PCR技術應用進展
PCR技術自1985年建立以來,發展之迅速、應用之廣泛,表明其具有強大的生命力.近些年來,基于PCR的基本原理,許多學者充分發揮創造性思維,對PCR技術進行研究和改進,使PCR技術得到了進上步地完善,并在此基礎上派生出了許多新的用途. 原位PCR技術 原位PCR就是在組織細胞里進行PCR反應,它結合了具有細胞定位能力的原位雜交和高度特異敏感的PCR技術的優點,是細胞學科研與臨床診斷領域里的一項有較大潛力的新技術. 原位PCR是Hasse等于1990年建立的,實驗用的標本是新鮮組織、石蠟包埋組織、脫落細胞、血細胞等.其基本方法為①固定組織或細胞:將組織細胞固定于預先用四氟乙烯包被的玻片上,并用多聚甲醛處理,再滅活除去細胞內源性過氧化物酶.②蛋白酶K消化處理:用60ug/ml的蛋白酶K將固定好的組織細胞片55℃消化處理2h后,96℃2min以滅活蛋白酶K.③PCR擴增:在組織細胞片上,加PCR反應液,覆......閱讀全文
PCR技術(六):PCR技術應用進展
PCR技術自1985年建立以來,發展之迅速、應用之廣泛,表明其具有強大的生命力.近些年來,基于PCR的基本原理,許多學者充分發揮創造性思維,對PCR技術進行研究和改進,使PCR技術得到了進上步地完善,并在此基礎上派生出了許多新的用途.?原位PCR技術 原位PCR就是在組織細胞里進行PCR反應,它結
PCR技術應用進展
? PCR技術自1985年建立以來,發展之迅速、應用之廣泛,表明其具有強大的生命力.近些年來,基于PCR的基本原理,許多學者充分發揮創造性思維,對PCR技術進行研究和改進,使PCR技術得到了進上步地完善,并在此基礎上派生出了許多新的用途.?原位PCR技術 原位PCR就是在組織細胞里進行PCR反應
PCR技術-PCR技術的應用
一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶鏈式反應具有的特色之一。
PCR技術-PCR技術的應用
一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill?Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase?chain?reaction)--聚合酶鏈式反應具有的特色之一。這也
PCR技術-PCR技術的應用
一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶鏈式反應具有的特色之一。
免疫PCR技術進展
摘要免疫-PCR技術結合了抗原抗體反應的特異性和PCR的高敏感性,是一種極為敏感的抗原檢測技術,并適合于各種微量抗原的檢測。 熒光標記、酶標記和放射性同位素標記這三大抗體標記技術是目前免疫化學、免疫學以及分子生物學中應用最廣的常規抗原檢測手段,具有很高的靈敏度。但在早期癌抗原及某些神經肽等極微
PCR技術及其在臨床診斷應用中的進展
一、病原體的定性及定量檢測,PCR及其相關技術適用于病毒,細菌、寄生蟲等所有病原體的檢測,以下就SDA首批的四種病原體基因診斷項目加以說明。1. PCR技術在結核菌檢測中的應用及意義結核菌基因診斷的意義主要表現在:a. 區分TB與其它分枝桿菌;b. 檢測TB耐藥基因;c . 提高TB的陽性檢出率。2
數字PCR技術進展簡介
聚合酶鏈式反應 ( polymerase chain reaction,PCR) 提出至今已有20年時間,期間PCR已發展成為分子生物學領域的一項關鍵技術和常規技術,極大地推動了生命科學各個領域的發展。特別是 90 年代后期,美國 ABI 公司推出的實時熒光定量PCR( real time PCR,
PCR技術的應用
PCR技術的應用1、生命科學a、人類基因組計劃 隨著的PCR日臻完善,科學家于2003年在完成的人類基因組“工作框架圖”的基礎上,經過整理、分類和排列后得到的更加準確、清晰、完整的基因組圖譜。這是對人類基因組基本面貌的首次揭示,表明科學家們開始部分“讀”出人類生命“天書”所蘊涵的內容。b、后基因組計
PCR測序技術的應用
