實驗概要免疫多聚酶鏈反應(PCR)是一種抗原檢測系統,將一段已知序列的DNA片段標記到抗原抗體復合物上,再用PCR方法將這段DNA擴增,然后用常規方法檢測PCR產物。由于PCR具有強大的擴增能力,因而比常規的免疫學檢測法,如ELISA和放射免疫測定(RIA)的敏感性提高好幾個數量級。實驗原理免疫PCR的原理與ELISA和RIA等常規免疫學檢測方法基本相同,只不過是用DNA片段代替了酶或放射性核素作為標記物。通常需要一個對抗體和DNA具有雙親和力的連接物,將DNA與抗體偶聯在一起。抗體與抗原結合后,用該DNA片段特異的一對引物做PCR,分析擴增產物。特異性PCR產物的存在表明有該DNA片段標記的抗體所針對的特異性抗原存在。將DNA標記到抗體分子上的方法有多種,一種是通過鏈親和素(streptavidin)蛋白A(protein A)的融合蛋白,它具有兩種獨立的結合功能,鏈親和素結合生物素(biotin),蛋白A結合免疫球蛋白G......閱讀全文
郝繁運 綜述 中國誤診學雜志 2007年 第一期 第五次全國中青年檢驗醫學學術會議論文匯編 摘要:本文主要介紹了酶免疫分析的發展現狀,從酶免疫分析標記技術若干環節的技術進步、在方法學上與現代化技術的融合與發展、酶免疫分析技
PCR技術自1985年建立以來,發展之迅速、應用之廣泛,表明其具有強大的生命力.近些年來,基于PCR的基本原理,許多學者充分發揮創造性思維,對PCR技術進行研究和改進,使PCR技術得到了進上步地完善,并在此基礎上派生出了許多新的用途. 原位PCR技術 原位PCR就是在組織
PCR技術自1985年建立以來,發展之迅速、應用之廣泛,表明其具有強大的生命力.近些年來,基于PCR的基本原理,許多學者充分發揮創造性思維,對PCR技術進行研究和改進,使PCR技術得到了進上步地完善,并在此基礎上派生出了許多新的用途. 原位PCR技術 原位PCR就是在組織細胞里進行PCR
免疫酶細胞化學免疫酶細胞化學是免疫細胞化學(Immunocytochemistry,ICC)中最常用的方法之一,它是在抗原抗體特異反應存在的前提條件下,借助于酶細胞化學的手段,檢測某種物質(抗原/抗體)在組織細胞內存在部位的一門新技術:即預先將抗體與酶連結,再使其與組織內特異抗原反應,經細胞化學染色
2019年,曹雪濤團隊在Science,Nature Immunology,PNAS 等雜志上發表了13篇重要研究成果,在免疫學領域取得重大進展,iNature系統盤點一下曹雪濤團隊的研究成果: 【1】干擾素-γ(IFN-γ)對于細胞內細菌固有的免疫反應至關重要。 非編碼RNA和RNA結合蛋白
隨著現代科學技術的不斷發展,特別是免疫學、生物化學、分子生物學的不斷發展,新的細菌診斷技術和方法已廣泛用于食品微生物的鑒別。傳統的細菌分離、培養及生化反應,已遠遠不能滿足對各種病原微生物的診斷以及流行病學的研究。近年來國內外學者不斷努力,已創建不少快速、簡便、特異、敏感、低耗且適用的細菌學診斷方法
艾滋病(AIDS)又稱獲得性免疫缺陷綜合征,是由人類免疫缺陷病毒(HIV)感染所引起的一種免疫缺陷性疾病。HIV感染的診斷是艾滋病預防控制 工作的重要組成部分,建立敏感實用的檢測方法對于監測、診斷或血液篩查,控制艾滋病的流行顯得尤為重要。以下本文就HIV的檢測技術現狀及進展做一綜述。1
隨著現代科學技術的不斷發展,特別是免疫學、生物化學、分子生物學的不斷發展,新的細菌診斷技術和方法已廣泛用于食品微生物的鑒別。傳統的細菌分離、培養及生化反應,已遠遠不能滿足對各種病原微生物的診斷以及流行病學的研究。近年來國內外學者不斷努力,已創建不少快速、簡便、特異、敏感、低耗且適用的細菌學診斷方法,
