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DNA熒光染色法：1.原理：利用熒光染劑（bisbenzimide, Hoechst 33258）偵測支原體污染。此染劑會結合到DNA之Adenosine-Thymidine (A-T) rich區域，因為支原體之DNA中A-T含量占多數（55～80%），所以可將其染色而偵測。被支原體污染之細胞經染色后，在細胞核外與細胞周圍可看到許多大小均一之熒光小點，即為支原體之DNA，證明有支原體之污染。2.測試步驟用間接步驟，將待測細胞懸浮液或細胞培養 液接種于指示細胞培養液中（indicator cell，例如Vero cell or 3T6 cell），然后培養指示細胞再作熒光染色。正負反應對照組亦可以接種于indicator cell內作為對照。3.待測細胞亦可作直接測試，但需為吸附型細胞，培養后直接作熒光染色。有些細胞易有熒光背景，而干擾結果判讀，則建議使用接種于指示細胞之步驟。4.特點：簡單、經濟與靈敏，廣泛使用，可作為例行之偵......閱讀全文
3 生物性污染的來源、危害及預防 外界的微生物如昆蟲、節肢動物、原蟲、霉菌、病毒、細菌、無細胞壁的微生物(通常指支原體)和其它類型的細胞都可能侵入培養環境引起污染。只要在一個開放的環境中進行培養，都難以避免發生污染。發生污染的可能性取決于操作方法、培養室的無菌環境以及實驗室的規章制度。生物性污染對細
支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在0.3-0.5um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態。它不同于細胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養中生長，營養要求比細菌高。細胞培養（特別是傳代
支原體這種微小的微生物(直徑0.2-0.8 μm)，是細胞培養中令人頭疼的大問題。支原體污染可能來自培養基、血清或實驗操作者，會影響細胞生長率、細胞形態、基因表達、細胞代謝和細胞活力。支原體感染不易察覺，因此對培養細胞定期進行支原體檢測就非常重要。 污染實驗室培養細胞的支原體
2.3.3 預防及控制污染發生后首先應確定污染物的種類及污染的程度。為了能正確檢測細菌或支原體的污染，應先撤去培養液中的抗生素。常規細胞傳代培養中應用抗生素會導致:①掩蓋了不很嚴重的污染;②導致了耐藥菌的產生。每一種抗生素的抗菌譜都是有限的，而且許多抗生素僅是抑制細菌生長，而非殺菌劑。因為支原體無細
細胞培養 中常遇見的有細菌污染、真菌污染、支原體污染、病毒污染等，說起支原體污染，估計細胞培養的同學就開始犯愁了，細胞培養的老手都知道，支原體污染非常不易察覺，怎么才能檢測支原體污染呢?1、細菌 、真菌污染的檢測(1)肉眼觀察 細菌 、真菌污染常在傳代、換液、
支原體是一種大小介于細菌和病毒之間(最小直徑0．2um)并獨立生活的微生物。約有1%可通過濾菌器。支原體無細胞壁形態呈高度多形性。可為圓形、絲狀或梨形。支原體形態多變，在光境下不易看清內部結構。電鏡下觀察支原體膜為三層結構。其中央有電干密度大的密集顆粒群或絲狀的中心束。支原體多吸附或散在于細胞表面和
支原體是一種大小介于細菌和病毒之間(最小直徑0．2um)并獨立生活的微生物．約有1%可通過濾菌器。支原體無細胞壁形態呈高度多形性．可為圓形、絲狀或梨形。 支原體形態多變，在光境下不易看清內部結構。電鏡下觀察支原體膜為三層結構．其中央有電干密度大的密集顆粒群或絲狀的中心束。支原體多吸附或散在于
