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膠體金標記蛋白A技術（Protein A-gold technique, PAg法） PAg復合物制備方法簡便，作為第二抗體，無種屬特異性，可以免去不同種屬動物要制備不同的特異性免疫球蛋白。PAg 復合物與包埋劑和細胞成分都極少發生非特異性的交互作用，蛋白A和金粒間非共價的結合特性既不影響蛋白A的活性，又能保持高度的穩定性，PAg復合物分子最小易于穿透組織。PAg復合物的原液在4℃可保存達一年之久。電鏡水平的PAg染色法 PAg法在電鏡技術的應用原則是二步標記法，可用于包埋前和包埋后染色。其主要區別于一般膠體金免疫染色在：①須1%卵白蛋白－PBs （pH7.4）或1%卵白蛋白—0.05mol/l Tris緩沖液（pH7.4）來封閉非特異性的結合部位，而不是采用羊或其它的動物的正常抗血清，因為PAg復合物能夠與正常血清組中的Ig結合，從而給出假陽性結果；②在應用第一抗血清孵育和PBS沖洗后作第二抗血清即PAg復合物孵育前的準備......閱讀全文
生產企業必須能夠克服大量的技術難題才能制備出能應用于診斷領域的免疫金復合物。免疫金標記技術是一種將膠體金顆粒與包括抗原、抗體在內的許多蛋白質標記形成免疫金復合物的技術。雖然這種免疫金標記技術呈 現出多種多樣的應用方式，但目前主要應用是以快速檢測試紙盒的形 式使用于疾病的診斷和監測。1在過去的十年里，
（一） 原理 免疫膠體金技術是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種新型的免疫標記技術。膠體金是由氯金酸（HAuCl4）在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下，聚合成為特定大小的金顆粒，并由于靜電作用成為一種穩定的膠體狀態，稱為膠體金。膠體金在弱堿環境下
金標法是Faulk和Taylor(1971)提出的，并首先用于免疫電鏡。它是利用膠體金在堿性環境中帶有負電的性質，使其與抗體相吸附，從而將抗體標記。當用金標記的抗體與抗原 反應時，在光鏡水平膠金液呈現鮮艷的櫻紅色，不需加外進行染色。在電鏡水平，金顆粒具有很高的電子密度，清晰可辨。因此，免疫
(一) 原理免疫膠體金技術是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原 抗體的一種新型的免疫標記技術。膠體金是由氯金酸(HAuCl4)在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下，聚合成為特定大小的金顆粒，并由于靜電作用成為一種穩定的膠體狀態，稱為膠體金。膠體金在弱堿環境下帶負電荷，可與蛋白質分
繼三大標記技術（熒光素、放射性同位素和酶）之后，一種固相標記免疫測定技術--免疫膠體金技術（Immune colloidal gold technique, ICG）逐漸發展起來。它是以膠體金作為標記物，利用抗原抗體特異性反應，對抗原或抗體物質進行定性乃至定量研究的標記技術。近年來，該技術因其操作簡
第四節 免疫電鏡膠體金標記法 金標法是Faulk和Taylor（1971）提出的，并首先用于免疫電鏡。它是利用膠體金在堿性環境中帶有負電的性質，使其與抗體相吸附，從而將抗體標記。當用金標記的抗體與抗原反應時，在光鏡水平膠金液呈現鮮艷的櫻紅色，不需加外進行染色。在電鏡水平，金顆粒具有很高的電子密度，
原理 免疫膠體金技術是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種新型的免疫標記技術。膠體金是由氯金酸（ HAuCl4 ）在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下，聚合成為特定大小的金顆粒，并由于靜電作用成為一種穩定的膠體狀態，稱為膠體金。膠體金在弱堿
