引物中淬滅基因的工作原理
熒光探針與熒光引物要提到熒光探針或者熒光引物，有一個基礎概念需要首先明確，那就是熒光共振能量轉移(fluorescenceresonance energy transfer, FRET)：一對合適的熒光物質可以構成一個能量供體(donor) 和能量受體 (acceptor) 對, 其中供體的發射光譜與受體的吸收光譜重疊，當它們在空間上相互接近到一定距離(1—10 nm)時，激發供體而產生的熒光能量正好被附近的受體吸收，使得供體發射的熒光強度衰減，受體熒光分子的熒光強度增強。能量傳遞的效率和供體的發射光譜與受體的吸收光譜的重疊程度、供體與受體的躍遷偶極的相對取向、供體與受體之間的距離等有關。一：水解探針法TaqMan技術原理：除了一對特異性引物，TaqMan探針法增加一條和模版互補的基因特異性探針（通常20—30bp），探針上5'端和3'端分別標記了一個報告熒光基團（供體）和一個淬滅熒光基團（受體），在反應初始（探......閱讀全文
淬冷膨脹測試軟件介紹
一、前期準備： 測試主機臺、隨機配套測試軟件套、測試儀器臺 二、測試軟件的安裝： 1、將裝有測試軟件的安裝光盤放入光驅中，打開光盤并雙擊運行.EXE程序文件。 2、在出現在安裝窗口中，按照軟件提示操作，依次完成軟件的完裝。 3、軟件安裝完成后，軟件會自動在桌面創建其對應的快捷方式，同時用
實時定量PCR探針概述
實時定量PCR?(qPCR)的優勢?實時檢測PCR反應過程?精確計算出每個循環的PCR產物量?擴增和檢測同時進行?消除后續PCR的干擾在實時定量PCR反應中，雜交探針與插入染料如SYBR Green相比是更好的選擇。熒光標記探針可以提高實時定量PCR結果的效率、靈敏度和特異性。而且定量PCR可以在一
realtime－PCR－常用儀器和探針
?1.SYBR Green I：一種DNA結合染料，能非特異性地與雙鏈DNA結合，結合后發出熒光，價格便宜，但因無特異性，易受到非特異性擴增和引物二聚體地的影響，是定量結果不可靠。可用融解曲線分析區分特異性和非特異性擴增，引物的設計和反應條件的優化對消除非特異性熒光有很大幫助。2.Taqman探針：
realtime－PCR－常用儀器和探針
SYBR Green I：一種DNA結合染料，能非特異性地與雙鏈DNA結合，結合后發出熒光，價格便宜，但因無特異性，易受到非特異性擴增和引物二聚體地的影響，是定量結果不可靠。可用融解曲線分析區分特異性和非特異性擴增，引物的設計和反應條件的優化對消除非特異性熒光有很大幫助。 2.Taqman探針：
Real－Time－PCR—Cycleave－PCR法原理
■ CycleavePCR法原理 CycleavePCR法是由RNA和DNA構成的雜合Cycling 探針與RNase H組合使用的高靈敏度檢測方法，能夠高效率地檢出目的基因。Cycling 探針內部夾有RNA部分，5′端標記熒光物質，3′端標記淬滅物質，當探針處于完整狀態時，由于熒光淬滅作
熒光定量PCR實驗時，熒光基團如何選擇？
?原則一? ? 每個反應只檢測一個基因的，方法就比較簡單，對5’端熒光基團的選擇以及3’端淬滅基團的選擇余地都是比較大的。比如5’-FAM? +? 3’-BHQ，就是比較常見的方案。? ? 下表為常用熒光染料（基團）的顏色及波長參數，供參考。? ??? ? 原則二? ? 如果在每個反應中要檢測的目的
結核桿菌PCR鑒定
?? 從痰等臨床標本直接診斷結核分枝桿菌和非結核分枝桿菌也稱直接擴增試驗（Direct Amplification Test，DAT），主要是利用PCR技術特異性地擴增核酸片斷達到鑒定結核分枝桿菌的目的。RocheLight Cycler 熒光定量PCR儀，從標本處理、核酸擴增到產物鑒定
淬冷膨脹儀調整與校正
調整與校正1、膨脹值數字顯示方式的調整與校正①零點：膨脹值采用智能數字式儀表進行顯示，應將AI501顯示儀表按其說明調整好所需參數和量程。開啟儀表電源，并接好各線，所顯示不在“0”位，可通過調零旋鈕使其回到零點。②量程校正：2、升溫過程參數調整：出廠時已對升溫過程各參數進行調整，并已鎖定。用戶若要改
淬冷膨脹儀使用與操作
