使用引物延伸熒光偏振探測法的高通量基因分型實驗2
四重 PCR 的引物延伸法實驗材料目的基因組DNA試劑、試劑盒10XPCR擴增緩沖液Taq DNA 聚合酶4dNTP 混合液PCR 引物混合液AcydoTerminator混合液儀器、耗材384孔透明 PCR 板和黑色 PCR 板多管移液器或液體操作工作站384孔 PCR 板封口墊帶加熱蓋的熱循環儀FP 讀板設備實驗步驟展......閱讀全文
使用引物延伸熒光偏振探測法的高通量基因分型實驗2
?四重 PCR 的引物延伸法 實驗材料 目的基因組DNA 試劑、試劑盒 10XPCR擴增緩沖液Taq DNA 聚合酶4dNTP 混合液PCR 引物混合液AcydoTerminator混合液 儀器、耗材 384孔透明 PCR 板和黑色 PCR 板多管移液器或液
使用引物延伸熒光偏振探測法的高通量基因分型實驗1
單重 PCR 的引物延伸法 實驗材料 目的基因組DNA 試劑、試劑盒 10 X PCR 緩沖液4dNTP 混合液Taq DNA 聚合酶SNP 引物 儀器、耗材 384孔黑色 PCR 板多管移液器或液體操作工作站384孔 PCR 板封口墊帶加熱蓋的熱循環儀FP
使用－TAQMAN－分析法的高通量基因分型實驗
實驗材料基因組DNA試劑、試劑盒PCR 混合液儀器、耗材96孔透明板和蓋子水平離心機ABI PRISM 7700 測序系統熱循環儀統計軟件包實驗步驟1.96孔透明板B到H行每孔加2ul (30ng）基因組DNA，保留A行作對照—其中4孔只加2ul緩沖液作為「無 DNA」對照，余下8孔每孔加24基因組
使用－TAQMAN－分析法的高通量基因分型實驗
實驗材料 基因組DNA試劑、試劑盒 PCR 混合液儀器、耗材 96孔透明板和蓋子水平離心機ABI PRISM 7700 測序系統熱循環儀統計軟件包實驗步驟 1.96孔透明板B到H行每孔加2ul (30ng）基因組DNA，保留A行作對照—其中4孔只加2ul緩沖液作為「無 DNA」對照，余下8孔每孔加2
引物延伸實驗
實驗材料 RNA試劑、試劑盒 T4多核苷酸激酶dATP醋酸鈉乙醇EDTARNaseA苯酚氯仿儀器、耗材 恒溫培養箱NAP-5柱-70°C冰箱低溫離心機實驗步驟 1. ?依次加入下列試劑，建立用以標記引物的反應混合液（終體積10 μl）（1）2.5 μl ?H2O（2）1 μl ?10×T4多核苷酸激
引物延伸實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 RNA 試劑、試劑盒 T4多核苷酸激酶 dATP 醋酸鈉 乙醇
引物延伸實驗
引物延伸分析用于確定位置和定量特定RNA的5'-端的數量。結束標記的寡核苷酸雜交，RNA和利用中存在的脫氧核苷酸逆轉錄作為底漆。因此RNA的反轉錄成cDNA，變性聚丙烯酰胺凝膠電泳分析。cDNA的長度反映了基地之間的標記引物和RNA的5'-端核苷酸的數量，基因產品的數量是針對性的RN
引物延伸法－RNA－分析
? ? ? ? ? ? 實驗材料 T4 多核苷酸激酶 AMV 反轉錄酶 酵母 tRNA 試劑、試劑盒 10X 激酶緩沖液
引物延伸法－RNA－分析
實驗材料 T4 多核苷酸激酶AMV 反轉錄酶酵母 tRNA試劑、試劑盒 10X 激酶緩沖液 5X 雜交緩沖溶液 Tris-HCl MgCl2 DTT 放線菌酮 D dNTP RNasin 甲酰胺上樣染液 SephadexG-25 NaAc 乙醇 [r-32P]ATP儀器、耗材 水浴 雜交爐 電泳設備
5.6－引物延伸法－RNA－分析
引物延伸法可用于 RNA 的作圖和 RNA5＇端的定暈。在此方法中，將過量的 5＇端標記的單鏈 RNA 引物與待測的 RNA 雜交，隨后用反轉錄酶延伸該引物，生成句 RNA 模板互補的 cDNA。再在變性條件下通過聚丙烯酰胺凝膠電泳測定 cDNA 的長度，即可確定 RNA 端的位置，并且 cDNA