金標法是Faulk和Taylor（1971）提出的，并首先用于免疫電鏡。它是利用膠體金在堿性環境中帶有負電的性質，使其與抗體相吸附，從而將抗體標記。當用金標記的抗體與抗原反應時，在光鏡水平膠金液呈現鮮艷的櫻紅色，不需加外進行染色。在電鏡水平，金顆粒具有很高的電子密度，清晰可辨。因此，免疫電鏡膠體金標
膠體金是氯金酸在還原劑的作用下，聚合成特定大小的金顆粒，并由于靜電作用形成一種穩定的膠體狀態，故稱之為膠體金。膠體金溶液的常見制備方法大致分為白磷還原法、硼氫化鈉還原法、抗壞血酸鹽還原法、檸檬酸三鈉還原法和鞣酸檸檬酸三鈉還原法。其基本原理是向一定濃度的金溶液內加入適量還原劑，使金離子還原為金原子。通
第七章 電子顯微鏡免疫細胞化學技術第一節 電子顯微鏡免疫細胞化學技術概述免疫細胞化學技術為在細胞水平上研究免疫反應做出了貢獻，但由于光學分辨率的限制，不可能從細胞超微結構水平觀察和研究免疫反應。因此，Singer于1959年首先提出用電子密度較高的物質鐵蛋白（ferritin）標記抗體的方法，為在細
免疫細胞化學技術為在細胞水平上研究免疫反應做出了貢獻，但由于光學分辨率的限制，不可能從細胞超微結構水平觀察和研究免疫反應。因此，Singer于1959年首先提出用電子密度較高的物質鐵蛋白(ferritin)標記抗體的方法，為在細胞超微結構水平研究抗原 抗體反應提供了可能。在此基礎上，相繼發
免疫細胞化學技術為在細胞水平上研究免疫反應做出了貢獻，但由于光學分辨率的限制，不可能從細胞超微結構水平觀察和研究免疫反應。因此，Singer于1959年首先提出用電子密度較高的物質鐵蛋白（ferritin）標記抗體的方法，為在細胞超微結構水平研究抗原抗體反應提供了可能。在此基礎上，相繼發展了雜交抗體
免疫細胞化學技術為在細胞水平上研究免疫反應做出了貢獻，但由于光學分辨率的限制，不可能從細胞超微結構水平觀察和研究免疫反應。因此，Singer于1959年首先提出用電子密度較高的物質鐵蛋白（ferritin）標記抗體的方法，為在細胞超微結構水平研究抗原抗體反應提供了可能。在此基礎上，相繼發展了雜交抗體
一、免疫膠體金技術的基本知識1、膠體金的概念氯金酸(HAuCl4)在還原劑作用下，可聚合成一定大小的金顆粒，形成帶負電的疏水膠溶液。由于靜電作用而成為穩定的膠體狀態，故稱膠體金。2、免疫金標記技術膠體金顆粒表面負電荷與蛋白質的正電荷基團因靜電吸附而形成牢固結合。膠體金對蛋白質有很強的吸附功能，蛋白質
實驗原理 冷凍蝕刻法(Freeze Ftching)，也稱冷凍復型法(Freeze Replica)或冷凍切斷(Freeze Fracture)，是研究生物膜結構的重要方法之一。其主要步驟首先是將樣品在液氮中冷凍，然后放到真空噴鍍儀中切斷，切斷后的切面上有細胞器，其間還有凍成洋的水分。再加
實驗概要本文介紹了冷凍蝕刻免疫電鏡技術，包括：冷凍蝕刻表面標記免疫電鏡技術和斷裂—標記免疫電鏡技術。實驗原理冷凍蝕刻法(Freeze Ftching)，也稱冷凍復型法(Freeze Replica)或冷凍切斷(Freeze Fracture)，是研究生物膜結構的重要方法之一。其主要步驟首先是
1、定義用標記的特異性抗體對組織切片或細胞標本中某些化學成分的分布和含量進行組織和細胞原位定性、定位或定量研究，這種技術稱為免疫組織化學（immunohistochemistry）技術或免疫細胞化學（immunocytochemistry）技術。2、原理根據抗原抗體反應和化學顯色原理，組織切片或細胞
根據生物技術實驗總結我們知道，免疫組化技術就是用標記的特異性抗體對組織切片或細胞標本中某些化學成分的分布和含量進行組織和細胞原位定性、定位或定量研究，其又稱之為免疫細胞化學技術。下面簡單介紹幾種常用的免疫組化技術方法，希望能夠加深大家對免疫組化技術的了解。目前常用的幾種免疫組化技術www.biovo
根據生物技術實驗總結我們知道，免疫組化技術就是用標記的特異性抗體對組織切片或細胞標本中某些化學成分的分布和含量進行組織和細胞原位定性、定位或定量研究，其又稱之為免疫細胞化學技術。下面簡單介紹幾種常用的免疫組化技術方法，希望能夠加深大家對免疫組化技術的了解。 目前常用的幾種免疫組化技術w
