單克隆抗體的鑒定實驗
1．雜交瘤細胞染色體的檢查采用秋水仙素裂解法進行。2．單克隆抗體的類型、亞型的測定：購買兔抗小鼠Ig類型和亞型的標準抗血清，采用瓊脂擴散法或ELISA夾心法測定單抗的Ig類型和亞型。ELISA夾心法測定單抗的Ig類型和亞型的試劑盒說明書......閱讀全文
單克隆抗體的鑒定實驗
1．雜交瘤細胞染色體的檢查采用秋水仙素裂解法進行。2．單克隆抗體的類型、亞型的測定：購買兔抗小鼠Ig類型和亞型的標準抗血清，采用瓊脂擴散法或ELISA夾心法測定單抗的Ig類型和亞型。ELISA夾心法測定單抗的Ig類型和亞型的試劑盒說明書
概述單克隆抗體的鑒定實驗
1．雜交瘤細胞染色體的檢查采用秋水仙素裂解法進行。 2．單克隆抗體的類型、亞型的測定：購買兔抗小鼠Ig類型和亞型的標準抗血清，采用瓊脂擴散法或ELISA夾心法測定單抗的Ig類型和亞型。 ELISA夾心法測定單抗的Ig類型和亞型的試劑盒說明書
單克隆抗體鑒定實驗試劑原理介紹
本試劑盒利用雙抗體夾心法鑒定小鼠淋巴細胞雜交瘤培養上清中單克隆抗體或特異親和純化的單克隆抗體的類和亞類（可區分出IgG1\IgG2a\IgG2b\IgG3\IgM\IgA）。采用小鼠抗體共有位點的二抗包被微孔板，與加入的培養上清中的小鼠抗體結合，再加入HRP標記的抗小鼠各類、亞類的抗體來分別反應
單克隆抗體的純化實驗——單克隆抗體的純化實驗
1~5 ml/min?的速度上樣于蛋白A-Sepharose柱，用Tris緩沖液洗柱子直至所有的未結合的蛋白都被洗脫，采用A280監測。?3. ?依次用2~3倍柱床體積的檸檬酸緩沖液、乙酸緩沖液液以及甘氨酸·Cl緩沖液連續洗脫結合蛋白，洗脫下的蛋白直接接入裝有中和緩沖液的管中，中和緩沖液的體積應為所
單克隆抗體技術的鑒定單抗特性
⑴ 單克隆性的確定 包括雜交瘤細胞的染色體分析、單抗免疫球蛋白重鏈和輕鏈類型的鑒定和單抗純度鑒定等。 ⑵ 單抗理化特性的鑒定。從實用意義上說，單抗對溫度和PH變化的敏感性以及單抗的親合力都是理化特性鑒定的主要項目，它們可為單抗的使用和保存提供重要依據。 ⑶ 單抗與相應抗原的反應性測定。單抗與
多羥基反應單克隆抗體的鑒定、生產和使用
所有形式的親和層析法都需要兩個組分間形成特異性相互作用，通過這種作用可以純化其中一種組分。免疫親和層析即利用抗原和抗體的特異性相互作用，是遵循親和層析原理的一個分類 [綜述見 Subramanian(2002)]。事實上，免疫親和層析是免疫沉淀程序規模放大的拓展應用，不同的部分在于, 層析后需要回收
單克隆抗體技術的方法如何鑒定單抗特性？
鑒定單抗特性⑴ 單克隆性的確定 包括雜交瘤細胞的染色體分析、單抗免疫球蛋白重鏈和輕鏈類型的鑒定和單抗純度鑒定等。⑵ 單抗理化特性的鑒定。從實用意義上說,單抗對溫度和PH變化的敏感性以及單抗的親合力都是理化特性鑒定的主要項目,它們可為單抗的使用和保存提供重要依據。⑶ 單抗與相應抗原的反應性測定。單抗與
單克隆抗體的純化實驗
實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 Tris腹水液寧酸鹽緩沖液甘氨酸乙酸鹽緩沖液儀器、耗材 超濾器濾膜實驗步驟 1. ?將蛋白A-Sepharose置于Tris緩沖液中（超過50倍的量，v/v）充分溶脹。在室溫下將其灌入直徑為2.5 cm 玻璃層析柱中，用Tris緩沖液使其平衡。2. ?腹水濃稀釋于3倍體
單克隆抗體的純化實驗
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒Tris腹水液寧酸鹽緩沖液甘氨酸乙酸鹽緩沖液儀器、耗材超濾器濾膜實驗步驟1. ?將10 ml 經CNBr活化Sepharose 4B溶脹于1 mmol/l HCl中，然后轉移至玻璃沙漏斗中，并用：①200~500 的1 mmol/l HCl和②200~500 ml 偶聯緩沖
單克隆抗體的制備實驗
單克隆抗體的制備實驗可以用于：（1）將產生抗體的單個B淋巴細胞同骨髓腫瘤細胞雜交， 獲得既能產生抗體， 又能無限增殖的雜種細胞，并以此生產抗體；（2）該技術是僅由一種類型的細胞制造出來的抗體，對應于多克隆抗體、多株抗體——由多種類型的細胞制造出來的一種抗體。實驗方法原理單克隆抗體技術(monoclo
