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  • 發布時間:2019-03-28 15:16 原文鏈接: 二維聚丙烯酰胺凝膠電泳的樣品制備——細胞

    實驗材料

    細胞

    試劑、試劑盒

    培養基

    實驗步驟

    對體外懸浮培養生長的細胞或周期性細胞樣品(如紅細胞、淋巴細胞),理想的方法是通過離心收集,用磷酸鹽緩沖液清洗并溶于樣品緩沖液。對于在固體基質中培養的細胞,應首先去除培養基質,用 PBS 或等滲蔗糖溶液清洗細胞層,后者是減少可能干擾一向 IEF 的鹽的特別有效的方法。然后通過刮擦方法收獲細胞,但應避免使用蛋白裂解酶,或者,加入少量體積溶解緩沖液.將附著在基質上的細胞直接裂解。如果細胞核酸含植過高而導致樣品黏度太大時.可用不含蛋白質酶的 DNase/RNase 混合物來處理樣品


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