質譜技術在臨床感染診斷中的應用

　　1. 臨床常見細菌的鑒定：2009年Seng等用1660株細菌對MALDI-TOF MS常規鑒定細菌進行前瞻性研究，結果顯示MALDI-TOF MS是一種經濟、快速、準確的常規細菌鑒定方法，未來有可能取代傳統的革蘭染色和生化方法。此后，MALDI-TOF MS在臨床應用迅速增加。在Medline數據庫用“MALDI tof bacteria identification”作為MeSH檢索詞，從2009至2013年1月發表相關文章467篇，其中2011至2013年發表323篇。由此可見MALDI-TOF MS近幾年在臨床微生物檢驗中備受關注。

　　另外，MALDI-TOF MS對彎曲菌、螺桿菌、軍團菌等苛氧菌、少見菌等的鑒定，解決了微生物實驗室對這類病原菌的鑒定、臨床對其感染的診斷和治療、流行病學資料缺失等的瓶頸問題。

　　2. 樣本直接檢測：應用MALDI-TOF MS直接鑒定陽性血培養標本中的細菌和真菌可以極大地提高檢測速度。大量的研究嘗試用不同的方法來處理血標本，由于血培養基各異、數據庫和分析軟件等差異都對樣本前處理的方法標準化造成了一定的困難。布魯克公司研發了血培養標本的前處理試劑盒，用于陽性血培養標本直接質譜鑒定的前處理。研究顯示革蘭陰性菌的準確率優于革蘭陽性菌，而對厭氧菌、α-溶血性鏈球菌和多個細菌混合樣本的鑒定存在困難。新的富集技術的應用（比如附加特異性抗體親和特定蛋白）以及相應分析軟件的改進，將使MALDI-TOF MS直接用于血液病原菌的檢驗成為可能，即MALDI-TOF MS作為一種快速、使用簡便，低成本消耗的檢測技術，有望取代傳統血培養檢測技術，為血培養中病原菌的快速診斷提供有力支持。此外，臨床的尿液和腦脊液標本也可以經一定處理后，用質譜技術進行蛋白譜的分析用于疾病的輔助診斷。

　　3. 真菌鑒定：有學者應用MALDI-TOF MS對327株菌（其中19株為酵母菌）在種的水平上鑒定正確率為61株為酵母菌）的鑒定正確率為92%。

　　4. 非結核分枝桿菌鑒定：國外學者對107株分枝桿菌臨床分離株（包括結核分枝桿菌復合體），利用聲波降解的熱失活方法和利用玻璃珠進行細胞裂解的方法進行失活和提取，再利用MALDI-TOF MS方法進行鑒定，發現兩種方法在種/屬水平上成功鑒定率分別為82.2%和88.8%。周昭彥等采用MALDI-TOF MS對83株非結核分枝桿菌（臨床分離非結核分枝桿菌15株和醫院供水系統環境分離非結核分枝桿菌68株）進行快速鑒定方法及其可行性、準確性和重復性進行研究，并得出結論認為MALDI-TOF MS可快速準確地鑒定臨床和環境分離的非結核分枝桿菌，在臨床實驗室常規鑒定方面有著較好的應用前景。

　　5. 質譜技術檢測病原菌耐藥性：除快速鑒定外，質譜技術也被嘗試用于檢測一些臨床常見的耐藥基因，例如耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌、萬古霉素耐藥的腸球菌等的識別，鮑曼不動桿菌相關的耐藥機制與產生條件等，為控制耐藥菌株播散流行及治療提供新的策略。

　　質譜技術為臨床微生物實驗室提供了快速而準確鑒定細菌、分枝桿菌、真菌等的方法，其中臨床標本的直接鑒定成為未來研究的方向。將MALDI-TOF MS與全自動藥敏檢測儀相連，整合到實驗室自動化流水線后，可以提高檢測速度，縮短患者住院時間，提高療效，降低醫院和患者的經濟負擔。另外MALDI-TOF MS與其他分子生物學檢測技術聯合，可以對臨床產酶菌株的檢測方法、基因分型及測序、蛋白質組學方面開展更加深入的研究。MALDI-TOF MS有望成為臨床實驗室微生物鑒定分型等領域發展的重要方向。