電泳是指電解質中帶電粒子在電場力作用下,以不同的速度向電荷相反方向遷移的現象。
高效毛細管電泳(HPCE),是指離子或帶電粒子以毛細管為分離室,以高壓直流電場為驅動力,依據樣品中各組分之間遷移速度和分配行為上的差異而實現分離的液相分離分析技術。由于毛細管內徑小,表面積和體積的比值大,易于散熱,因此毛細管電泳可以減少焦耳熱的產生,這是與傳統電泳技術的根本區別。
HPCE實際上包含電泳、色譜及其相互交叉的內容,是分析科學中繼高效液相色譜之后的又一重大進展,它使得分離分析科學從微升級水平進入到納升級水平,并使得細胞的分析,乃至單分子的分析成為可能。尤其是對樣品珍貴,取樣極少的生物大分子,毛細管電泳具有絕對的優勢。其突出特點是:
(1)所需樣品量少;
(2)分析速度快,分離效率高,分辨率高,靈敏度高;
(3)分離模式多,開發分析方法容易;
(4)溶劑用量少,經濟、環保;
(5)應用范圍極廣。
毛細管電泳技術可用于分離分析多種組分,如核酸/核苷酸、蛋白質/多肽/氨基酸、糖類/糖蛋白、酶、堿氨基酸、微量元素、小的生物活性分子等的快速分析,以及DNA序列分析和DNA合成中產物純度測定等,還可用于堿性藥物分子及其代謝產物、無機及有機離子/有機酸、手性化合物、單細胞分析、藥物與細胞的相互作用和病毒的分析。
毛細管電泳依分離模式不同,可分為:毛細管區帶電泳(CZE)、毛細管膠束電動色譜(MECC/MCKC)、毛細管凝膠電泳(CGE)、毛細管等電聚焦(cIEF)、親和毛細管電泳(ACE)、毛細管電色譜(CEC)。下面以最常用的毛細管區帶電泳(CZE)為例,探討毛細管電泳原理及分析策略。
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