支原體是一種大小介于細菌和病毒之間(最小直徑0．2um)并獨立生活的微生物．約有1%可通過濾菌器。支原體無細胞壁形態呈高度多形性．可為圓形、絲狀或梨形。 支原體形態多變，在光境下不易看清內部結構。電鏡下觀察支原體膜為三層結構．其中央有電干密度大的密集顆粒群或絲狀的中心束。支原體多吸附或散在于細胞表面
最近看大家常提到支原體污染，就翻了翻書，做了些筆記，現在貼出來和大家分享：支原體是一種大小介于細菌和病毒之間(最小直徑0．2um)并獨立生活的微生物。約有1%可通過濾菌器。支原體無細胞壁形態呈高度多形性。可為圓形、絲狀或梨形。支原體形態多變，在光境下不易看清內部結構。電鏡下觀察支原體膜為三層結構。其
小生剛開始做細胞培養不久，對于一個細胞培養的新手來說，最怕的就是細胞受污染。所以本人翻閱了一些園子里的關于細胞培養過程中的污染問題的貼子，結合平時查閱資料以及這些天的細胞培養的一些心得，整理出一些關于細胞污染的東東與大家一起分享。希望能對剛踏入細胞培養的同仁們有些幫助，也希望各位達人作出補充，大家共
用好的血清，細胞一定狀態良好？養細胞細心、體貼像照顧小孩紙，細胞一定「平平安安」？但 MTT 等一些細胞實驗結果卻異常。因為你的細胞已悄悄被支原體污染了。支原體是一種生命力頑強的細菌，它和其他細菌的區別在于，支原體沒有細胞壁，只有柔軟的細胞膜。嬌小的身材（0.15-0.3μm）讓它可以輕松穿過濾器。
培養細胞時，發現細胞增殖變慢、形態漸漸改變，是血清或培養基的問題嗎？很有可能是你的細胞污染了~~~~~支 原 體 污 染細胞污染可分為細菌、霉菌、酵母菌、支原體污染，其中支原體污染發生的概率>50%。支原體(Mycoplasma) 是最小的原核生物，約0.1-0.3μm，可穿透0.22-0.4
最近看大家常提到支原體污染，就翻了翻書，做了些筆記，現在貼出來和大家分享：支原體是一種大小介于細菌和病毒之間(最小直徑0．2um)并獨立生活的微生物。約有1%可通過濾菌器。支原體無細胞壁形態呈高度多形性。可為圓形、絲狀或梨形。支原體形態多變，在光境下不易看清內部結構。電鏡下觀察支原體膜為三層結構。其
在細胞培養，特別是傳代細胞培養中，支原體污染率達到15-35%。支原體的侵染會引起細胞功能和基因表達的嚴重改變，并造成持續危害。由于支原體污染會嚴重影響實驗結果的可靠性、重復性和一致性，對支原體的常規檢測非常重要。傳統的支原體檢測方法很耗費時間，通常需要一天至數周，而且操作比較繁瑣，準確度不高。中國
細胞培養中最令人頭疼的問題之一是支原體的污染。在人們日常生活工作環境中，支原體無處不在，它可以通過人的毛發、口腔、穿著的衣服、動物的皮毛以及日常的細胞培養的操作環境造成對細胞污染。據說有11%的細胞株均受到不同程度的支原體污染，更有統計細胞培養中支原體感染發生率達到63%，對實驗結果會產生不可預期的
由于影響因素過多，細胞/組織培養中出現的一些問題往往很難分析并得到解決，因此被人戲稱為“黑色藝術”或“巫術”。本文列舉了一些動物細胞/組織培養中常見的問題及解決方法。 1.培養試劑的保存：血清：-5oC - -20oC 保存，避免反復凍融。培養基: 2oC – 8oC避光保存。
軟件驗證對于在GLP或GMP實驗室工作的科研人員，SoftMax Pro軟件驗證方案提供了最為全面的記錄文檔和可用于驗證GxP管理員功能，軟件運行和分析能力的工具。- 驗證時間從6個月降低到3天支持平行線分析，4-P和5-P曲線擬合驗證- 全面復雜的針對常規實驗計算的檢測- 即時可用于OQ驗證檢測的
孩子感冒咳嗽老不好，吃了抗生素也沒有用，小心是支原體惹的禍。支原體與人類健康關系最為密切的有4種，即肺炎支原體、人型支原體、解脲支原體與生殖支原體。其中，肺炎支原體對寶寶的危害最大，是引發肺炎的禍首之一（后三者主要引起泌尿生殖道感染），稱為支原體肺炎。支原體一年四季都可侵襲寶寶，春季尤其猖獗，小自嬰
