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原生質體是指植物細胞去掉細胞壁的裸露部分。它在培養條件下，①具有再生細胞壁，進行連續的細胞分裂并再生成完整植株的能力；②具有攝取外源大分子、細胞器，以及細菌，病毒的能力，因此是進行遺傳操作，基因轉移的好材料；③通過同種和異種植物的原生質體融合，可產生異核體，實現體細胞雜交，培育出新品種。 實驗原理去掉植物細胞壁的方法可以是機械的人工操作，也可以利用酶解法。較早利用機械法制備原生質體的首推Klercker（1892），直到1960 年英國科學家Cocking 才*次用酶法大量制備原生質體。本實驗以植物的葉肉組織為材料，利用纖維素酶和果膠酶來消化細胞壁，分離細胞。 實驗用品器具：顯微鏡、離心機、離心管、剪刀（2）、鑷子（2）、吸管、小培養皿、載片、蓋片。試劑：0.16mol/L CaCI.2.H2O、20%蔗糖液、酶解液材料：油菜或菠菜或煙草 實驗方法步驟1、取材 根據實驗目的和條件選取不同的材料2......閱讀全文
原生質體（Protoplast）：指采用機械或酶解法去掉細胞壁的裸露細胞。一、原生質體的應用 由于沒有細胞壁，原生質體為作物遺傳改良和植物學研究提供了極為有利的試驗材料。原生質體可以用于下面幾種研究。1. 用作細胞雜交服務于作物改良2. 用作遺傳轉化的對象3. 研
摘要 本文對植物的原生質體融合技術得研究進展進行了綜述。闡述原生質體制備、培養方面的研究進展，隨后介紹了原生質體融合方法、融合機理和融合方式等的研究進展，最后對其今后的應用前景進行了展望，為原生質體融合技術的發展提供了參考。 關鍵詞 原生質體 融合技術 研究進展 01 — 原生質體制
01 — 原生質體制備 1.材料的選擇及預處理 許多研究表明，在原生質體分離之前，先對植物材料進行預處理能夠有效提高原生質體的游離效率，在同等材料用量下可以分離出較多的原生質體。柳玉晶等[1]的研究表明，在分離百合葉片原生質體前對其進行13%甘露醇預處理和黑暗處理能顯著提高原生質體產量。
微生物細胞培養，簡稱微生物培養，包括原核細胞培養（細菌培養）和真核細胞培養（霉菌培養和酵母培養）。這些細胞小、且具有細胞壁，細胞周期非常短，如細菌每20-30min增殖1次。植物細胞培養指原生質體培養。未考慮分離出原生質體的植物細胞培養，無論是游離的單細胞或組織塊，都稱作植物組織培養。動物組織細胞培
3.流式細胞術在高等植物中的應用3．1應用于植物中的特殊性由于植物細胞與動物細胞在結構上的差異，例如植物細胞具有細胞壁、特殊細胞器以及中央液泡等，因此流式細胞術應用于植物細胞時，在樣品制備、染色、儀器的改造等方面都應適應植物細胞的上述特點。3．1．1制備植物染色體懸液的材料1984年De Laat和
實驗概要本實驗介紹了原生質體分離的方法及利用PEG原生質體融合的原理和方法。實驗原理植物原生質體是除去細胞壁后為原生質所包圍的“裸露細胞”，是開展基礎研究的理想材料。其中酶解法分離原生質體是一個常用的技術，其原理是植物細胞壁主要由纖維素、半纖維素和果膠質組成，因而使用纖維素酶、半纖維素酶和果膠酶能降
植物組織培養（Plant Tissue Culture）：是指通過無菌操作分離植物體的一部分（外植體explant），接種到培養基上，在人工控制的條件下（包括營養、激素、溫度、光照、濕度）進行培養，使其產生完整植株的過程。（主要有原生質體（Protoplast），懸浮細胞，組織（愈傷組織Callus
流式細胞術(Flow cytometry，簡稱FCM)是20世紀70年代發展起來的一種對細胞的物理性質及化學性質，如細胞大小、內部結構、DNA、RNA、蛋白質、抗原等進行快速測定并可分類收集的技術。該技術超越了傳統顯微分析技術，能在瞬間對大量細胞進行準確的分析。這種快速有效的細胞分析技術已廣泛應用于
