武漢病毒所在活體分子影像研究領域取得進展
中國科學院武漢病毒研究所崔宗強研究員和中科院生物物理研究所張先恩研究員聯合研究團隊在蛋白-蛋白及RNA-蛋白質相互作用的活體內分子成像方面取得重要進展，創建了遠紅光波段的熒光片段互補系統(Far-red fluorescence complementation systems)，首次實現了動物活體內RNA-蛋白質相互作用的熒光成像，并揭示了HIV-1 mRNA與人PTB蛋白相互作用機制。相關研究結果近日已在線發表于核心期刊Nucleic Acids Research。 蛋白-蛋白及RNA-蛋白質相互作用的活體成像一直是挑戰性的研究課題。該研究中，研究團隊開發了激發波長在600 nm以上的紅色熒光蛋白mNeptune熒光片段互補技術，建立了位于活體成像“光學窗口”的雙分子和三分子熒光互補系統。其中雙分子熒光互補系統可以用于活細胞及活體內蛋白-蛋白相互作用成像，三分子熒光互補系統可以用于活細胞及活體內RNA-蛋白質之間的相互作......閱讀全文
相互作用蛋白鑒定實驗——相互作用蛋白捕獲
實驗方法原理實驗要經過兩次連續大量的酵母菌平板篩選過程。酵母菌含有 LexA 融合探針、報道基因和插入PJG4-5（見圖19.1.6）的 GAL 啟動子控制下的 cDNA 表達文庫。最近，已有可供用于這個系統的文庫。實驗材料攜帶適當質粒組合的酵母菌試劑、試劑盒完全（CM）缺失成分液體培養基含有如下指
新技術可識別活體大腦蛋白質
研究人員能捕獲蛋白質在活體老鼠大腦中的表達用于質譜分析。圖片來源：美國西北大學 研究人員首次開發出可以識別活體動物大腦中蛋白質的新方法，向弄清不同類型神經元中數百萬種不同的蛋白質邁出了一大步。8月11日，相關論文發表于《自然—通訊》。該研究有望推動帕金森氏癥和阿爾茨海默病等疾病新療法的開發。 美
蛋白蛋白相互作用技術介紹
技術內容蛋白質并非孤立存在的生物分子，而是具有特定三維空間結構并與其他蛋白質相互作用，共同執行功能。因此，蛋白質的模塊及空間組織與其表達水平具有同樣的重要性。為了解析蛋白質組的組織結構單元而開發的基于質譜的蛋白質組學方法通常結合了質譜檢測與各種生化試驗。其中最經典的技術為1999[1]首次報導的親和
蛋白蛋白相互作用技術內容
技術內容 蛋白質并非孤立存在的生物分子，而是具有特定三維空間結構并與其他蛋白質相互作用，共同執行功能。因此，蛋白質的模塊及空間組織與其表達水平具有同樣的重要性。為了解析蛋白質組的組織結構單元而開發的基于質譜的蛋白質組學方法通常結合了質譜檢測與各種生化試驗。其中最經典的技術為1999[1]
蛋白質相互作用
Interaction Trap/Trap Two-Hybrid System·?????????Yeast Two-Hybrid System?(Finley Lab)This is one of the most comprehensive and detailed guide to yeast
相互作用蛋白鑒定實驗
實驗方法原理 捕捉相互作用蛋白的第一步是構建能夠表達 LexA 與目的蛋白的融合體的質粒。這種質粒轉化到包含 LEU2 和lacZ 報道基因的報道酵母株中，并要行一系列的對照實驗來鑒定所構建的誘餌蛋白是否適用，是否需要修飾，或是否應改變酵母菌報道條件。這些對照實驗實現了誘餌蛋白在酵母菌中作為
相互作用蛋白鑒定實驗
鑒定誘餌蛋白（半乳糖苷酶） 鑒定誘餌蛋白（LacZ 的活性分析） 相互作用蛋白捕獲 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 捕捉相互作用蛋白的第一步是構建能夠表達
活體染料
中文名稱活體染料英文名稱vital stain;vital dye定 義可使活細胞呈染色反應的物質。如中性紅、尼羅蘭。某些染色劑對細胞器染色的具有選擇性，如詹納斯綠可專一性地使線粒體著色。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞生物學技術（二級學科）
相互作用蛋白的捕獲實驗
基本實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 酵母菌 試劑、試劑盒
相互作用蛋白的捕獲實驗
相互作用蛋白的捕獲試驗要經過兩次連續大量的酵母菌平板篩選過程。酵母菌含有lexA 融合合探針，報道基因和插入pJG4-5的GAL啟動子控制下的cDNA表達文庫。實驗材料酵母菌試劑、試劑盒CM培養基乙酸鋰PEGTEDMSO甘油氨芐青霉素儀器、耗材離心機分光光度計搖床培養箱實驗步驟1. ?為了轉化文庫，
相互作用蛋白的捕獲實驗
實驗材料?酵母菌試劑、試劑盒?CM培養基乙酸鋰PEGTEDMSO甘油氨芐青霉素儀器、耗材?離心機分光光度計搖床培養箱實驗步驟?1.? 為了轉化文庫，將約20 ml 含pSH18-34和pBait 的酵母菌EGY48培養液接種到Glc/CM-Ura-His 省卻成分液體培養基中，于30℃培養過夜。2.