植物病毒病是農業生產上一種重要病害,嚴重影響農作物的產量和質量, 目前還沒有1種治療效果較理想的藥劑,對發病植株做到早期診斷及提前檢測就顯得尤為重要。植物病毒學歷經近百年的發展,植物病毒的檢測方法與手段也在不斷發展與改進。常用的方法有侵染力測定法、血清學方法、電子顯微鏡計數和分子生物學法等。1.1侵
快速檢測技術廣泛用于食品安全快速檢測,臨床檢驗、檢驗檢疫、毒品檢驗等公共領域。食品安全快速檢測是指對食品利用便攜式分析儀器及配套試劑快速得到檢測結果的一種檢測方式。 1、食品安全問題主要有害污染物 (1)農藥,化肥:有機磷,有機氯,硝酸鹽 
免疫細胞化學的發展對許多領域的研究起到很大的推動作用,在神經科學的研究中尤為突出。本章 僅就免疫細胞化學在神經科學的基礎研究方面的應用做一簡要介紹。 一、確定神經遞質的性質、定性和分布 早期的神經科學工作者應用傳統的神經解剖學研究方法如甲基藍染色法、鍍銀染色法等對中樞及外周神經系統的結構做了大量
摘要:本文分析了食品檢驗的重要性及操作基礎,闡述了微生物檢測技術的特點與基本的檢測技術,以及微生物的快速檢測技術,并探討了食源性病原菌免疫學檢測技術、核酸探針技術、多聚酶鏈反應技術、生物芯片技術進而生物傳感器等檢測技術在食品檢驗中的應用,以期為提高食品檢驗質量,保障食品安全性提供參考價值。&nb
前兩天寫了一篇博客,講國內單位比較喜歡批量購買最先進的測序儀的事。文章提到生物技術和IT一樣,都有軟硬兩個方面,而對我們搞生物技術的來說,軟的就是各種酶了: 做分子診斷,創新可以分成兩類:應用創新(applications)靠的是人家研制出最新的儀器;原始創新則靠自己擺弄不同的酶反應了。而一個
腺病毒的一般特性 腺病毒的形態是特征性的二十面體病毒殼體(Stewart et al., 1993)。其病毒殼體含有三種主要的蛋白:六鄰體(II),五鄰體基底(III)和纖突(IV),還有多種其他的輔助蛋白VI,VIII,IX,IIIa和Iva2(Fig. 1)。
檢測自身免疫抗體的蛋白質芯片技術 自身免疫性疾病是由異常免疫反應引起的慢性退行性或炎癥性疾病。不同的自身免疫性疾病對機體的影響各有不同。例如,在多發性硬化癥中,自身免疫反應的侵害對象是中樞神經系統,而在克羅恩病中則是腸道。此外,同種疾病對不同個體的組織和器官的影響程度不盡相同。 此類
核酸分子雜交技術由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性,它已成為分子生物學中最常用的基本技術,被廣泛應用于基因克隆的篩選,酶切圖譜的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下(適宜的溫室度及離子強度等)可按堿基互補原成雙鏈。雜交的
了解生化分析儀基本參數的原理,有利于儀器、試劑的正確使用,有助于正確分析和處理測定數據。但是,配套系統的原裝分析參數不宜更改;采用非儀器配套的試劑及校準品體系時,參數修改要慎重,對于不同儀器、不同類型的反應分析程序,所顯示的人機對話分析參數信息有所不同。 一、反應監測時間 對于終點法
隨著現代科學技術的不斷發展,特別是免疫學、生物化學、分子生物學的不斷發展,新的細菌診斷技術和方法已廣泛用于食品微生物的鑒別。傳統的細菌分離、培養及生化反應,已遠遠不能滿足對各種病原微生物的診斷以及流行病學的研究。近年來國內外學者不斷努力,已創建不少快速、簡便、特異、敏感、低耗且適用的細菌學診斷方
實驗原理: 抗體和抗原之間的結合具有高度的特異性,免疫組織化學正是利用了這一原理。先將組織或細胞中的某種化學物質提取出來,以此作為抗原或半抗原,通過免疫動物后獲得特異性的抗體,再以此抗體去探測組織或細胞中的同類的抗原物質。由于抗原與抗體的復合物是無色的,因此還必須借助于組織化學的方法將抗原