單克隆抗體的提純實驗
1．材料(1)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl緩沖液 20mMol/LNaCl (2)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl緩沖液 40mMol/LNaCl (3)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl緩沖液 80mMol/LNaCl (4)
裸子植物鑒定實驗_松科鑒定
實驗材料蘇鐵帶球果新鮮材料、蘇鐵大抱了葉新鮮葉片（或臘葉標本）、銀杏臘葉標木（或新鮮葉片）銀杏種子縱切片油松新鮮材料（或臘葉標本）油松葉橫切片、側柏新鮮材料（或臘葉標本）試劑、試劑盒乙酸洋紅儀器、耗材顯微鏡鑷子解剖針載玻片蓋玻片滴管培養皿吸水紙實驗步驟（三）松科 Pinaeeae油松 ( 圖 2-2
單克隆抗體上清的制備實驗
實驗材料 雜交瘤試劑、試劑盒 完全培養基儀器、耗材 培養箱轉子離心機實驗步驟 1. ?將雜文瘤置于一個盛有完全DMEM-10培養基的175 cm2組織培養瓶中，置37 ℃CO2培養箱中，直至生長旺盛適于分傳。2. ?按1：10的比例將細胞分傳到一個新的175 cm2的培養瓶中，加入完全DMEM-10
概述單克隆抗體的提純實驗
1、材料(1)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl緩沖液 20mMol/LNaCl (2)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl緩沖液 40mMol/LNaCl (3)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl緩沖液 80mMol/LNaCl (4)
單克隆抗體的腹水制備實驗
實驗材料雜交瘤細胞試劑、試劑盒完全DMEM-10HEPES丙酮酸鈉PBS儀器、耗材注射針頭離心管轉子離心機實驗步驟1. ?用20G或22G的注射針，小鼠腹膜內注射降植烷，每只鼠0.5 ~ 1 ml，1周后接種細胞。?2. ?在175 cm2培養瓶中加完全DMEM-10/HEPES/丙酮酸鈉培養液，進
單克隆抗體的提純實驗過程
1．材料(1)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl緩沖液20mMol/LNaCl(2)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl緩沖液40mMol/LNaCl(3)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl緩沖液80mMol/LNaCl(4)20mMol/LpH7.8~
單克隆抗體的腹水制備實驗
實驗材料 雜交瘤細胞試劑、試劑盒 完全DMEM-10HEPES丙酮酸鈉PBS儀器、耗材 注射針頭離心管轉子離心機實驗步驟 1. ?用20G或22G的注射針，小鼠腹膜內注射降植烷，每只鼠0.5 ~ 1 ml，1周后接種細胞。?2. ?在175 cm2培養瓶中加完全DMEM-10/HEPES/丙酮酸鈉培
細菌鑒定實驗
實驗方法原理 玻片凝集反應（slide agglutirlation）是將已知的抗體直接與未知的顆粒性抗原物質（如細菌，立克次體，鉤端螺旋體等）混合，在有適當電解質存在的條件下，如兩者對應便發生特異性結合而形成肉眼可見的凝集物，即為陽性：如兩者不對應便無凝集物出現，即為陰性。此法屬定性試驗，
單克隆抗體上清制備實驗
與多克隆抗血清相比，采用單克隆抗體（MAb）的最主要的優勢就是有可能得到大量的特異性單克隆抗體可供應用。MAb 制劑通常包括雜交瘤上清、由接種了雜交瘤的小鼠制備的腹水，以及純化的 MAb。雜交瘤上清容易制備，特別是用于制備大量不同的 MAb , 但其中 MAb 的濃度則相對較低。為得到純化的制劑，可
單克隆抗體上清制備實驗