蛋白與蛋白相互作用分析—免疫共沉淀
?實驗原理免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）是以抗體和抗原之間的特異性結合以及細菌蛋白質的“protein A/G"特異性地結合抗體Fc段的現象而開發出來的方法，是研究蛋白質相互作用的經典方法，主要用于確定兩種蛋白質在完整細胞內是否存在生理性相互作用。其原理是：當
活體成像概述
一、引子 ?自從Roentgen發現了X光的用途，動物活體成像就走進了科學家的視野。活體成像有很多種模式，除了X光的離子輻射成像，還有聲音、磁鐵甚至光光成像。每種都有缺點和優點，舉例來說，要確定解剖結構的位置和形狀，CT掃描、MRI、超聲波可能是較好的選擇，但涉及到腫瘤細胞的注射位置、表達層面，他們
活體染色定義
因此活染技術通常可用來研究生活狀態下的細胞形態結構和生理、病理狀態。根據所用染色劑的性質和染色方法的不同，通常把活體染色分為體內活染與體外活染兩類。體內活染是以膠體狀的染料溶液注入動、植物體內，染料的膠粒固定、堆積在細胞內某些特殊結構里，達到易于識別的目的。它是由活的動、植物分離出部分細胞或組織小塊
用－GST－融合蛋白檢測蛋白質蛋白質相互作用實驗
實驗材料 結合到谷胱甘肽-球脂糖的 GST 融合蛋白試劑、試劑盒 堿性緩沖液 封閉緩沖液 相互作用緩沖液PK 緩沖液還原型谷胱甘肽于 Tris-Cl中洗滌緩沖液 1 洗滌緩沖液 2蛋白酶蛋白激酶 A[y-32P]ATP儀器、耗材 與待篩選蛋白結合的膜或濾膜Sephadex G-50 轉柱實驗步驟 材
用－GST－融合蛋白檢測蛋白質蛋白質相互作用實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 結合到谷胱甘肽-球脂糖的 GST 融合蛋白 試劑、試劑盒 堿性緩沖液 封閉緩沖液 相
用－GST－融合蛋白檢測蛋白質蛋白質相互作用實驗
GST 融合蛋白作為在細菌中表達的重組蛋白，從它們被介紹以來，已用于成千上萬個研究項目中（Smith and johnson 1988)。它們常常被用于制備抗體，這些抗體可用于研究蛋白質-蛋白質相互作用以及分析生化反應。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W
我國學者在活體內細胞間相互作用解析研究方面取得新進展
圖 CINTER-seq方法揭示細胞互作依賴的細胞景觀與基因表達特征 在國家自然科學基金項目（批準號：32350030，32450763，21977048等）資助下，南京大學李劼教授團隊在活體內細胞間相互作用解析研究方面取得了新進展，研究成果以“CINTER-seq：化學方法剖析揭示活體內細胞互作
武漢病毒所在活體分子影像研究領域取得進展
中國科學院武漢病毒研究所崔宗強研究員和中科院生物物理研究所張先恩研究員聯合研究團隊在蛋白-蛋白及RNA-蛋白質相互作用的活體內分子成像方面取得重要進展，創建了遠紅光波段的熒光片段互補系統(Far-red fluorescence complementation systems)，首次實現了動物活
相互作用蛋白鑒定實驗——鑒定誘餌蛋白（LacZ的活性分析）
實驗方法原理捕捉相互作用蛋白的第一步是構建能夠表達 LexA 與目的蛋白的融合體的質粒。這種質粒轉化到包含 LEU2 和lacZ 報道基因的報道酵母株中，并要行一系列的對照實驗來鑒定所構建的誘餌蛋白是否適用，是否需要修飾，或是否應改變酵母菌報道條件。這些對照實驗實現了誘餌蛋白在酵母菌中作為一種穩定蛋
JBC：凋亡通路關鍵蛋白的相互作用