熒光偏振法進行高通量－PLpro－抑制劑篩選
COVID-19 的全球傳播是對公共衛生的嚴重威脅，有效的治療方法仍然非常有限。因此，新型抗病毒藥物的發現是抗擊新冠肺炎最為迫切和緊要的任務。在 COVID-19 的致病病原體 SARS-CoV-2 的生命周期中，木瓜樣蛋白酶 (PLpro) 在新病毒顆粒的成熟和釋放中起作用，并能抑制 Ⅰ 型干擾素
引物延伸實驗問題與解答
1)什么是引物延伸實驗？引物延伸實驗用于定量mRNA的量，測定低豐度的mRNA的種類。另外引物延伸實驗可標定轉錄產物的5`-端， 確定轉錄的精確起始。特異的末端標記的引物退火到RNA鏈的互補區域， 隨后用RNA作為模板，用反轉錄酶延伸引物得到cDNA，用變性聚丙烯酰胺凝膠電泳分析cDNA。cDNA的
用引物延伸法進行－RNA－的分析
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 引物延伸法主要用于 mRNA5' 末端作圖。poly (A) + RNA 先與過量 5' 末端標記的且與靶 RNA 互補的單鏈寡核苷酸引物雜交，然后用反轉錄酶延伸這個引物。產生的 cDNA 與 RNA 模板互補且
用引物延伸法進行－RNA－的分析
實驗方法原理?引物延伸法主要用于 mRNA5' 末端作圖。poly (A) + RNA 先與過量 5' 末端標記的且與靶 RNA 互補的單鏈寡核苷酸引物雜交，然后用反轉錄酶延伸這個引物。產生的 cDNA 與 RNA 模板互補且長度與引物 5' 末端和 RNA 5'
用引物延伸法進行－RNA－的分析
引物延伸法主要用于 mRNA5' 末端作圖。poly (A)?+?RNA 先與過量 5' 末端標記的且與靶 RNA 互補的單鏈寡核苷酸引物雜交，然后用反轉錄酶延伸這個引物。產生的 cDNA 與 RNA 模板互補且長度與引物 5' 末端和 RNA 5' 末端之間的距離相
自動熒光的分型實驗
實驗材料DNA 樣本試劑、試劑盒4dNTP 混合液MgCl2熒光染料標記的每個微衛星標記的正向引物每個微衛星標記的正向引物Taq DNA 聚合酶儀器、耗材96孔板烤干爐多道排管吸液器和消毒的試劑盤96孔塑料封膜5ml 和 50ml 的管子熱循環儀實驗步驟支持方案1 混合用于基因分型的熒光標記的 PC
引物延伸反應
Primer extension analysis is used to determine the location and quantitate the amount of the 5′-end of specific RNAs. An end-labeled oligonucleotide i
用PCR進行基因分型
與許多一次做數百塊Southern blots的研究人員一樣，我第一次用PCR做基因分型（genotyping）時覺得見效很快，不再需要等幾天才能看到結果，不再需要DNA顯微圖像或者操作紫外線了。隨著技術的不斷進步，RCR使基因組學和轉錄組學發生了翻天覆地的變化，甚至隨著免疫PCR的普及開始進軍蛋白
引物延伸的概念
中文名稱引物延伸英文名稱primer extension定 義從與模板(RNA或DNA)結合的引物3′-OH端開始，在核酸聚合酶的作用下，按照堿基配對的原則，逐個連上核苷酸，由5′→3′方向合成與模板互補鏈的過程。該反應可用于聚合酶鏈反應、單核苷酸多態性檢測等。應用學科生物化學與分子生物學（一級學
用PCR進行基因分型1
與許多一次做數百塊Southern blots的研究人員一樣，我第一次用PCR做基因分型（genotyping）時覺得見效很快，不再需要等幾天才能看到結果，不再需要DNA顯微圖像或者操作紫外線了。隨著技術的不斷進步，RCR使基因組學和轉錄組學發生了翻天覆地的變化，甚至隨著免疫PCR的普及開始進軍蛋白
高通量測序基因分型系統規范－即將實施！