實驗方法原理 實驗材料 目的雜交瘤試劑、試劑盒 完全 DMEM-10 培養液（含 5～10 mmol／L HEPES pH 7.2～7.4）儀器、耗材 50 ml 無菌錐形離心管175 cm2 組織培養瓶實驗步驟 1. 將雜交瘤置于一個盛有完全 DMEM-10 培養基的 175 cm2 組織培養瓶中
單克隆抗體腹水制備實驗
實驗方法原理 高滴度的單克隆抗體的制備可以通過在小鼠的腹腔內接種能產生 MAb 的雜交瘤細胞，從而產生腹水來獲得。腹水可收集幾次，經熱滅活、滴定后儲存。實驗材料 裸鼠（6～8 周齡 無特定病原體／注射了鼠鼠雜交瘤細胞的同系宿主）目的雜交瘤試劑、試劑盒 完全DMEM-10培養液（含10mmol／L H
裸子植物鑒定實驗_銀杏科鑒定
實驗材料蘇鐵帶球果新鮮材料、蘇鐵大抱了葉新鮮葉片（或臘葉標本）、銀杏臘葉標木（或新鮮葉片）銀杏種子縱切片油松新鮮材料（或臘葉標本）油松葉橫切片、側柏新鮮材料（或臘葉標本）試劑、試劑盒乙酸洋紅儀器、耗材顯微鏡鑷子解剖針載玻片蓋玻片滴管培養皿吸水紙實驗步驟（二）銀杏科 Ginkgoaceae銀杏 ( 圖
裸子植物鑒定實驗_柏科鑒定
實驗材料蘇鐵帶球果新鮮材料、蘇鐵大抱了葉新鮮葉片（或臘葉標本）、銀杏臘葉標木（或新鮮葉片）銀杏種子縱切片油松新鮮材料（或臘葉標本）油松葉橫切片、側柏新鮮材料（或臘葉標本）試劑、試劑盒乙酸洋紅儀器、耗材顯微鏡鑷子解剖針載玻片蓋玻片滴管培養皿吸水紙實驗步驟柏科Cupressaeeae側柏,如圖取側柏新鮮
裸子植物鑒定實驗_蘇鐵科鑒定
實驗材料蘇鐵帶球果新鮮材料、蘇鐵大抱了葉新鮮葉片（或臘葉標本）、銀杏臘葉標木（或新鮮葉片）銀杏種子縱切片油松新鮮材料（或臘葉標本）油松葉橫切片、側柏新鮮材料（或臘葉標本）試劑、試劑盒乙酸洋紅儀器、耗材顯微鏡鑷子解剖針載玻片蓋玻片滴管培養皿吸水紙實驗步驟蘇鐵科cycadaceae蘇鐵為常綠喬木，莖短不
多羥基反應單克隆抗體的鑒定、生產和使用——用于...（二）
3.PR-mAb 的 ELISA-elution 檢測法(1) 抗原包被聚苯乙烯微孔板。通常每孔加入 50 含有 30~100ng 抗原的磷酸鹽緩沖液 (PBS，PH7.4)。室溫孵育 Ih，保證足夠的時間使抗原與聚苯乙烯結合。(2) 每孔用 200 斗含 1% 脫脂奶粉的 PBSd%BLOTTO)
多羥基反應單克隆抗體的鑒定、生產和使用——用于...（四）
說明(1) 用 Benzonase 核酸酶處理裂解液 [步驟（3)](EMD/Novagen#7 0 746，Madison,WD，有助于消化核酸和降低黏度 (見本書第 18 章）。(2)500 mmol/LNaCl 清洗 [步驟 (6)] 有助于消除核酸和 NusA, 后者為一種 RNA 聚合酶結
多羥基反應單克隆抗體的鑒定、生產和使用——用于...（一）
多羥基反應單克隆抗體的鑒定、生產和使用——用于免疫親和層析一、多羥基反應單克隆抗體我們最先使用了一類特殊的單克隆抗體, 并將其用于免疫親和層析。這些抗體可以用于溫和的免疫親和層析, 因為洗脫條件只需要聯合使用無離液鹽和低分子質量的多羥基化合物 (多元醇），此條件下蛋白質呈非變性狀態。我們把這
多羥基反應單克隆抗體的鑒定、生產和使用——用于...（三）
說明(1) 用 IntegraCL350 瓶培養雜交瘤細胞的效果很好, 每毫升細胞培養收獲上清液中，可以得到 mAb0.5~Img。通常可連續培養 1 個月左右。(2) 處理液體：將培養基在 37°C 水浴預熱。這有助于避免培養瓶中的冷凝作用以及細胞的溫度休克向細胞培養皿 (白蓋) 添加或取出液
物抗逆性的鑒定實驗
實驗方法原理當植物組織受干旱或其它不良條件如高溫、低溫等影響時，常能傷害原生質體的結構而引起透性增大，結果細胞內含物將有不同程度的外滲，使外滲液的電導度增大，用電導儀即可明顯地測定出來，透性變化愈大，表示受傷愈重、抗性愈弱。實驗步驟一、材料與設備1. 植物材料：小麥、玉米或其它作物葉片。2. 儀器與
植物抗逆性的鑒定實驗
實驗方法原理：當植物組織受干旱或其它不良條件如高溫、低溫等影響時，常能傷害原生質體的結構而引起透性增大，結果細胞內含物將有不同程度的外滲，使外滲液的電導度增大，用電導儀即可明顯地測定出來，透性變化愈大，表示受傷愈重、抗性愈弱。實驗步驟：一、材料與設備1. 植物材料：小麥、玉米或其它作物葉片。2.