耶路撒冷的希伯來大學和魏茨曼科學研究所的研究人員發現了兩種線粒體凋亡通路關鍵蛋白相互作用的分子機制，提出了誘導細胞凋亡或細胞程序性死亡的新方法，有望引導人們研發新的癌癥治療手段。 凋亡是機體對抗異常細胞(如癌細胞)擴散的必要防御機制，是經由相互作用的蛋白網絡發生的復雜生物學過程。癌細胞常常
蛋白質與水的相互作用
蛋白質與水之間的作用力主要是蛋白質中的肽鍵（偶極-偶極相互作用或氫鍵），或氨基酸的側鏈（解離的、極性甚至非極性基團）同水分子之間發生了相互作用。影響蛋白質水溶性的應素很多：（1）pH>pI 時，蛋白質帶負電荷，pH=pI 時，蛋白質不帶電荷，pH 時，蛋白質帶正電荷。溶液的pH 低于或高于蛋白質的p
酵母雙雜交原理（蛋白相互作用）
?概述酵母雙雜交系統由Fields和Song等首先在研究真核基因轉錄調控中建立。典型的真核生長轉錄因子， 如GAL4、GCN4、等都含有二個不同的結構域: DNA結合結構域（DNA-binding domain）和轉錄激活結構域（transcription-activating domain）。前者
蛋白質與水的相互作用
水和蛋白質是構成一切生命的基礎材料。對人體來說，我們需要有二十種氨基酸才能保證細胞的正常工作。其中，有八種氨基酸是人體無法自行合成，必須由食物中攝取，稱作“必需氨基酸”，又稱作完全蛋白。資料表明：這八種中如果缺少任何一種，其他則毫無用處。另外十二種是人體可以自行合成的，稱作“非必需氨基酸”。人體
活體成像技術應用
動物模型已經成為癌癥，動脈粥樣硬化，神經系統疾病（如阿爾茨海默氏病）和傳染病研究中不可或缺的手段，而在這個過程中，很多情況下下需要使用到活體成像技術。原因是活體城鄉技術可用于研究觀測特異性細胞、基因和分子的表達或者相互作用關系，追蹤靶細胞，藥物，從分子和細胞水平對藥物療效進行成像，從病理水平評估
活體染色的定義
因此活染技術通常可用來研究生活狀態下的細胞形態結構和生理、病理狀態。根據所用染色劑的性質和染色方法的不同，通常把活體染色分為體內活染與體外活染兩類。體內活染是以膠體狀的染料溶液注入動、植物體內，染料的膠粒固定、堆積在細胞內某些特殊結構里，達到易于識別的目的。它是由活的動、植物分離出部分細胞或組織小塊
活體電穿孔法與其他活體基因導入方法的比較
到目前為止,非病毒載體的活體基因導入方法有直接注射法、脂質體法、基因槍法、電穿孔法等。每一種方法都有其各自的特殊性,因此很難將這幾種方法進行簡單的比較。 1、直接注射法 可將外源基因直接注射到靶位點或血管中,但此種方法不適合以肌肉作為靶器官,它的外源基因表達效率極低,僅為電穿孔法的百分之一。
新策略助力蛋白蛋白相互作用先導化合物設計
中國科學院上海藥物研究所研究員羅成、周兵、陳奕和華東師范大學研究員陳示潔合作，提出“強支點占據-杠桿干擾”（FOLP）的蛋白-蛋白相互作用（PPI）先導化合物設計策略，為PPI領域研究提供新的概念和方法，將有助于未來其他PPI調控劑的開發。相關研究8月19日發表于《德國應用化學》，并被推薦為“Hot
相互作用蛋白鑒定實驗——鑒定誘餌蛋白（半乳糖苷酶）
通過確定與之結合的其他蛋白質來理解某種特定蛋白質的功能，常常是十分有用的方法。這可以通過從文庫中選擇或篩選與靶蛋白相互作用的新蛋白來實現。現有一種特別有用的方法即雙雜交系統或相互作用阱， 用來測定新的相互作用蛋白，這種方法采用充當「試管」的酵母菌和一種報道系統的轉錄激活作用來識別結合蛋白。本方法也可
新策略助力蛋白蛋白相互作用先導化合物設計
中國科學院上海藥物研究所研究員羅成、周兵、陳奕和華東師范大學研究員陳示潔合作，提出“強支點占據-杠桿干擾”（FOLP）的蛋白-蛋白相互作用（PPI）先導化合物設計策略，為PPI領域研究提供新的概念和方法，將有助于未來其他PPI調控劑的開發。相關研究8月19日發表于《德國應用化學》，并被推薦為“H