細胞凍存液氮罐的具體操作步驟和細胞復蘇流程

細胞凍存液氮罐的具體操作步驟：

　　1、培養皿或培養瓶中細胞按常規方法消化，或分離獲得原代細胞后，收集于離心管中。

　　2、使用離心機離心，去除上清，收集細胞沉淀。

　　3、根據細胞生長密度加入適量的LiveCyteTM細胞凍存液進行重懸，充分混勻。

　　4、將細胞懸液分裝至凍存管中，直接放置于-80°C冰箱保存。24小時后可移入液氮長期保存(可選)。

　　細胞凍存液氮罐的細胞復蘇流程：

　　1、從-80°C冰箱或液氮罐中取出細胞。

　　2、迅速放入37°C水浴，并不時搖動，在3分鐘之內使其完全融化。

　　3、在凍存管中加入少量完全培養基，再將細胞混合液移入含有該細胞完全培養基的離心管中，樣品和培養基比例為1：10，然后輕輕吹打，混合均勻。

　　4、離心后去除上清，收集細胞沉淀。

　　5、輕輕彈松細胞沉淀，加入適量培養液后接種于培養瓶或培養皿中，輕輕晃動使細胞分布均勻，置于37℃孵箱中培養。