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聚合酶鏈式反應 ( PCR) 可對特定核苷酸片斷進行指數級的擴增 。在擴增反應結束之后，我們可以通過凝膠電泳的方法對擴增產物進行定性的分析，也可以通過 放射性核素摻入標記后的光密度掃描來進行定量的分析 。無論定性還是定量分析，分析的都是 PCR 終產物。但是在許多情況下，我們所感興趣的是未經 PCR 信號放大之前的起始模板量。例如我們想知道某一轉基因動植物轉基因的拷貝數或者某一特定基因在特定組織中的表達量。在這種需求下熒光定量 PCR 技術應運而生。所謂的實時熒光定量 PCR 就是 通過對 PCR 擴增反應中每一個循環產物熒光信號的實時檢測從而實現對起始模板定量及定性的分析。在實時熒光定量 PCR 反應中，引入了一種熒光化學物質，隨著 PCR 反應的進行， PCR 反應產物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監測產物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖 ( 如圖......閱讀全文
實時熒光定量PCR——一種科學準確的定量方法實時熒光定量PCR技術于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，由于該技術不僅實現了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規PCR相比，它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點，目前已得到廣泛應用。本文試就其定量原理、
眾所周知，PCR（聚合酶鏈反應）技術自從1985年問世以來，經過十幾年的發展，已成為實驗室的常規技術。它是現代分子生物學研究中不可缺少的手段，是一種極為敏感的放大系統。相比于傳統的臨床診斷方法，核酸診斷是分子水平上的診斷技術，可以彌補傳統臨床診斷方法的某些缺陷，比如，核酸診斷能直接揭示病原體的存在，
實時熒光定量PCR技術是指在PCR反應體系中加入熒光染料或熒光集團，利用熒光信號來實時監測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板濃度進行定量分析。 病原學檢測是動物疾病確診的關鍵點，而聚合酶鏈式反應（PCR）是目前病原檢測的最常用的分子生物學技術，具有高敏感性的特征。PCR技術發展已日趨完
實時熒光PCR檢測技術眾所周知，PCR（聚合酶鏈反應）技術自從1985年問世以來，經過十幾年的發展，已成為實驗室的常規技術。它是現代分子生物學研究中不可缺少的手段，是一種極為敏感的放大系統。相比于傳統的臨床診斷方法，核酸診斷是分子水平上的診斷技術，可以彌補傳統臨床診斷方法的某些缺陷，比如，核酸診斷能
PCR實驗室產品選擇指南 熒光 基團是吸收一定波長的光子后發射特定波長的光波，可以作為抗體等分子的標記物，實時熒光定量PCR中的Taqman探針常用熒光基團FAM標記熒光基團和TAMRA標記。 熒光基團 吸收特定波長的光子后熒光染料(通常稱為“熒光基團”或簡稱為“熒光
定量PCR 定義 以參照物為標準對PCR終產物進行分析或對PCR過程的進行監測，來評估樣本中靶基因的拷貝數，稱為定量PCR相對定量→絕對定量， 手工操作→自動化檢測， 靈敏度與特異性多有很大的提高。 定量PCR的可行性 定量一般是在PCR擴增的指數期進行的。 特定的待擴增基因片段 起始含量越大，則指
1、Ct值的定義在熒光定量PCR技術中，有一個很重要的概念--Ct值。C代表Cycle，t代表threshold，Ct值的含義是：每個反應管內的熒光信號到達設定的域值時所經歷的循環數。2、熒光域值（threshold）的設定PCR反應的前15個循環的熒光信號作為熒光本底信號，熒光域值的缺省設置是3-
聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction，PCR)可對特定核苷酸片斷進行指數級的擴增。在擴增反應結束之后，我們可以通過凝膠電泳的方法對擴增產物進行定性的分析，也可以通過放射性核素摻入標記后的光密度掃描來進行定量的分析。無論定性還是定量分析，分析的都是PCR終產物。但是在許多
劉向國 謝國明 (重慶醫科大 重慶市 400016)摘 要 熒光定量PCR儀技術是一種新的核酸定量技術，該技木在PCR儀反應系統中引人了熒光標記探針，具有可實時監測，高靈敏性，高特異性和高精確性的特點，極大地克服了原有PCR儀技術的不足，擴大了PCR儀的應用范圍。關鍵詞 定量pcr；熒光；基因Flu
一、阪崎腸桿菌是腸桿菌科的一種:1980年由黃色陰溝腸桿菌更名為阪崎腸桿菌。阪崎腸桿菌能引起嚴重的新生兒腦膜炎、小腸結腸炎和茵血癥，死亡率高達50% 以上。目前，微生物學家尚不清楚阪崎腸桿菌的污染來源，但許多病例報告表明嬰兒配方粉是目前發現的主要感染渠道。阪崎腸桿茵的生物學性狀及其對人群的健康危
聚合酶鏈式反應（polymerase chain reaction, PCR）自誕生之日起就決定了它不僅是一種高敏感、高特異的檢測核酸分子的定性方法，而且也是一個能對核酸分子進行精確定量的有力工具[1]。隨著分子生物學技術研究的不斷進展，定量PCR技術取得了突飛猛進的發展，不僅建立了一系
今天黨的十九大召開，習近平大大指出：中國特色社會主義進入新時代，我國社會主要矛盾已經轉化為人民日益增長的美好生活需要和不平衡不充分的發展之間的矛盾。想想都覺得高中政治課本過時了，而考研又多了一道大題。然而這些年，醫療領域進展可不止一點！就讓我們一起看看這些年，分子病理領域的發展！ 其實相對于其
【摘要】目的 建立結核分枝桿菌的熒光定量PCR檢測方法,探討熒光 PCR檢測痰標本中結核分枝桿菌的應用價值。方法 根據結核分枝桿菌基因保守序列設計引物和探針，并構建標準品。對102例培養涂陽的結核痰液標本和45例非結核感染者的痰標本，應用熒光定量PCR法、痰涂片抗酸染色法檢測結核分枝桿菌。 結果 熒
臨床檢驗常見設備包括：一、臨檢設備：血細胞分析儀、流式細胞儀、血凝分析儀、尿液干化學分析儀、尿液有形成分分析儀、糞便分析儀二、生化免疫設備：生化分析儀、化學發光免疫分析儀、酶免疫分析儀、熒光免疫分析儀三、分子診斷設備：核酸提取儀、實時熒光PCR儀、基因測序儀、質譜儀四、微生物檢驗設備：微生物鑒定藥敏
摘要：食品安全是決定我國經濟和社會發展中的關鍵問題，對提高人民生活質量有舉足輕重影響。現金，我國經濟和社會快速發展的同時，食品安全卻暴露出諸多問題。快速檢測技術這樣的大環境下應運而生，其不僅能夠在新社會背景下形成有效地檢測體制，還能對一些具有潛在安全性隱患的食品給予恰當的評價和定位，所以在食品加
熒光定量PCR簡介 熒光定量PCR檢測技術誕生至今已10多年的時間，而其應用一直都沒廣泛展開，究其原因，無外乎受制于相關儀器、試劑和技術的發展。近期，尤其是08年以來，儀器和試劑是遍地開花，這也使科研人員均躍躍欲試，都想借此技術使自己的研究能突飛猛進，發展勢頭通過查找每年所發表的文章數可一目了然。據
實時熒光定量 PCR技術原理與應用聚合酶鏈式反應 ( PCR) 可對特定核苷酸片斷進行指數級的擴增 。在擴增反應結束之后，我們可以通過凝膠電泳的方法對擴增產物進行定性的分析，也可以通過 放射性核素摻入標記后的光密度掃描來進行定量的分析 。無論定性還是定量分析，分析的都是 PCR 終產物。但是
模板 DNA 量越多，熒光達到域值的循環數越少，即 Ct 值越小。Log 起始模板濃度與 Ct 呈線性關系，通過已知起始拷貝數的標準品可作出標準曲線，根據樣品 Ct 值，就可以計算出樣品中所含的模板量。目前常用熒光標記方法 方法 優點
聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction, PCR）是微量核酸擴增的有效工具，由于其靈敏、特異、快速等優點，在醫學上已廣泛應用與病毒、細菌病原體及遺傳病、腫瘤的早期診斷。隨著PCR技術的發展，特別是病毒或腫瘤的治療監測、疾病的診斷、機體基因表達調控方面，不僅需要檢測其存在是否
(張蓓，沈立松 上海第二醫科大學附屬新華醫院上海兒童醫學中心實驗診斷中心)摘要:多聚酶鏈反應飛速的發展使其成為了分子生物學實驗室重要的工具，實時熒光定量PCR(real-timequantitative PCR)技術以其敏感性高、重復性好、速度快和污染少使PCR技術又
熒光定量PCR的應用分子生物學研究1、核酸定量分析。 對傳染性疾病進行定量定性分析，病原微生物或病毒含量的檢測 , 比如近期流行的甲型H1N1流感， 轉基因動植物基因拷貝數的檢測，RNAi 基因失活率的檢測等。2 、基因表達差異分析。 比較經過不同處理樣本之間特定基因的表達差異 （ 如藥物處理、物理
美吉生物配備的ABI7500型熒光定量PCR儀是特異性靶基因檢測與定量的一體化平臺。7500結合了PCR熱循環、熒光檢測和各種應用分析軟件，可實時定量觀察各反應管中PCR每一循環的擴增產物情況。PCR反應結束后，即可得到定量結果，無需進行凝膠電泳分析，PCR產物純化或其他任何實驗操作。7500
感染性疾病有病原微生物引起，致病的病原微生物主要有病毒、細菌、衣原體、支原體和螺旋體等。這些病原體的傳統檢測方法通常采用形態學檢查，體外培養和免疫學試驗。但對某些難以培養的病原體，抗原抗體檢測不能判斷體內病原體 DNA 或 RNAde 復制情況，或存在檢測靈敏度低等問題。自聚合酶鏈反應（ PCR ）
美吉生物配備的ABI7500型熒光定量PCR儀是特異性靶基因檢測與定量的一體化平臺。7500結合了PCR熱循環、熒光檢測和各種應用分析軟件，可實時定量觀察各反應管中PCR每一循環的擴增產物情況。PCR反應結束后，即可得到定量結果，無需進行凝膠電泳分析，PCR產物純化或其他任何實驗操作。7500
提起 PCR，在生物及其相關行業內可謂如雷貫耳，無人不知無人不曉，其影響之深，應用之廣可見一斑。 1985 年，美國 PE-Cetus 公司的 Mullis 等人發明了聚合酶鏈反應（PCR），實現了在試管中模擬細胞內的 DNA 復制。然而，采用 E-
提起 PCR，在生物及其相關行業內可謂如雷貫耳，無人不知無人不曉，其影響之深，應用之廣可見一斑。 1985 年，美國 PE-Cetus 公司的 Mullis 等人發明了聚合酶鏈反應（PCR），實現了在試管中模擬細胞內的 DNA 復制。然而，采用 E-coli D
鑒定轉基因植物的第一步就是要確定被轉基因已經穩定的整合到了染色體上。第二步任務就是評估有多少個轉基因拷貝，以及每個轉基因的表達水平如何。一般經過上游表達載體的設計構建以及下游轉化體系的建立、轉化品系的篩選鑒定等一系列步驟后，即獲得 T 0 代轉基因植物。在轉化過程中，外源 DNA 隨機插入植物
轉基因生物（Genetically Modified Organism，簡稱 GMO），是利用現代分子生物學技術改變基因組構成的生物，而非傳統的選擇育種，一般包括轉基因植物、 動物和微生物。轉基因食品就是利用上述的轉基因生物（包括植物、動物和微生物）加工而成的食品或食品添加劑。目前最受關注的絕大
摘要：隨著食品工業持續、快速地發展，傳統的方法已經不能夠 滿足當前對食品檢測的更高要求了，人們要求更為簡便快捷、靈活 性強、特異性高的先進的檢測方法，而現代的生物技術的快速發展 使食品的檢測方法更加多樣、準確、迅速及安全，也就是說生物技 術的應用滿足了現代食品檢測的更高要求。 關鍵詞：食品檢測；生物
（2）反應增強劑：PCR反應中加入一定濃度的增強劑如1%～10%二甲基亞砜（DMSO）、5%～20%甘油、非離子去污劑、1.25%～10%甲酰胺和10～100 μg/ml牛血清白蛋白等可提高反應特異性和產量，有些反應只能在這些輔助劑存在時才能進行。（3）熱啟動PCR：如果PCR反應混合物置于低于Tm