植物原生質體是指脫去全部細胞壁由質膜包被的具有生命活力的裸露細胞。它具有細胞生命特征和全能型，是細胞無性系變異和突變體篩選的重要來源，同時也是植物遺傳工程的理想受體和遺傳改良的理想材料。酶解法分離原生質體是一個常用的技術，其原理是植物細胞壁主要由纖維素、半纖維素和果膠質組成，因而使用纖維素酶、半纖維
二、重組DNA分子轉入真核細胞1. 根癌農桿菌Ti質粒介導法農桿菌介導的Ti質粒載體轉化法是目前研究最多、機制最清楚、技術方法最成熟的基因轉化途徑。迄今為止約8096的轉基因植株都是利用農桿菌介導轉化系統獲得的。農桿菌是一類土壤習居菌，革蘭氏染色呈陰性，能感染雙子葉植物和裸子植物，而對絕大多數單子葉
植物原生質體的制備可以用于：（1）由于其具有再生細胞壁，進行連續的細胞分裂并再生成完整植株的能力；（2）具有攝取外源大分子、細胞器，以及細菌，病毒的能力，因此是進行遺傳操作，基因轉移的好材料；（3）通過同種和異種植物的原生質體融合，可產生異核體，實現體細胞雜交，培育出新品種。實驗方法原理去掉植物細胞
植物體細胞雜交（plant somatic hybridization）,又稱原生質體融合（Protoplast fusion ）是指將植物不同種、屬，甚至科間的原生質體通過人工方法誘導融合，然后進行離體培養，使其再生雜種植株的技術。植物細胞具有細胞壁，未脫壁的兩個細胞是很難融合的，植物細胞只有
細胞電融合的優勢在于（1）融合率高（2）無毒性（3）操作簡便（4）融合后的細胞繼續培養成活率高等。動物的游離細胞以及植物成微生物去壁后的原生質體，在電刺激下進行細胞融合，是細胞工程手段的又一進展。實驗方法原理將制備的游離細胞或原生質體，置于電融合室中，在高頻交流電場的作用下，細胞被極化，成為偶極子，
實驗方法原理 將制備的游離細胞或原生質體，置于電融合室中，在高頻交流電場的作用下，細胞被極化，成為偶極子，造成細胞之間相互連接，如果施加的高頻交流電壓(即正弦波的p-p值)過高或作用
實驗方法原理 將制備的游離細胞或原生質體，置于電融合室中，在高頻交流電場的作用下，細胞被極化，成為偶極子，造成細胞之間相互連接，如果施加的高頻交流電壓(即正弦波的p-p值)過高或作用
原生質體是指植物細胞去掉細胞壁的裸露部分。它在培養條件下，①具有再生細胞壁，進行連續的細胞分裂并再生成完整植株的能力；②具有攝取外源大分子、細胞器，以及細菌，病毒的能力，因此是進行遺傳操作，基因轉移的好材料；③通過同種和異種植物的原生質體融合，可產生異核體，實現體細胞雜交，培育出新品種。 實驗原理
原生質體融合即植物體細胞雜交，是指將植物不同種、屬，甚至科間的原生質體通過人工方法誘導融合，然后進行離體培養，使其再生雜種植株的技術。植物細胞具有細胞壁，未脫壁的兩個細胞是很難融合的，植物細胞只有在脫去細胞壁成為原生質體后才能融合，所以植物的細胞融合也稱為原生質體融合。 根據融合時細胞的完整程
植物細胞由于液泡失水而使原生質體收縮和細胞壁分離的現象。將具有液泡的細胞置于對細胞無毒害的濃溶液（如 1mol· L-1 的蔗糖溶液）中，由于外界溶液的水勢低于細胞液的水勢，液泡中的水分向外流，液泡體積縮小，原生質體和細胞壁也隨之縮小。但由于細胞壁的伸縮性是有限的，而原生質體的伸縮性較大，因此，在
多年來，科學家們一直缺乏合適的實驗工具用于植物細胞生物力學的研究。設計用于封裝單個細胞的微流控裝置市場已經被證實在動物研究中擁有巨大的優勢，現在也在植物生物學領域顯現出巨大的潛力。來自佛蒙特大學（University of Vermont）植物生物學系的研究人員正在利用這項技術加強對生物力學的研