PCR測序是對生物遺傳信息的最終判定。隨著各種基因組計劃的開展,PCR測序工作在不斷加強和完善,特別是全自動DNA測序儀的開發,為提前完成人類基因組計劃奠定了基礎。此外,在臨床遺傳病、傳染性疾病和癌癥的基因診斷、農業畜牧業的動植物育種、法醫鑒定等領域上有廣泛的應用前景。過去由于全自動DNA測序的儀器
熒光PCR/實時定量PCR技術應用簡介
一.熒光PCR原理1.熒光共振能量傳遞?(FRET)某熒光標記基團在激發光刺激下生成某波長的發射光,當另一屏蔽基團與其距離合適時,原發射光將會被屏蔽基團所吸收,并轉化為其他波長的發射光或熱能,稱之為FRET。2.熒光化學:熒光定量PCR所使用的熒光化學可分為兩種:熒光探針和熒光染料。PCR擴增時在加
PCR技術應用基因克隆的應用
運用 PCR 技術、基因克隆和亞克隆比傳統的方法具有更大的優點。由于 PCR 可以對單拷貝的基因放大上百萬倍,產生微克(μg)級的特異 DNA 片段,從而可省略從基因組 DNA 中克隆某一特定基因片段所需要的 DNA的酶切、連接到載體 DNA 上、轉化、建立 DNA 文庫及基因的篩選、鑒定、亞克隆等
pcr技術應用論文:熒光定量PCR技術在腫瘤研究中的應用
陳文學 鄒學森 陳岳青 黃秀珍 鐘禮瀑?(江西省腫瘤醫院 腫瘤研究所, 江西 南昌 330029)?[摘要] 熒光定量PCR技術具有簡便、靈敏、準確等優點,目前已經在乙肝和性病的診斷和治療中得到了廣泛的應用,但在腫瘤方面的應用還處在研究和開發階段。本文綜述近年國內外相關熒光定量PCR技術在腫瘤研究中
PCR技術應用基因工程的應用
基因融合通過 PCR 反應可以比較容易地將兩個不同的基因融合在一起。在兩個 PCR 擴增體系中,兩對引物分別有其中之一在其5'末端和3'末端引物帶上一段互補的序列。混合兩種 PCR 擴增產物,經變性和復性,兩組 PCR 產物通過互補序列發生粘連,其中一條重組雜合鏈能在 PCR 條件下
應用PCR技術擴增Hbβ基因
復習細胞內DNA復制條件和過程。 一、目的 1:學習PCR技術的基本原理 2:掌握從全血中制備DNA的方法‘ 3:掌握應用PCR擴增Hbβ基因的基本操作 4:熟悉Hb基因結構 二、原理 1:PCR擴增的原理 聚合酶鏈反應—PCR是一種體外基因擴增技術,是在引物和四種脫氧核苷三磷酸存在下,利用DNA
數字PCR技術的應用舉例
EGFR突變的肺癌治療過程中 的液體活檢檢測是一個非常具有挑戰性的工作 ,但這個基因在亞洲人群的高突變頻率使非常多的肺癌患者在接受對應靶向藥中受益(約30%)。數字PCR可以以肺癌患者的血漿中游離腫瘤DNA(CTDNA)為樣品,檢測EGFR敏感性和藥物抗性相關的突變。? ??? 運用數字PCR為精準
熒光定量PCR技術的應用
? ? 1、絕對定量分析? ? 這是熒光定量PCR技術的直接應用,可用于檢測病毒及細菌的濃度!? ??? ? 2、相對定量分析及實驗方案? ? 基因表達(gene expression)是指細胞在生命過程中,把儲存在DNA順序中遺傳信息經過轉錄和翻譯,轉變成具有生物活性的蛋白質分子. 遺傳物質DNA
PCR技術應用十:HIV感染
八十年代以來由人類免疫缺陷病毒(HIV)感染而引起的艾滋病(AIDS)因其嚴重的危害性而受到人們高度重視,力爭早期診斷和尋求有效治療是防止其廣泛傳播的關鍵所在.聚合酶鏈反應(PCR)具有敏感、特異和快速的特點,是檢測病毒、評價病情進展和探討發病機理的有效工具.一、HIV的基因結構 HIV的基因
熒光定量PCR技術及其應用(一)
熒光定量PCR(也稱TaqMan PCR,以下簡稱FQ-PCR)是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術,該技術是在常規PCR基礎上加入熒光標記探針來實現其定量功能的,與變通PCR相比,FQ-PCR具有許多優點。本文擬就該技術的特點、原理和方法以及應用作一簡
GENEπ數字PCR技術應用教程
數字 PCR( digital PCR ,dPCR ) 下一代DNA/RNA擴增技術。原理是將一個PCR 反應體系分配到大量微小的反應單元中,在每個微反應器中包含或不包含 1 個或多個拷貝的目標核酸分子 (DNA 模板) ,進行“單分子模板”PCR 擴增。擴增結束后,通過陽性反應單元( 通過