一、免疫組化技術的基本原理應用免疫學及組織化學原理，對組織切片或細胞標本中的某些化學成分進行原位的定性、定位或定量研究，這種技術稱為免疫組織化學技術或免疫細胞化學技術。眾所周知，抗體與抗原之間的結合具有高度的特異性。免疫組化正是利用這一特性，即先將組織或細胞中的某些化學物質提取出來，以其作為抗原或半
免疫組化技術實驗原理： 抗原抗體反應，即抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內抗原（多肽和蛋白質），對其進行定位、定性及定量的研究。 眾所周知，抗體與抗原之間的結合具有高度的特異性。免疫組化正是利用這一特性，即先將
免疫組化技術實驗原理： 抗原抗體反應，即抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內抗原（多肽和蛋白質），對其進行定位、定性及定量的研究。眾所周知，抗體與抗原之間的結合具有高度的特異性。免疫組化正是利用這一特性，即先將組織或細胞中的某
雌二醇(17β-Estradiol)是天然雌激素的重要成分，為防止兒童性早熟等問題，食品中尤其是畜禽產品的雌二醇檢測不容忽視。膠體金免疫層析技術(GICA)在檢測小分子有機物方面越來越受到重視。其基本原理是膠體金顆粒能夠穩定吸附蛋白質，而蛋白質的生物活性無明顯變化，所以它可以取代酶標記抗體〔1，2〕
目前幾種常用免疫組化方法簡單介紹1）免疫熒光方法是最早建立的免疫組織化學技術。它利用抗原抗體特異性結合的原理，先將已知抗體標上熒光素，以此作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原，在熒光顯微鏡下觀察。當抗原抗體復合物中的熒光素受激發光的照射后即會發出一定波長的熒光，從而可確定組織中某種抗原的定位，進而還可
一、免疫組化技術的基本原理應用免疫學及組織化學原理，對組織切片或細胞標本中的某些化學成分進行原位的定性、定位或定量研究，這種技術稱為免疫組織化學技術或免疫細胞化學技術。眾所周知，抗體與抗原之間的結合具有高度的特異性。免疫組化正是利用這一特性，即先將組織或細胞中的某些化學物質提取出來，以其作為抗原或半
隨著經濟的發展、社會的進步和人口整體素質的提高，新的技術、新的理念和新的思維引入醫學檢驗領域，使醫學檢驗技術呈現兩大發展趨勢。一方面是在疾病診斷治療及維護人體健康過程中(特別是健康信息檔案的建立)需要掌握的個人健康信息量越來越大，使臨床檢驗向高分析速度，高自動化程度，高智能化水平，高信息
摘 要： 目的 建立一種快速、簡易的檢測血清中抗幽門螺桿菌(Hp)細胞毒素相關蛋白A(CagA)抗體的膠體金免疫層析法(GICA)。 方法 采用檸檬酸三鈉還原法制備膠體金顆粒，標記葡萄球菌A蛋白(SPA)，將重組 的CagA抗原劃線固定于硝酸纖維素膜上，制成免疫層析檢測試條。 血清中IgG
雌二醇(17β-Estradiol)是天然雌激素的重要成分，為防止兒童性早熟等問題，食品中尤其是畜禽產品的雌二醇檢測不容忽視。膠體金免疫層析技術(GICA)在檢測小分子有機物方面越來越受到重視。其基本原理是膠體金顆粒能夠穩定吸附蛋白質，而蛋白質的生物活性無明顯變化，所以它可以取代酶標記抗體〔1，2〕
)超薄切片法步驟:①至⑤同臨界點干燥法。⑥1%鋨酸，室溫固定2h，系列酒精或丙酮脫水，常規電鏡包埋。⑦切半薄片，光鏡定位合適的斷裂部位，再切超薄切片，鈾鉛染色，透射電鏡觀察。斷裂標記法目前文獻報告應用較多的是植物凝集素-膠體金免疫標記技術，常用的如刀豆球蛋白(Con A)-- 膠體金免疫標記技術.C
（4）膠體金與蛋白A的結合和純化，依上法測得所需的比例超過10%，即每30ml膠體中加入2mg蛋白A，5min后，加入0.3ml PEG作為穩定劑，然后以15000r/min離心45min（不同方法制備的金離心速度不同），略帶紅色的松散的復合物沉淀即為PAg復合物。小心棄去上清液，加入PBS沖洗