國家標準《信息技術 生物特征識別 高通量測序基因分型系統規范》將于2023年12月1日正式實施。 該標準由TC28（全國信息技術標準化技術委員會）歸口，TC28SC37（全國信息技術標準化技術委員會生物特征識別分會）執行 ，主管部門為國家標準化管理委員會。 主要起草單位 深圳華大法醫科技有限公
高通量基因分型檢測平臺及其應用案例
Agripheno?高通量基因分型檢測平臺包括高通量Oktopure DNA提取儀、Nexar?模塊化內聯液體處理與分析系統、Soellex?高通量PCR水浴熱循環系統和Araya?內聯熒光檢測系統。Oktopure DNA提取儀采用磁珠的方法提取DNA，通量達到800個樣本/3小時。同時，適用于多
用PCR進行基因分型2
質譜法原則上，添加到引物末端的核苷能夠直接依據質量，利用通過基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜（matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectroscopy，MALDI-TOFMS）直接檢測出來，這是一種不需標
基于－PCR－的基因分型實驗——用末端標記的引物－PCR－擴增－SSLP
試劑、試劑盒正向和反向引物10 X T4 多聚核苷酸激酶緩沖液ATPT4 多聚核苷酸激酶模板DNA10 X PCR 擴增緩沖液4dNTP 混合液Taq DNA 聚合酶輕礦物油2 X 甲酰胺載樣液儀器、耗材96孔微量板熱循環儀用舊的X光膠片或者 Whatman 3MM 的過濾紙實驗步驟展
單核苷酸多態性檢測方法—SNapShot
SNP(Single Nucleotide Polymorphisms)，即單核苷酸多態性，是指在基因組水平上由單個核苷酸的變異所引起的DNA序列多態性，它是人類可遺傳的變異中最常見的一種，并作為第三代遺傳標志。人體許多表型差異、對藥物或疾病的易感性等等都可能與SNP有關，因此被廣泛用于群體遺傳學研
熒光基因分型篩查微小亞端粒重排實驗
實驗材料 樣品 DNA 試劑、試劑盒 PCR 引物氯化鎂溶液dATP、dGTP、dCTP 和 dTTP 混合液Taq 聚合酶96孔板PCR熱循環儀瓊脂糖EB 溶液上樣緩沖液電泳緩沖液Long Ranger? 凝膠溶液尿素 儀器、耗材 水平凝膠電泳裝置紫外透射反射儀
熒光基因分型篩查微小亞端粒重排實驗
實驗方法原理 實驗材料 樣品 DNA試劑、試劑盒 PCR 引物 氯化鎂溶液dATP、dGTP、dCTP 和 dTTP 混合液Taq 聚合酶96孔板PCR熱循環儀瓊脂糖EB 溶液上樣緩沖液電泳緩沖液Long Ranger? 凝膠溶液尿素儀器、耗材 水平凝膠電泳裝置紫外透射反射儀濾膜 GS-400 HD
HLA基因分型方法：RFLP法
RFLP法1）常規制備DNA鹽析法1．用淋巴細胞分離液從抗凝血中分離出白細胞。2．每3ml細胞懸液加10ml紅細胞裂解液溶解紅細胞兩次，再加2ml白細胞裂解液溶解白細胞。3．加50μl 10％?SDS和70μl蛋白酶K消化蛋白質，37℃過夜或55℃?3h。4．加0.25體積飽和醋酸鈉溶液，劇烈搖動1
什么是引物延伸分析？
引物延伸分析（primer extension analysis）主要用于mRNA 5′端作圖。poly（A）+RNA首先與過量5′端標記的且與靶RNA互補的單鏈寡核苷酸引物雜交，然后用反轉錄酶延伸這個引物。產生的cDNA與RNA模板互補且長度與引物5′端和RNA 5′端之間的距離相等。該法在mRN
SLAFseq技術：大規模基因分型高通量策略
大規模基因分型在遺傳相關性研究中起著重要作用，尤其是和高通量測序技術結合后，它為基因挖掘帶來了新的機遇。大規模基因分型的有效解決方法：SLAF-seq（specific-locus amplified fragment sequencing），該技術前期利用生物信息學方法，對目標物種的參考基因組（