《微生物檢測與質量控制技術》論壇：小小微生物的重要性

　　分析測試百科網訊 微生物，是一群平時在我們生活中用肉眼不能看到的生物，他們形態各異，無處不在（除了特殊情況），生長速度非常快，只有通過顯微鏡，我們才能看清他們的廬山真面目。微生物與人類關系密切，例如我們平時用的抗生素，喝的酸奶都是微生物的產物，但是在某些時候，微生物卻是我們的致命因素。尤其是在藥品中，與我們的身體密切相關，微生物的檢測與控制就顯得尤為重要。

《微生物檢測與質量控制技術》論壇現場

　　2015年8月12日，第三屆全國制藥企業質量控制技術論壇在北京召開，大會圍繞著制藥企業質量控制技術展開討論。在下午的《微生物檢測與質量控制技術》分論壇上，各位報告人結合2015版新修訂的藥典，針對新版藥典的微生物部分提出了自己的看法，也對其中的某些步驟提出了指導性的意見。

青島市食品藥品檢驗中心原微生物室主任 杜平華

　　來自青島市食品藥品檢驗中心原微生物室主任杜平華給大家講解了報告《2015新版藥典微生物標準的修訂》。杜平華主要介紹了微生物限度和無菌的標準要求及對比新版藥典增修訂的內容。微生物限度在新版藥典增訂了原料、輔料、中藥提取物及飲片的微生物限度標準。并且以需氧菌總數取代細菌數，用來表示。杜平華還解釋了限度標準的含義：10¹CFU：最大可接受限制=20；10²CFU：最大可接受現值=200；10³CFU：最大可接受現值=2000。而且以耐膽鹽格蘭陰性菌取代大腸桿菌。在作報告時，杜平華一再強調，關于這點我們不應理解為限度標準的放寬，而是因為微生物在樣品中的分布和提取時的不均勻性會給結果帶來不確定性。這關系到微生物計數實驗的精密度。杜平華還對新版藥典中的微生物限度標準作了解釋。

浙江泰林生物技術股份有限公司生物技術研發部經理 趙振波

　　來自浙江泰林生物技術股份有限公司生物技術研發部經理趙振波講了《如何應對2015版藥典無菌檢查要求的變化——風險預防和控制》。報告主要講述了在新版藥典微生物部分要求變化的情況下，從環境設備、材料、儀器、清潔衛生處理和消毒、過程控制和人員的方面對微生物進行嚴格的控制。

默克化工技術（上海）有限公司實驗室分析部/市場部經理 李峰

　　默克化工技術（上海）有限公司實驗室分析部/市場部經理李峰給大家帶來了《新版藥典檢測培養基介紹及配制注意事項》。根據新版藥典的6個檢查法和6個指導原則，李峰給大家詳細介紹了培養基的配制及保存方法。2015版藥典微生物限度方面新增了胰酪大豆胨肉湯、胰酪大豆胨瓊脂、沙氏葡萄糖瓊脂、沙氏葡萄糖肉湯、馬鈴薯葡萄糖瓊脂五種培養基。相應的無菌檢查也將營養瓊脂和營養肉湯換成了胰酪大豆胨和沙氏葡萄糖的培養基。接下來，李峰主要介紹了培養基的配制流程中的注意事項，對于培養基要進行質量控制，要從每批制備好的培養基中選取部分樣品進行污染測試，還要使用質控菌檢測培養基的生長能力，抑制能力和特異性。最后，李峰還介紹了默克在德國的培養基工廠。

中國藥學微生物菌種保藏管理中心 張濤

　　中國藥學微生物菌種保藏管理中心張濤給作了題為《微生物菌種鑒定、管理與質量控制》的報告。微生物菌種是微生物檢測必要的比對物，所以實驗中一份活力高、純度高的微生物菌種是非常有必要的。張濤主要介紹了四種微生物鑒定的方法，基因型數據的方法（通過測定其中G+C含量或是DNA雜交）、生理生態形態學方法（顯微鏡觀察）、生理生化特征方法（通過鑒定微生物圖譜與菌種數據庫比對）、細胞化學特征。鑒定之后還要選擇合適的保藏方法以保證菌種的存活率。張濤主要介紹了4種方法：沙土保藏法、冷凍干燥保藏法、-80度低溫冷凍法、液氮超低溫保藏法。在保藏的時候，要特別注意控制降溫的速率，注意使用保護劑，使用抗誘變劑和修飾劑以提高菌種存活率。

布魯克應用技術支持 張欣怡

　　接下來的布魯克應用技術支持張欣怡給大家帶來一款高新技術微生物快速鑒定——MALDI Biotyper。MALDI Biotyper（基質輔助激光解析電離-飛行時間）質譜儀采集微生物獨特的分子指紋圖譜，從而對微生物進行鑒定。并通過與數據庫中數千種微生物菌株的參考指紋圖譜進行比對，實現微生物可靠且準確的鑒定。布魯克的MALDI Biotyper有以下幾大特點：1、操作簡單、快速，樣品測定時間只需20s，幾分鐘就可以出圖譜；2、樣品需求量少，0.25ng-0.5ug生物樣品，單菌落即可；3、更快、更準、更省錢；4、適用面廣泛，革蘭氏陽性、陰性菌、酵母菌、絲狀真菌等都可以；5、培養條件影響甚小；6、開放式數據庫，用戶可以自建數據庫；7、實驗室間重復性研究表明，布魯克MALDI Biotyper重復性達到98.7%。目前，布魯克MALDI Biotyper已應用于臨床微生物，環境微生物，工業微生物。中國也有部分檢驗檢疫局已應用。

諾和諾德（中國）制藥有限公司微生物實驗室 杜紅梅

　　最后，諾和諾德（中國）制藥有限公司微生物實驗室杜紅梅女士給大家帶來了《歐洲藥典/美國藥典和2015版中國藥典胰島素無菌檢查方法比對》。通過對歐洲、美國、日本等其他國家對胰島素無菌檢查方法的解讀與比較，最后總結出對各藥典中的無菌檢查方法進行統一的優勢：1、簡化培養基促生長實驗和無菌常規檢查的分析流程；2、如果使用標準菌株來自ATCC，可以簡化菌株準備操作程序；3、在進行了充分的風險評估，對患者不帶來任何風險的基礎上，降低無菌檢查成本；4、根據驗證分析，有些藥典不同點是不增加患者風險的。