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淋巴細胞雜交瘤單克隆抗體技術 實驗方法原理 1975年，Kohler和Milstein發現將小鼠骨髓瘤細胞和綿羊紅細胞免疫的小鼠脾細胞進行融合，形成的雜交細胞既可產生抗體，又可無限增殖，從而創立了單克隆抗體雜交瘤技術。這一技術上的突破不僅為醫學與生物學基礎研究開創了新紀元，也為臨床疾病的診、防、治提供了新的工具。 制備單克隆抗體包括動物免疫、細胞融合、選擇雜交瘤、檢測抗體、雜交瘤細胞的克隆化、凍存以及單克隆抗體的大量生產，要經過幾個月的一系列實驗步驟。 實驗材料 小鼠 骨髓瘤細胞 ......閱讀全文
外周血是臨床檢驗中的重要標本。FCM分析外周白細胞的主要目的是了解各種白細胞的數目與分群情況。這些數字的變化與臨床的某些疾病有一定的關系。近年來，由于多種識別白細胞膜表面抗原的單克隆抗體的發現，以及對這些單克隆抗體的直接或間接熒光標記物的出現，使得利用FCM的熒光組織化學分析獲得被測細胞的多指標的更
外周血是臨床檢驗中的重要標本。FCM分析外周白細胞的主要目的是了解各種白細胞的數目與分群情況。這些數字的變化與臨床的某些疾病有一定的關系。近年來，由于多種識別白細胞膜表面抗原的單克隆抗體的發現，以及對這些單克隆抗體的直接或間接熒光標記物的出現，使得利用FCM的熒光組織化學分析獲得被測細胞的多指標的更
DNA倍體分析及細胞周期分析 在細胞周期內,DNA含量隨細胞內時相發生周期性變化,正常情況下,大多數細胞處于休止期(Go), G1期細胞雖有DNA合成，但DNA含量仍為2N，為二倍體細胞,；處于活躍的DNA合成期(S期)的細胞DNA含量為2N-4N；正經歷細胞分裂(G2/M期)的細胞
第一部分：關于ELISPOT1． 什么是ELISPOT檢測?答:酶聯免疫斑點 ( enzyme-linked immunosorbent spot, ELISPOT) 檢測技術是通過兩種高親和力的特異性抗細胞因子抗體來檢測淋巴細胞分泌細胞因子情況的一種方法。淋巴細胞在體內被抗原激活后，或者在體外培養
抗血清的制備 【原理】：用抗原刺激機體可以產生抗體，抗原的性質、純度和活性影響其免疫動物后獲得的抗體的的特異性和效價。在體外有目的的制備抗原，經初次、再次免疫的過程可以獲得高質量的抗體。 【注意事項】 ①制備佐劑時，一定要順著同一方向用勁磨。 ②檢查油包水的方法：培養皿內加水，滴入混勻液
流式細胞術工作原理是在細胞分子水平上通過單克隆抗體對單個細胞或其他生物粒子進行多參數、快速的定量分析。它可以高速分析上萬個細胞，并能同時從一個細胞中測得多個參數，具有速度快、精度高、準確性好的優點，是當代最先進的細胞定量分析技術之一。光源、液流通路、信號檢測傳輸和數據的分析系統是流式細胞儀的主要組成
1、體積、電導和激光散射原理這是Beckman－Coulter 公司生產的血液分析儀所采用的經典分析方法，他集三種物理學檢測技術于一體，在細胞處于自然原始的狀態下對其進行多參數分析。該方法也稱為體積、電導、激光散射血細胞分析法。此技術采用在標本中首先加入紅細胞溶血劑溶解掉紅細胞，然后加入穩定劑來中
實驗概要本實驗介紹了玫瑰花環試驗的原理、方法和注意事項等，玫瑰花環試驗是目前鑒定和計算外周血液和各種淋巴樣組織中T淋巴細胞的最常用方法之一。實驗原理動物T淋巴細胞表面具有結合異種動物紅細胞的受體，稱為E受體，在體外一定條件下，能與綿羊等動物的紅細胞結合，形成以T細胞為中心，紅細胞環繞在周圍，宛似一朵
