ig）的含量代表著機體體液免疫的水平，并進一步代表著B細胞的功能，因此測定血清Ig含量可以推知機體的體液免疫功能和診斷某些疾病引起的Ig的過高和過低。隨著免疫學的發展和需要，免疫球蛋白的純化和其成分的提純成為必不可少的手段。純化的方法很多，有單一法，但大多數
離子交換層析的概述
離子交換層析(ion-exchange chromatography,IEC) 是在生物大分子提純中得到最廣泛應用的方法之一。 離子交換層析分離蛋白質是根據在一定pH 條件下，蛋白質所帶電荷不同而進行的分離方法。常用于蛋白質分離的離子交換劑有弱酸型的羧甲基纖維素(CM纖維素) 和弱堿型的二乙基
關于離子交換層析的基本信息介紹
離子交換層析(ion-exchange chromatography,IEC) 是在生物大分子提純中得到最廣泛應用的方法之一。 離子交換層析分離蛋白質是根據在一定pH 條件下，蛋白質所帶電荷不同而進行的分離方法。常用于蛋白質分離的離子交換劑有弱酸型的羧甲基纖維素(CM纖維素) 和弱堿型的二乙基
離子交換層析的原理和應用
離子交換層析(ion-exchange chromatography,IEC) 是在生物大分子提純中得到最廣泛應用的方法之一。離子交換層析分離蛋白質是根據在一定pH 條件下，蛋白質所帶電荷不同而進行的分離方法。常用于蛋白質分離的離子交換劑有弱酸型的羧甲基纖維素(CM纖維素) 和弱堿型的二乙基氨基乙基
離子交換層析的基本定義和原理
離子交換層析(ion-exchange chromatography,IEC) 是在生物大分子提純中得到最廣泛應用的方法之一。離子交換層析分離蛋白質是根據在一定pH 條件下，蛋白質所帶電荷不同而進行的分離方法。常用于蛋白質分離的離子交換劑有弱酸型的羧甲基纖維素(CM纖維素) 和弱堿型的二乙基氨基乙基
離子交換層析的應用介紹
離子交換層析(ion-exchange chromatography,IEC) 是在生物大分子提純中得到最廣泛應用的方法之一。離子交換層析分離蛋白質是根據在一定pH 條件下，蛋白質所帶電荷不同而進行的分離方法。常用于蛋白質分離的離子交換劑有弱酸型的羧甲基纖維素(CM纖維素) 和弱堿型的二乙基氨基乙基
離子交換層析的概念
離子交換層析(ion-exchange chromatography,IEC) 是在生物大分子提純中得到最廣泛應用的方法之一。離子交換層析分離蛋白質是根據在一定pH 條件下，蛋白質所帶電荷不同而進行的分離方法。常用于蛋白質分離的離子交換劑有弱酸型的羧甲基纖維素(CM纖維素) 和弱堿型的二乙基氨基乙基
苯酚法制備酵母tRNA
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 DEAE 纖維素 ? 二乙醇胺 (TEA) 溶液 0.lmol LTEA 緩沖液 ?0.lmol L 氯化鈉含 0.lmoi. LTEA 緩沖液
苯酚法制備酵母tRNA
試劑、試劑盒 DEAE 纖維素 二乙醇胺 (TEA) 溶液 0.lmol LTEA 緩沖液 0.lmol L 氯化鈉含 0.lmoi. LTEA 緩沖液 12mol L 氯化鈉含 0.lmol LTEA 緩沖液 lmol L 氯化鈉含 0.lmol LTEA 緩沖液 乙醚 水飽和酚 乙醇儀器
真核細胞利用DEAE葡聚糖的轉染實驗
用小鼠L型成纖維細胞來進行條件優比的，但只需稍做修改即可適用于幾乎任何細胞。根據所研究的細胞類型進行方法優化十分關鍵。實驗材料DNA試劑、試劑盒TBSDMEM葡聚糖DMSOPBS儀器、耗材培養箱離心管實驗步驟1. ?接種約5×105小鼠L型成纖維細胞/10 cm培養皿，培養3天至30%~50%匯片。
真核細胞利用DEAE葡聚糖的轉染實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 DNA 試劑、試劑盒
DEAE葡聚糖凝膠的主要用途
中文名稱DEAE-葡聚糖凝膠英文名稱diethylaminoethyl dextran gel;DEAE-dextran gel定 義親水性交聯葡聚糖離子交換劑。是以交聯葡聚糖G25或G50為基質，通過化學方法引入電荷基團二乙氨乙基，制成外形呈珠狀的弱堿型陰離子交換劑，此類交換劑對核酸和蛋白質有較
抗體純化：deaesephadex－a50－柱層析法
一、原理?deae-sephadex a-50（二乙氨基—乙基-葡萄糖凝膠a-50）為弱堿性陽離子交換劑。用NaOH將Cl-型轉變為OH-型后，可吸附酸性蛋白。血清中的γ球蛋白屬于中性蛋白（等電點為pH6.85～7.5），其余均屬酸性蛋白。pH7.2～7.4的環境中，酸性蛋白均被deae-