原生質體由原生質分化形成，具體包括細胞膜和膜內細胞質及其他具有生命活性的細胞器。植物和動物的如細胞核、線粒體和高爾基體等，而細菌如核糖體、擬核等。實驗材料酵母試劑、試劑盒YPD酵母消解緩沖液山梨醇抽提緩沖液貯存緩沖液液氮儀器、耗材搖床水浴鍋轉子離心機培養箱實驗步驟1. 將酵母菌接種于YP
通用型植物線粒體DNA萃取試劑盒產品說明書（中文版） 主要用途 通用型植物線粒體DNA萃取試劑是一種旨在通過物理或化學破膜及離心處理方法，從植物細胞或組織中分離出完整而純化的線粒體細胞器，然后進一步生物酶處理以獲得高質量的線粒體DNA的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制
植物細胞或原生質體線粒體DNA分離（物理法） 實驗開始前，將試劑盒里的凈化液（Reagent C）凍融，然后移出1毫升凈化液（Reagent C）和4毫升的裂解液（Reagent B）到15毫升錐形離心管里，混勻后，標記為裂解工作液，置入冰槽里備用。然后進行下列操作。 準備5 X 107植物細胞或原
一．實驗目的植物細胞和組織培養的技術性強，要求無菌操作，通過本實驗可初步掌握常規的組織培養技術，加深對無菌操作的了解。二．實驗原理植物的全能性：植物體的任何一個細胞都具有生長分化成為一個完整植株的能力，稱為植物的全能性。植物組織培養就是利用植物的全能性進行離體無菌植物培養的一門技術。植物組織培養按其
近日海南大學熱帶農林學院海南省熱帶生物資源可持續利用重點實驗室羅麗娟教授課題組與劉進平教授課題組合作，建立了一種成熟高效的木薯葉肉原生質體瞬時表達體系。這一研究成果公布在BMC Biotechnology雜志上。 木薯（Manihot esculenta Crantz）屬于大戟科木薯屬植物，起
生物是一切具有新陳代謝的物體。狹義的生物是指傳統意義上獨立、能自主生存的物體，包括動物、植物和微生物。生物具有遺傳和變異的特征，能夠進行生長、發育和繁殖，能適應一定環境和改變環境，能對外界的刺激做出反應。而細胞是大多數生物體結構和功能的基本單位。20世紀90年代發展起來的微流控芯片技術在細胞研究上有
植物組織培養（Plant Tissue Culture）是應用無菌培養的方法培養植物的一個離體部分，也即是一種將自然環境中分離出來的植物細胞或組織放入含有合成培養基的瓶中，在無菌條件下使之生長或發育的方法。這項工作自50年代后期至今巳取得了很大的進展，如誘導培養胡蘿卜的體細胞分化成完整植株，由曼陀羅
1、 原理 植物 細胞的質壁分離現象與其生活的原生質特別是原生質表層的性質密切相關，質壁分離可用于研究原生質的透性，粘滯性及彈性等，在細胞生理及抗性生理上有重要作用。可用質壁分離法測細胞的滲透性，也可鑒別細胞的死活，在水分生理中也及其重要，活細胞是一個滲透系統，當與外界高滲溶液接觸時，
1、 原理植物細胞的質壁分離現象與其生活的原生質特別是原生質表層的性質密切相關，質壁分離可用于研究原生質的透性，粘滯性及彈性等，在細胞生理及抗性生理上有重要作用。可用質壁分離法測細胞的滲透性，也可鑒別細胞的死活，在水分生理中也及其重要，活細胞是一個滲透系統，當與外界高滲溶液接觸時，細胞內的水外滲而發
組織培養是克隆細胞和組織的過程。迄今，植物組織培養已取得了許多卓越的成果，并被廣泛推廣和利用。通過植物組織培養，我們可以從植物體的一部分體細胞快速培育出大量和母體植物相同的植株。另一方面，植物組織培養技術也為我們快速開發和培育新品種創造了條件。一、組織培養與植物快速繁殖組織培養是一種利用人工培養基（
1. 培養基的配制注意事項 植物組織培養最常用到MS培養基，包含十幾種化合物。因為有些化合物相遇會發生化學反應產生沉淀，影響培養基的營養成分，準備MS培養基需要配制多種高倍母液。且配制母液時，尤其涉及大量元素的母液時，一定要等一種成分溶解之后，再緩慢的添加另一種成分，切記“一鍋煮”，即不能將各