內切酶列表：
Single letter code:R = G or A; Y = C or T; W = A or T; M = A or C; K = G or T; S = C or G;H = A, C or T;V = A, C or G;B = C, G or T;D = A, G or T;N = G, A, T or C. RecognitionsequenceEnzyme^(10/15)AC(N)4GTAYC(12/7)^BaeI^(10/12)CGA(N)6TGC(12/10)^BcgI^(7/12)GAAC(N)5CTC(13/8)^PpiI^(7/12)GAAC(N)6CAC(12/7)^PsrI^(7/12-13)GAAC(N)6TCC(12-13/7)^AloI^(8/13)GAG(N)5CTC(13/8)^BplI^(8/13)GAG(N)5GTTC(1......閱讀全文
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Single letter code:R = G or A;?Y = C or T;?W = A or T;?M = A or C;?K = G or T;?S = C or G;H = A, C or T;V = A, C or G;B = C, G or T;D = A, G or T;N =
內切酶列表：Enzymes－Generating－Blunt－Ends
Asymmetric sequences are indicated by *.Single letter code:R = G or A;?Y = C or T;?W = A or T;?M = A or C;?K = G or T;?S = C or G;H = A, C or T;V = A,
內切酶列表：Enzymes－Generating－Blunt－Ends
Asymmetric sequences are indicated by *.Single letter code:R = G or A;?Y = C or T;?W = A or T;?M = A or C;?K = G or T;?S = C or G;H = A, C or T;V = A,
內切酶列表：Enzymes－Generating－3protruding－Ends
Asymmetric sequences are indicated by *.Single letter code:R = G or A;?Y = C or T;?W = A or T;?M = A or C;?K = G or T;?S = C or G;H = A, C or T;V = A,
內切酶列表：Enzymes－Generating－5protruding－Ends
Asymmetric sequences are indicated by *.Single letter code:R = G or A;?Y = C or T;?W = A or T;?M = A or C;?K = G or T;?S = C or G;H = A, C or T;V = A,
內切酶星號活性
在非理想的條件下，內切酶切割與識別位點相似但不完全相同的序列，這一現象稱星號活性。有人提出，這種"星號"活性可能是內切酶的一種普遍特性（1），如果提供給相應反應條件，所有內切酶都會出現非特異性切割。NEB已證實下列酶存在星號活性：Apo I（2）、Ase I（2）、BamH I（3）、BssH II
什么是內切酶？
內切酶incisionenzyme是一種能催化多核苷酸的鏈斷裂的酶，只對脫氧核糖核酸內一定堿基序列中某一定位置發生作用，把這位置的鏈切開。通過內切酶可以把某一個遺傳基因切下來，若再連在別的細胞的遺傳基因上，便可使這細胞具有新的遺傳特性。內切酶的發現和采用，使基因工程成為可能。一種限制酶只能識別一
切刻內切酶（NEAR）恒溫擴增
切刻內切酶（NEAR）恒溫擴增是目前相關研究最少的一種恒溫核酸擴增技術。它是在2008年由Ionian科技公司的研究人員開發并申請ZL的（Brain等2009）。除了鏈置換酶（Bst）外，NEAR反應中還需添加一個切刻內切酶。NEAR反應的引物設計需要將所使用的切刻內切酶的DNA作為序列加在引物