實驗概要本實驗介紹了玫瑰花環試驗的原理、方法和注意事項等，玫瑰花環試驗是目前鑒定和計算外周血液和各種淋巴樣組織中T淋巴細胞的最常用方法之一。實驗原理動物T淋巴細胞表面具有結合異種動物紅細胞的受體，稱為E受體，在體外一定條件下，能與綿羊等動物的紅細胞結合，形成以T細胞為中心，紅細胞環繞在周圍，宛似一朵
流式細胞分析（Flow cytometry，FCM）是以高能量激光照射高速流動狀態下被熒光色素染色的單細胞或微粒，測量其產生的散射光和發射熒光的強度，從而對細胞（或微粒）的物理、生理、生化、免疫、遺傳、分子生物學性狀及功能狀態等進行定性或定量檢測的一種現代細胞分析技術，它具有如下幾個特點：①標本只要
《我不是藥神》在網絡上爆屏，電影以黑色幽默的形式反映了目前的現實：看病貴。但是，大家忽略了一個很重要的問題，那就是白血病治療難。20年前，治療慢性粒細胞白血病的特效藥格列衛還未上市，醫生能夠用來治療慢性粒細胞白血病的藥很少，兩三年后病人就會轉化為急性白血病，后果可想而知。格列衛改變了慢性粒細胞白
中科院“百人計劃”，國家杰出青年基金獲得者許琛琦研究員主要從事淋巴細胞與疾病等領域的研究，今年其研究組在Nature雜志上發文，通過調節T淋巴細胞膽固醇代謝可以提高細胞膜膽固醇水平，從而促進T淋巴細胞對腫瘤的殺傷，由此發展了一種新的腫瘤免疫治療方法。同時近期許琛琦研究員也受邀在Nature Re
第一節 免疫細胞的分離 一、外周血單個核細胞的分離 將2份6%聚蔗糖蒸餾水溶液與1份34%泛影葡胺生理鹽水溶液混合，其比重為1.077±0.002，可作為常規的淋巴細胞分離液，即Ficoll分離液。 主要用于分離外周血中單個核細胞，是一種單次密度梯度離心分離法，其分布由上到下依次為：稀釋
流式細胞分析（Flow cytometry，FCM）是以高能量激光照射高速流動狀態下被熒光色素染色的單細胞或微粒，測量其產生的散射光和發射熒光的強度，從而對細胞（或微粒）的物理、生理、生化、免疫、遺傳、分子生物學性狀及功能狀態等進行定性或定量檢測的一種現代細胞分析技術，它具有如下幾個特點：①標本只要
（1）過氧化物酶染色的原理和臨床意義[原理] 粒細胞和單核細胞胞漿中含有的過氧化物酶（peroxidase，POX）能將底物過氧化氫分解，產生新生態氧，它將四甲基聯苯胺氧化為聯苯胺藍。聯苯胺藍自我脫氫氧化，顯棕色四甲基苯醌二胺，再加入亞硝基鐵氰化鈉與聯苯胺藍結合，可形成穩定的藍色顆粒，定位于細胞漿內
（1）過氧化物酶染色的原理和臨床意義 [原理] 粒細胞和單核細胞胞漿中含有的過氧化物酶（peroxidase，POX）能將底物過氧化氫分解，產生新生態氧，它將四甲基聯苯胺氧化為聯苯胺藍。聯苯胺藍自我脫氫氧化，顯棕色四甲基苯醌二胺，再加入亞硝基鐵氰化鈉與聯苯胺藍結合，可形成穩定的藍色顆粒，定
T淋巴細胞是宿主適應性免疫系統中最重要的免疫細胞之一，在抵抗病原入侵、維持機體穩態以及抗腫瘤等方面起到不可或缺的作用【1,2】。胸腺是T淋巴細胞發育的必需場所【3】。胎肝或骨髓來源的胸腺定植祖細胞（thymus seeding progenitor, TSP）遷移定植到胸腺后，即為早期胸腺祖細胞
醫學研究人員通過三分類全自動血細胞分析儀對淋巴細胞漿細胞的正常形態學進行了更加深入的研究。 （一）原始淋巴細胞（lymphoblast） 細胞直徑 10～18μm，圓形或橢圓形
實驗原理動物T淋巴細胞表面具有結合異種動物紅細胞的受體，稱為E受體，在體外一定條件下，能與綿羊等動物的紅細胞結合，形成以T細胞為中心，紅細胞環繞在周圍，宛似一朵玫瑰花樣的花環，故取名為E玫瑰花環試驗(erythrocyte rosettes assay)或自然花環形成試驗。凡能與RBC形成E花環