念珠菌污染呈鏈狀排列，呈卵圓形散在細胞周邊和細胞之間。圖5 白色念珠菌污染 常見的細胞污染之一，左側為倒置顯微鏡下視圖，右側為革蘭氏染色圖片，其中，長梭型的是處于分裂期的鏈珠菌酵母污染很容易觀察到，培養物變渾濁，尤其在后期。一般pH值變化很小，嚴重時，pH值升高。顯微鏡下呈卵圓形或球形顆粒，有些會芽
13.離心動物細胞的離心速率： 回收動物細胞，離心速率一般為300g，5 - 10 分鐘，離心強度過大將造成細胞破裂死亡。 14.細胞生長緩慢：1）換用了不同的培養基或血清，解決方法是可比較不同培養基成分，用生長實驗比較以前批次和新批次的血清， 提高接種細胞數，使
檢測抗體的方法應根據抗原的性質、抗體的類型不同，選擇不同的篩選方法，一般以快速、簡便、特異、敏感的方法為原則。 常用的方法有: 1. ELISA用于可溶性抗原蛋白質、細胞和病毒等McAb的檢測。 2. RIA用于可溶性抗原、細胞McAb的檢測。 3. FACS熒光激活細胞分類儀用于檢查細胞
70、 血清解凍后發現有絮狀沉淀物出現，該如何處理?血清中沉淀物的出現有許多種原因，但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后，也會存在于血清中，亦是造成沉淀物的原因之一。但這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的質量。 若欲去除這些絮
產品簡介：支原體染色檢測試劑盒(Mycoplasma Stain Assay Kit)是一種經典的利用DNA熒光染色法檢測支原體污染的試劑盒，其原理是當細胞發生凋亡時，染色質會固縮，Hoechst33258染色后在熒光顯微鏡下觀察，正常細胞的細胞核呈正常的藍色，而凋亡細胞的細胞核會呈致密濃染，或
《Science》剛剛公布的十大科學突破中，占據首位就是細胞重新編程技術(iPS，induced pluripotent stem cells)，這一才初初“面世”一年的干細胞 技術引發了生命科學研究領域的極大震動，引用《科學》雜志負責新聞的副主編Robert Coontz的話就是“這項研
6、血清的有關問題：新生牛血清：新出生牛5天內取血制成小牛血清：小牛出生16周以內采血制成。胎牛血清：（進口血清）要求剖腹取胎制成。國內廠家往往不能做到，經常把出生2天以內采血稱為胎牛血清。根據血清的生產工藝及血紅蛋白、內毒素含量又分為：（1）特級胎牛血清：40納米過濾，內毒素含量≤10EU，血紅蛋
1975年，Kohler和Milstein發現將小鼠骨髓瘤細胞和綿羊紅細胞免疫的小鼠脾細胞進行融合，形成的雜交細胞既可產生抗體，又可無限增殖，從而創立了單克隆抗體雜交瘤技術。這一技術上的突破不僅為醫學與生物學基礎研究開創了新紀元，也為臨床疾病的診、防、治提供了新的工具。 制備單克隆抗體包括動物免疫
6、血清的有關問題：新生牛血清：新出生牛5天內取血制成小牛血清：小牛出生16周以內采血制成。胎牛血清：（進口血清）要求剖腹取胎制成。國內廠家往往不能做到，經常把出生2天以內采血稱為胎牛血清。根據血清的生產工藝及血紅蛋白、內毒素含量又分為：（1）特級胎牛血清：40納米過濾，內毒素含量≤10EU，血紅蛋
實驗方法原理 1975年，Kohler和Milstein發現將小鼠骨髓瘤細胞和綿羊紅細胞免疫的小鼠脾細胞進行融合，形成的雜交細胞既可產生抗體，又可無限增殖，從而創立了單克隆抗體雜交瘤
淋巴細胞雜交瘤單克隆抗體技術 實驗方法原理 1975年，Kohler和Milstein發現將小鼠骨
實驗方法原理1975年，Kohler和Milstein發現將小鼠骨髓瘤細胞和綿羊紅細胞免疫的小鼠脾細胞進行融合，形成的雜交細胞既可產生抗體，又可無限增殖，從而創立了單克隆抗體雜交瘤技術。這一技術上的突破不僅為醫學與生物學基礎研究開創了新紀元，也為臨床疾病的診、防、治提供了新的工具。 制備單