PCR技術原理、實驗步驟和應用
?一、實驗目的1.掌握聚合酶鏈式反應的原理。2. 掌握移液槍和PCR儀的基本操作技術。二、實驗原理PCR技術,即聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction,PCR)是由美國PE Cetus公司的Kary Mullis在1983年(1993年獲諾貝爾化學獎)建立的。這項技術可在試
熒光定量PCR技術及其應用(一)
熒光定量PCR(也稱TaqMan PCR,以下簡稱FQ-PCR)是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術,該技術是在常規PCR基礎上加入熒光標記探針來實現其定量功能的,與變通PCR相比,FQ-PCR具有許多優點。本文擬就該技術的特點、原理和方法以及應用作一簡
數字PCR技術的應用領域
從上世紀90年代以來qPCR技術的爆發式發展使得現代核酸檢測技術具有全新的面貌,而進入二十一世紀之后,速度更快、通量更高。成本更低的DNA測序技術正在迅速發展,也是目前競爭最為激烈的研究領域之一,即使在這種情況下,dPCR技術仍然以其高度的靈敏性和特異性在諸多科學領域爭取到屬于自己的一席之地。即使在
PCR技術應用二:-骨腫瘤診斷
骨腫瘤較罕見,惡性骨腫瘤只占全身惡性腫瘤的1%,男多于女,性別比約為1.6 ∶1,均好發于10-30歲間,良性者以骨軟骨瘤最多,依次為骨巨細胞瘤、內生軟骨瘤 等,惡性者以骨肉瘤最多,依次為軟骨肉瘤、纖維肉瘤等.骨惡性腫瘤的發生機理目 前認為是癌基因顯性作用與抗癌基因失活的結果,是多種癌基因多階段
PCR技術原理、實驗步驟和應用
一、實驗目的1.掌握聚合酶鏈式反應的原理。2. 掌握移液槍和PCR儀的基本操作技術。二、實驗原理PCR技術,即聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction,PCR)是由美國PE Cetus公司的Kary Mullis在1983年(1993年獲諾貝爾化學獎)建立的。這項技術可在試管
PCR技術原理、實驗步驟和應用
一、實驗目的1.掌握聚合酶鏈式反應的原理。2. 掌握移液槍和PCR儀的基本操作技術。二、實驗原理PCR技術,即聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction,PCR)是由美國PE Cetus公司的Kary Mullis在1983年(1993年獲諾貝爾化學獎)建立的。這項技術可在
PCR技術應用的領域有哪些
1、核酸的基礎研究:基因組克隆2、不對稱PCR制備單鏈DNA用于DNA測序3、反向PCR測定未知DNA區域4、反轉錄PCR(RT-PCR)用于檢測細胞中基因表達水平、RNA病毒量以及直接克隆特定基因的cDNA5、熒光定量PCR用于對PCR產物實時監控6、cDNA末端快速擴增技術7、檢測基因的表達8、
PCR技術應用三:突變基因檢測
基因突變(gene mutation)是遺傳病和腫瘤發生的根本原因,檢測與遺傳病及惡 性腫瘤發生有關的突變基因(mutant gene)是分子生物學,醫學遺傳學及腫瘤學研究 的熱點,它對闡明遺傳病和腫瘤發生的分子生物學基礎及其診斷和早期診斷具有重要 \意義,分子生物學技術的發展,尤其是PCR技術
實時熒光定量PCR技術的應用
1. 基因工程研究領域 ① 基因表達研究:對β地中海貧血癥患者β與γ珠蛋白mRNA水平進行檢測,其結果特異性強、定量準確,為了解β地中海貧血的分子病理機制及其臨床診斷提供了可靠的檢測數據。 ② 轉基因研究:利用兩種發光探針及適當的循環閾值,擴增一個轉移后的基因和一個對照基因,以分析轉基因
PCR技術原理、實驗步驟和應用
一、實驗目的1.掌握聚合酶鏈式反應的原理。2. 掌握移液槍和PCR儀的基本操作技術。二、實驗原理PCR技術,即聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction,PCR)是由美國PE Cetus公司的Kary Mullis在1983年(1993年獲諾貝爾化學獎)建立的。這項技術