儀器出廠時，各部分已作好調整。使用時只需要按下列程序操作：1、將基座安放水平，調整電阻爐的位置，使爐膛與試樣管相對運動自如，要防止它們相互發生擦、碰現象。調整、移動電阻爐時定要緩慢，以防損壞爐膛和試樣管。調好后將止動螺釘緊固好，將電阻爐固定在小車上。再調整定位腳在導軌上的位置，使小車靠住定位腳時，電
熒光定量PCR檢查的分類
熒光定量PCR所使用的熒光化學可分為兩種：熒光探針和熒光染料。現將其原理簡述如下： 1）TaqMan熒光探針：PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴
實時熒光定量－PCR技術原理與應用
聚合酶鏈式反應 ( PCR) 可對特定核苷酸片斷進行指數級的擴增 。在擴增反應結束之后，我們可以通過凝膠電泳的方法對擴增產物進行定性的分析，也可以通過 放射性核素摻入標記后的光密度掃描來進行定量的分析 。無論定性還是定量分析，分析的都是 PCR 終產物。但是在許多情況下，我們所感興趣的是未經 PCR
實時熒光定量－PCR技術原理與應用
聚合酶鏈式反應 ( PCR) 可對特定核苷酸片斷進行指數級的擴增 。在擴增反應結束之后，我們可以通過凝膠電泳的方法對擴增產物進行定性的分析，也可以通過 放射性核素摻入標記后的光密度掃描來進行定量的分析 。無論定性還是定量分析，分析的都是 PCR 終產物。但是在許多情況下，我們所感興趣的是未經
什么是實時熒光定量PCR，檢測指標是什么
實時熒光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR，RTFQ PCR) 是1996 年由美國Applied Biosystems 公司推出的一種新定量試驗技術，它是通過熒光染料或熒光標記的特異性的探針，對PCR產物進行標記跟蹤，實時在線監控反應過程，結
什么是實時熒光定量PCR
實時熒光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR，RTFQ PCR) 是1996 年由美國Applied Biosystems 公司推出的一種新定量試驗技術，它是通過熒光染料或熒光標記的特異性的探針，對PCR產物進行標記跟蹤，實時在線監控反應過程，結
猝滅效應
熒光的猝滅(熄滅)一詞，從廣義上說，指的是任何可使某給定熒光物質的熒光強度降低的作用，或者任何可使熒光強度不與熒光物質的濃度呈線性關系的作用。從狹義上說，指的是熒光物質分子與溶劑分子或其它溶質分子之間的相互作用，導致熒光強度降低的現象。
實時熒光定量PCR儀原理和使用方法
熒光定量PCR儀原理 將標記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后，完成高溫變性，低溫復性，適溫延伸的熱循環，并遵守聚合酶鏈反應規律，與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷，熒光素游離于反應體系中，在特定光激發下發出熒光，隨著循環次數的增加，被擴增的目的基因片段呈指數規律增長，
熒光定量PCR儀原理
?熒光定量PCR儀技術原理將標記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后，完成高溫變性，低溫復性，適溫延伸的熱循環，并遵守聚合酶鏈反應規律，與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷，熒光素游離于反應體系中，在特定光激發下發出熒光，隨著循環次數的增加，被擴增的目的基因片段呈指數規律增長，通過實
熒光定量PCR儀原理
熒光定量PCR儀技術原理將標記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后，完成高溫變性，低溫復性，適溫延伸的熱循環，并遵守聚合酶鏈反應規律，與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷，熒光素游離于反應體系中，在特定光激發下發出熒光，隨著循環次數的增加，被擴增的目的基因片段呈指數規律增長，通過實時
多重qPCR探針的熒光基團的要求
? 1. 避免熒光基團相互干擾? ? 多重qPCR的實驗設計要求比單一反應體系的要復雜的多。檢測不同指標的探針必須攜帶不同光譜范圍的熒光基團。下圖是幾種常用的熒光基團的發射光譜，很多熒光光譜相近的熒光基團，它們雖然最大發射波長不同，但是在附近的波段內還是會有相互重疊的，一定要避免熒光基團發射光譜之間