核酸內切酶的簡介
30多年前，當人們在對噬菌體（細菌病毒）的宿主特異性的限制-修飾現象進行研究時，首次發現了限制性內切酶。細菌可以抵御新病毒的入侵，而這種"限制"病毒生存的辦法則可歸功于細胞內部可摧毀外源DNA的限制性內切酶。首批被發現的限制性內切酶包括來源于大腸桿菌的EcoR I和EcoR II，以及來源于He
DNA的限制性內切酶酶切反應
[實驗目的] 通過本實驗學習DNA的限制性內切酶酶切反應的基本原理與實驗技術。 [實驗原理] 1.限制性內切酶能特異地結合于一段被稱為限制性酶識別序列的DNA 序列之內或其附近的特異位點上,并切割雙鏈DNA。它可分為三類:Ⅰ類和Ⅲ類酶在同一蛋白質分子中兼有切割和修飾(甲基化)作
限制性內切酶酶切反應實驗原理
限制性內切酶已有百余種，每種酶有其特定的核苷酸序列識別特異性，酶的活性需Mg2+來激活。不同的酶也有許多差別：有些酶除需Mg2+外，還需ATP等其他輔助因子的激活；切割位點和識別序列間的距離不同；某些內切酶同時具有甲基化作用。根據這些差別，可將限制性內切酶分為Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型。Ⅱ型限制性內切酶只需要
DNA的限制性內切酶酶切反應實驗
[實驗目的]通過本實驗學習DNA的限制性內切酶酶切反應的基本原理與實驗技術。[實驗原理]1.限制性內切酶能特異地結合于一段被稱為限制性酶識別序列的DNA 序列之內或其附近的特異位點上,并切割雙鏈DNA。它可分為三類:Ⅰ類和Ⅲ類酶在同一蛋白質分子中兼有切割和修飾(甲基化)作用且依賴于ATP 的
DNA的限制性內切酶酶切反應技術
限制性核酸內切酶(restriction endonuclease)是指識別并切割特異的雙鏈DNA序列的一種內切核酸酶。本實驗是掌握DNA的限制性內切酶的酶切技術。DNA的限制性內切酶酶切反應技術[實驗原理]1. 限制性內切酶能特異地結合于一段被稱為限制性酶識別序列的DNA 序列之內或其附近的特異位
關于內切酶的相關介紹
內切酶，即限制性核酸內切酶。亦稱限制性核酸酶。它是一種能催化多核苷酸的鏈斷裂的酶，只對脫氧核糖核酸內一定堿基序列中某一定位置發生作用，把這位置的鏈切開。通過內切酶可以把某一個遺傳基因切下來，若再連在別的細胞的遺傳基因上，便可使這細胞具有新的遺傳特性。內切酶的發現和采用，使基因工程成為可能。
關于內切酶的分類介紹
第一類內切酶能識別專一的核苷酸順序，并在識別點附近的一些核苷酸上切割DNA分子中的雙鏈，但是切割的核苷酸順序沒有專一性，是隨機的。這類限制性內切酶在DNA重組技術或基因工程中沒有多大用處，無法用于分析DNA結構或克隆基因。這類酶如EcoB、EcoK等。第二類內切酶能識別專一的核苷酸順序，并在該順
用核酸內切酶構建亞克隆
實驗概要所謂亞克隆就是對已經獲得的目的DNA片段進行重新克隆，其目的在于對目的DNA進行進一步分析，或者進行重組改造等。亞克隆的基本過程包括：(1)目的DNA片段和載體的制備；(2)目的DNA片段和載體的連接；(3)連接產物的轉化；(4)重組子篩選。主要試劑1．LB液體培養基：胰化蛋白胨（細菌培養用
內切酶的稀釋兼容性
稀釋限制性內切酶時，建議使用稀釋緩沖液（A，B，C）。建議臨用前稀釋且稀釋終濃度不要小于1,000 units/ml。目錄及說明書中標注了每一種內切酶相應的稀釋兼容性。注：以下稀釋液不適用于耐熱DNA聚合酶。欲了解稀釋耐熱DNA聚合酶的相關情況，請參見相應章節。稀釋緩沖液成份：稀釋液A： 50 mM
核酸內切酶的影響及因素
限制性酶切反應速度與底物的性質有很大的關系，底物的單雙鏈結構、分子的構型、DNA鏈中酶識別位點的數目以及位點附近的序列等都影響著酶的催化反應。共價閉合環(超螺旋構型)DNA比其相應的線性分子的酶解作用要慢，要使超螺旋構型DNA徹底降解，需要的酶量就大。對于DNA-RNA雜合雙鏈的酶切作用，Mol
關于核酸內切酶的相關介紹
核酸內切酶催化水解多核苷酸內部的磷酸二酯鍵。有些核酸內切酶僅水解5′磷酸二酯鍵，把磷酸基團留在3′位置上，稱為5′-內切酶；而有些僅水解3′-磷酸二酯鍵，把磷酸基團留在5′位置上，稱為3′-內切酶。還有一些核酸內切酶對磷酸酯鍵一側的堿基有專一要求，例如胰臟核糖核酸酶（RNaseA）即是一種高度專