隨著現代科學技術的不斷發展,特別是免疫學、生物化學、分子生物學的不斷發展,新的細菌診斷技術和方法已廣泛用于食品微生物的鑒別。傳統的細菌分離、培養及生化反應,已遠遠不能滿足對各種病原微生物的診斷以及流行病學的研究。近年來國內外學者不斷努力,已創建不少快速、簡便、特
一、前言ELISA在生物藥物研發的各個環節均有廣泛的應用:如以生物大分子檢測為目的,在藥效藥代評估時,對動物實驗和臨床實驗中的血液樣品的藥物濃度和生物大分子標志物進行定量檢測;以親和力測定為目的,在質量分析過程中,對抗體相對于靶點抗原的親和力檢測;以親和力篩選為目的,在抗體發現過程中,對雜交瘤細胞克
原位雜交技術應用于染色體、細胞和組織切片等樣品中進行核酸特異性檢測,與免疫組化技術的結合應用,能將DNA、mRNA和蛋白水平上的基因活性與樣品的顯微拓撲信息結合起來。1969年Pardue和Gall將放射性標記的探針直接應用于純化核酸的雜交,此后得益于分子克隆技術的發展,及不同探針標記系統和檢測系統
原位雜交技術應用于染色體、細胞和組織切片等樣品中進行核酸特異性檢測,與免疫組化技術的結合應用,能將DNA、mRNA和蛋白水平上的基因活性與樣品的顯微拓撲信息結合起來。1969年Pardue和Gall將放射性標記的探針直接應用于純化核酸的雜交,此后得益于分子克隆技術的發展,及不同探針標記系統和檢測系統
根據乙型腦炎明顯的季節性和地區性及其臨床特征,例如高熱和狂暴或 沉郁等神 經癥狀,流行期中不難作出診斷。但是必須與其它的病毒性、細菌性和中毒性腦炎相鑒別。 由于母豬可能發生流產,公豬可能發生睪丸炎,還需注意與布氏桿菌病、細小病毒病以及生 殖和呼吸道綜合癥等鑒別。為了確診,必須進行病毒分離
石蠟包埋組織的DNA提取蠟包埋組織DNA提取的基本方法影響DNA提取質量的因素提高DNA提取質量的方法 近10年來,現代分子生物學技術越來越廣泛地被用于人類疾病研究的諸領域,為了解病理狀態下基因組DNA的變化積累了新資料。目前認為,人類基因組并非人們想像的那樣穩定,諸如基因重排、擴增、缺失,突瘺和
近10年來,現代分子生物學技術越來越廣泛地被用于人類疾病研究的諸領域,為了解病理狀態下基因組DNA的變化積累了新資料。目前認為,人類基因組并非人們想像的那樣穩定,諸如基因重排、擴增、缺失,突瘺和DNA甲基化類型改變等時有發生,這些改變對于基因表過和調控,以及疾病過程的發展與轉歸等方面均具有重要意義。
近10年來,現代分子生物學技術越來越廣泛地被用于人類疾病研究的諸領域,為了解病理狀態下基因組DNA的變化積累了新資料。目前認為,人類基因組并非人們想像的那樣穩定,諸如基因重排、擴增、缺失,突瘺和DNA甲基化類型改變等時有發生,這些改變對于基因表過和調控,以及疾病過程的發展與轉歸等方面均具有重要意義。
一、石蠟包埋組織DNA提取的基本方法從石蠟包埋組織中提取DNA的基本步驟,是在常規DNA提取方法的基礎上改良和演變而業。Goelz等(1985)最先提出的石蠟包埋組織DNA提取技術,是用機械的方法破碎組織,切除多余的石蠟,進入含SDS和高濃度蛋白酶K(1mg/ml)的提取緩沖液加溫孵育,然后進行苯酚
近10年來,現代分子生物學技術越來越廣泛地被用于人類疾病研究的諸領域,為了解病理狀態下基因組DNA的變化積累了新資料。目前認為,人類基因組并非人們想像的那樣穩定,諸如基因重排、擴增、缺失,突瘺和DNA甲基化類型改變等時有發生,這些改變對于基因表過和調控,以及疾病過程的發展與轉歸等方面均具有重要意義
不管是制備單抗還是多抗,抗原的設計與制備都是一個非常重要的問題,設計或者制備得不好的抗原有可能完全不能免疫出抗體來。一個良好的抗原必須具體的條件:(1)分子足夠大。對于多肽或蛋白質類的抗原來說,一個抗原決定簇(又叫表位,epitope),通常由6-8個氨基酸殘基組成。而平均每5-10kD才有一個表位