多色探針熔解技術有何潛力？
多色探針熔解曲線分析技術熒光PCR是應用最廣的核酸檢測平臺。熒光PCR操作簡單、閉管反應，可有效降低擴增產物污染，但一大缺點在于它所能檢測的靶標數目有限。這也是熒光PCR在臨床應用受到制約的重要因素，但隨著多色探針熔解曲線分析技術的出現，卻很好的解決了這個問題，即能夠在保留熒光PCR優點的同時也能突
實時熒光定量PCR檢測方法SYBR－Green－I－法與TaqMan－探針法
來自美國Azure Biosystems公司的Azure Cielo?實時熒光定量PCR系統，融合了高品質Pilter溫度模塊和基于光纖傳輸的光學檢測系統，為您的科學研究提供高精準、高靈敏的可靠結果。北京深藍云生物科技有限公司已經為您準備好了儀器，期待您的試用哦~既然儀器已經備好了，那么該怎樣選
熒光探針的化學性質
熒光定量PCR所使用的熒光化學制劑可分為兩種：熒光探針和熒光染料。PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時，Taq酶的5’－3’外切酶活性將探針酶切
淬冷膨脹儀的安裝保養方法
1、儀器應安裝在穩定的基礎上，周圍無震動源，機械主機的工作臺高度應低于800㎜。2、儀器使用過程中，須用氬氣瓶、冷卻水，因而要考慮裝置的擺放和連接。客戶訂購的測溫在1000℃以下的儀器及專用儀器不需要氬氣保護。3、試驗完畢后，應及時清潔儀器。?
高溫箱式電爐淬鋼技術問題
高溫箱式電爐淬鋼技術問題箱式電爐除塵系統包括一、二次煙塵的捕集和含塵煙氣的凈化。隨著除塵設備種類、性能和質量的不斷改進與完善，目前國內中小型箱式電爐（30t以下）除塵技術的焦點主要集中在出爐煙氣捕集方式的選擇上，煙氣捕集率的大小直接影響到煉鋼工人的工作環境和身心健康。國家規定，車間內粉塵的濃度應不小
淬冷膨脹儀試樣規范及制備
試樣規范及制備1、試樣尺寸圓柱體Φ（6～10）×50（mm）方形體（6～10）×（6～10）×50（mm）2、試樣制備①型殼材料試樣：用專用模具壓制蠟模，按型殼工藝涂掛試樣，??????????????????????????????????????????????? ???????????脫蠟后在
淬煉務實之風，拒絕形式主義
當前，9600多萬名黨員正在同修一門功課——學習貫徹習近平新時代中國特色社會主義思想主題教育。從規劃清晰路徑、強調“要把理論學習、調查研究、推動發展、檢視整改等貫通起來，有機融合、一體推進”，到作出明確部署、要求“抓好調查研究，在察實情、出實招、求實效上下功夫，把工作抓實、基礎打實、步子邁實”，“實
熒光猝滅的簡介
猝滅是激發態通過非輻射復合的途徑達到弛豫，光穩定的一種。Quench本意為用水澆滅，淬滅為外來詞匯，并沒有“突然熄滅”中“突然”之意，故“猝滅”應為誤傳。 熒光淬滅是指熒光物質分子與溶劑分子之間發生淬滅，熒光猝滅分為靜態淬滅和動態淬滅。利用某種物質對某一種熒光物質的熒光淬滅作用而建立的對該淬滅
新基因技術可提高作物光合作用產量
美國一項最新研究說，通過改造植物中的相關基因，可以使植物更有效進行光合作用，從而提高作物產量。植物通過光合作用把陽光和空氣轉化成有機物，從而給人們提供食物和燃料。但如果植物接受過多光照，可能對進行光合作用的相關細胞器造成損害，因此植物需要利用一種名為“非光化學淬滅”的機制來保護自身。 美國勞倫
深藍云qPCR知識小課堂TaqMan探針法的操作
在之前發表的文章《實時熒光定量PCR檢測方法，你選對了嗎?》中提到，實時熒光定量PCR常用的方法包括了SYBR Green染料法、TaqMan探針法、分子信標、熒光共振能量傳遞(FRET)和LUX Primers等。那么應用最為廣泛的則是SYBR Green染料法和TaqMan探針法，兩者各有所
TaqMan探針法的操作
在之前發表的文章《實時熒光定量PCR檢測方法，你選對了嗎?》中提到，實時熒光定量PCR常用的方法包括了SYBR Green染料法、TaqMan探針法、分子信標、熒光共振能量傳遞(FRET)和LUX Primers等。那么應用最為廣泛的則是SYBR Green染料法和TaqMan探針法，兩者各