限制性內切酶簡介
限制性內切酶（restriction endonuclease）全稱限制性核酸內切酶，是一種能將雙股DNA切開的酶。切割方法是將糖類分子與磷酸之間的鍵結切斷，進而于兩條DNA鏈上各產生一個切口，且不破壞核苷酸與堿基。限制酶在分子生物學與遺傳工程領域有廣泛的應用。
內切酶PCR反應中的活性
酶切反應條件如下：在20 μl PCR產物混合體系中加入5U的內切酶，按相應的反應溫度溫育1小時。通常20 μl PCR產物體系中含有1 μg底物DNA，1單位的Vent DNA聚合酶，1× ThermoPol Buffer [10 mM KCl， 20 mM Tris-HCl （PH 8.8@25
關于核酸內切酶的基本介紹
核酸內切酶催化水解多核苷酸內部的磷酸二酯鍵。有些核酸內切酶僅水解5′磷酸二酯鍵，把磷酸基團留在3′位置上，稱為5′-內切酶；而有些僅水解3′-磷酸二酯鍵，把磷酸基團留在5′位置上，稱為3′-內切酶。還有一些核酸內切酶對磷酸酯鍵一側的堿基有專一要求，例如胰臟核糖核酸酶（RNaseA）即是一種高度專
內切酶的熱失活參數
?熱失活是終止酶切反應的一種簡便易行的方法。大多數最適反應溫度是37℃的酶在65℃下溫育20分鐘即可失活。一些在65℃下不能失活的酶如將溫度升高至80℃，溫育20分鐘也可失活。下表注明了每種酶的失活條件。在50μl的反應體系中，37℃條件下，以0.5μg小牛胸腺DNA作為底物，加入5-10μl內切酶
DNA的限制性內切酶酶切(restriction－endonuclease，RE)分析
【原理】限制性內切酶(restrictionendonuclease，RE)是由細菌自己產生的能識別雙鏈DNA分子中的特定堿基順序，并以內切方式水解核酸中的磷酸二酯鍵的核酸水解酶。它可分為三種類型：Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型，Ⅱ型酶就是通常所指的RE，能識別雙鏈DNA的特異順序，并在這個順序內進行切割。它是基因工
限制性內切酶添加保護堿基數目及酶切效率
限制性核酸內切酶產品選擇專題&NBS p;?限制性內切酶?保護堿基A-B&NBS p;酶切效率:&NBS p;- 0%&NBS p;- 0-20%- 20-50%- 50-100%*- 反應時間為16小時酶保護堿基數目12345AarI20-5050-100AasI50-100AatII00-202
質粒DNA的限制性內切酶（restriction－endonuclease,－RE）酶切及..
實驗原理： 限制性內切酶（restriction endonuclease, RE）能特異地結合于一段被稱為限制性酶識別序列的DNA序列之內或其附近的特異位點上，并切割雙鏈DNA。限制性內切酶可分為三類：I、Ⅱ和III類。I類和III類酶在同一蛋白質分子中兼有修飾（甲基
DNA限制性內切酶酶切分析
一、原理限制性內切酶和基因載體是DNA重組技術中的兩個極其重要的方面。限制性內切酶是首先在大腸桿菌中發現的能夠分解外來DNA的核酸酶。與核酸外切酶相比，該酶可從DNA雙鏈內部特異的核苷酸序列處將DNA雙鏈切斷，產生帶有粘性或平頭末端的DNA片段。把要克隆的外來DNA和載體DNA用同一種限制性內切酶切
內切酶在反應中的存活性
長時間反應時內切酶的活性保持情況因酶而異。本表中列出了在16小時內完全酶解底物DNA所需的最小酶量。實驗方法：在50μl的反應體系中，分別加入1μg的單位定義底物DNA和1.00、0.50、0.25和0.13個單位的內切酶，37°C（或要求的最適溫度）反應16小時。用瓊脂糖凝膠電泳法來確定在16小時
限制性核酸內切酶的定義
用來識別特定的脫氧核苷酸序列，并對每條鏈中特定部位的兩個脫氧核糖核苷酸之間的磷酸二酯鍵進行切割的一類酶
內切酶用于克隆PCR的相關介紹
克隆PCR產物的方法之一，是在PCR產物兩端設計一定的限制酶切位點，經酶切后克隆至用相同酶切的載體中。但實驗證明，大多數限制酶對裸露的酶切位點不能切斷。必須在酶切位點旁邊加上一個至幾個保護堿基，才能使所定的限制酶對其識別位點進行有效切斷。酶切位點（內切酶的識別序列）要加在引物的5'端，為