醫學研究人員通過三分類全自動血細胞分析儀對淋巴細胞漿細胞的正常形態學進行了更加深入的研究。 （一）原始淋巴細胞（lymphoblast） 細胞直徑 10～18μm，圓形或橢圓形
實驗原理動物T淋巴細胞表面具有結合異種動物紅細胞的受體，稱為E受體，在體外一定條件下，能與綿羊等動物的紅細胞結合，形成以T細胞為中心，紅細胞環繞在周圍，宛似一朵玫瑰花樣的花環，故取名為E玫瑰花環試驗(erythrocyte rosettes assay)或自然花環形成試驗。凡能與RBC形成E花環
免疫治療作為腫瘤治療的新興策略之一, 已成為近年來的研究熱點。結直腸癌因其復雜多變的遺傳分子學機制得到了諸多研究人員的青睞。對于結直腸癌而言，免疫微環境在很大程度上決定著治療難度及患者的生存預后等。 近日，一篇發表在Scientific reports的研究發現：腫瘤浸潤性CD20+B淋巴細
一、 實驗準備1． 標本制備：2． zui小化非特異性結合： 二、凋亡1．凋亡的檢測方法：網站和其它2．PI染色法3．Annexin V 法4．TUNNEL法 三、細胞因子1．激活的細胞因子2．CBA 四、血小板
胡曉波，上海交通大學醫學院附屬第三人民醫院檢驗科主任，副主任技師。1993年畢業于上海第二醫科大學，并留校任醫學檢驗系教師。1999年至上海市臨床檢驗中心，擔任中心副主任，負責業務和部分行政管理工作。2006年至上海交通大學醫學院附屬第三人民醫院檢驗科工作，擔任科副主任、
免疫功能與每個人的健康狀態息息相關，而淋巴細胞亞群分析正是檢測免疫功能的重要指標——它能反映機體當前的免疫功能、狀態和平衡水平，并可以輔助診斷某些疾病（如自身免疫病、免疫缺陷病、惡性腫瘤、血液病、變態反應性疾病等），對分析發病機制，觀察療效及檢測預后都有重要意義。那么淋巴細胞亞群究竟是什么？它的檢測
實驗概要本實驗介紹了B細胞特有的表面標志膜表面免疫球蛋白(SmIg)的檢測方法。實驗原理膜表面免疫球蛋白(SmIg)，是B細胞特有的表面標志，它既是B細胞識別抗原的受體，與相應抗原特異性結合；又是表面抗原，能與相應的抗Ig的抗體結合，故可用熒光標記的抗Ig抗體作免疫熒光鏡檢，以查出B淋巴細胞。由于B
實驗步驟一、材料1. 胞質分裂阻滯微核試驗2. 微核的著絲點檢測(1)從硬皮病 C R E S T 亞型的患者中取得的血清樣本。(2) F I T C 標記的兔抗人 I g G 二抗。(3) 過氧化物酶標記的兔抗人 I g G 。(4) 二胺基聯苯溶液（D A B ): I m g /m L 溶于
實驗步驟 一、材料 1. 胞質分裂阻滯微核試驗 2. 微核的著絲點檢測 (1)從硬皮病 C R E S T 亞型的患者中取得的血清樣本。 (2) F I T C 標記的兔抗人 I g G 二抗。 (3) 過氧化物酶
實驗概要熟悉混合淋巴細胞培養(mixed lymphocyte cultue，MLC)的原理；掌握分離淋巴細胞的方法；學習用同位素標記進行混合淋巴細胞培養的操作方法。實驗原理混合淋巴細胞培養或稱混合淋巴細胞反應（MLR）是將二個無關個體的淋巴細胞混合在一起培養，由于二者的淋巴細胞膜上的組織相容性抗原
實驗概要本實驗介紹了B細胞特有的表面標志膜表面免疫球蛋白(SmIg)的檢測方法。實驗原理膜表面免疫球蛋白(SmIg)，是B細胞特有的表面標志，它既是B細胞識別抗原的受體，與相應抗原特異性結合；又是表面抗原，能與相應的抗Ig的抗體結合，故可用熒光標記的抗Ig抗體作免疫熒光鏡檢，以查出B淋巴細胞。由于B