HPLC四大常見故障及解決方法（二）
保留時間 保留時間的漂移往往由柱老化引起,而柱老化不可能引起保留時間的無規律波動。事實上,保留時間漂移的多半原因是由于不同機理的色譜柱老化,如固定相流失(例如通過水解) ,色譜柱污染(由樣品或流動相所致)等。保留時間漂移的幾種最常見的原因和解決方法如下： 1色譜柱平衡 如果觀察到保留時間漂移,首先應考慮色譜柱是否已經平衡。在每一次運行之前給予足夠的時間平衡色譜柱。通常平衡需要10～20個柱體積的流動相,但如果在流動相中加入少量添加劑(如離子對試劑)則需要相當長的時間來平衡色譜柱。流動相污染也可能是原因之一。溶于流動相中的少量污染物可能慢慢富集到色譜柱上,從而造成保留時間的漂移。應注意:水是很容易污染的流動相成分。 2固定相穩定性 固定相的穩定性都是有限的,即使在推薦的pH范圍內使用,固定相也會慢慢水解。例如,硅膠基質在pH4時水解穩定性最好,水解速度與流動相類型和配體有關。雙......閱讀全文
G8－HPLC－Analyzer－for－HPLC
High performance liquid chromatography (HPLC) is the gold standard methodology for the HbA1c test. By manipulating the flow rate of the liquid (i.
HPLC應用
一、樣品測定1．流動相比例調整：由于我國藥品標準中沒有規定柱的長度及填料的粒度，因此每次新開檢新品種時幾乎都須調整流動相（按經驗，主峰一般應調至保留時間為6~15分鐘為宜）。所以建議第一次檢驗時請少配流動相，以免浪費。弱電解質的流動相其重現性更不容易達到，請注意充分平衡柱。2．樣品配制：①溶劑；②容
HPLC－填料
目前液相色譜的填料主要為硅膠及其鍵合硅膠。硅膠的主要優點是柱效高，機械強度高，物理性質如孔結構、孔徑、比表面積和孔徑易于控制，通過表面改性可獲得多種功能固定相.在高效液相色譜的發展的過程中曾使用過大顆粒全多孔硅膠、表面多孔的顆粒、小顆粒全多孔硅膠。高效液相色譜使用中孔和大孔全多孔的硅膠。現代高效液相
HPLC用水
? HPLC用水可以通過以下幾個方面來得到： 1、專門的純水機或超純水機； 2、去離子水重蒸； 3、二次或三次重蒸水； 4、采用類似家用的純水機； 5、市場上瓶裝的純凈水或蒸餾水； 6、其它途徑 不管采用何種途徑，配制流動相應用新鮮水，水質越高放置時間越短。 理想的HPLC用水應為1
HPLC組成
HPLC由溶劑輸送系統（脫氣機、高壓泵等）、進樣系統（定量泵、六通閥、定量環、進樣針等）、分離系統（色譜柱等）、檢測系統（檢測器等）、記錄及數據處理系統。高壓輸液泵：將流動相在高壓下連續不斷地送入液路系統，具有有足夠的壓力，輸出流量恒定、可調，輸出壓力平穩，泵室體積小，泵體抗腐蝕、耐酸等特點。壓力平
HPLC簡介
目錄1 高效液相色譜法的定義2 對儀器的一般要求和色譜條件2.1 色譜柱2.2 檢測器2.3 流動相3 系統適用性試驗3.1 色譜柱的理論板數（n）3.2 分離度（R）3.3 重復性3.4 拖尾因子（T）4 測定法4.1 內標法4.2 外標法4.3 加校正因子的主成分自身對照法4.4 不加校正因子的
分析HPLC如何放大到制備型HPLC？
在分析液相中色譜柱的典型進樣量是微克級，甚至更低。樣品量和固定相之比有的甚至小于1:10000。進樣體積一般來說都大大小于色譜柱體積（小于1:100）。 在這種條件下，會達到很好的分離效果，峰形尖銳并且很對稱。分析系統線形放大到制備型HPLC意味著使用直徑更大的制備柱、更高的流速和根據色譜柱的長度增
維他命HPLC剖析
維他命做為關鍵的食品類或是飼料原料，在國家標準或是各種各樣制造行業、產品標準常有涉及含水量的檢驗。文中共享一下對于某些維他命剖析的檢驗的實例： 一、食品類中維他命、的測量 第一：食品類中維他命A和維他命E的測量 反相液相色譜法 國家標準連用的是C30柱，水/乙醇的流動性相管理體
HPLC的應用
? 一、樣品測定 1．流動相比例調整：由于我國藥品標準中沒有規定柱的長度及填料的粒度，因此每次新開檢新品種時幾乎都須調整流動相（按經驗，主峰一般應調至保留時間為6~15分鐘為宜）。所以建議第一次檢驗時請少配流動相，以免浪費。弱電解質的流動相其重現性更不容易達到，請注意充分平衡柱。 2．樣
HPLC用水來源
HPLC用水可以通過以下幾個方面來得到：1 專門的純水機或超純水機；2 去離子水重蒸；3 二次或三次重蒸水；4 采用類似家用的純水機；5 市場上瓶裝的純凈水或蒸餾水；6 其它途徑不管采用何種途徑，配制流動相應用新鮮水，水質越高放置時間越短。理想的HPLC用水應為18.2Ω的超純水，并通過0.22um
HPLC系統概述
HPLC系統一般由輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器、數據記錄及處理裝置等組成。其中輸液泵、色譜柱、檢測器是關鍵部件。有的儀器還有梯度洗脫裝置、在線脫氣機、自動進樣器、預柱或保護柱、柱溫控制器等，現代HPLC儀還有微機控制系統，進行自動化儀器控制和數據處理。制備型HPLC儀還備有自動餾分收集裝置。最早的
安捷倫HPLC維護
一、如何處理 HPLC 中的鹽帶來的問題？ 很多問題是由于流動相含有鹽成分造成的。建議在清洗時將水加熱后再沖洗，這樣既可以將鹽溶解的更好，也可以溶解一些脂溶性物質，會減少很多問題的發生,包括管路堵塞,鹽析出，基線噪音…… 二、安捷倫1100及1200液相泵的日常維護 泵是
HPLC入門問題FAQ
HPLC 篇 ? 1 ． HPLC 靈敏度不夠的主要原因及解決辦法 ? 樣品量不足：解決辦法為增加樣品量 ? 樣品未從柱子中流出：可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子 ? 樣品與檢測器不匹配：根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器 ? 檢測器衰減太多：調整衰減即可。 ? 檢測
HPLC入門問題FAQ
HPLC 篇 1 ． HPLC 靈敏度不夠的主要原因及解決辦法 樣品量不足：解決辦法為增加樣品量樣品未從柱子中流出：可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子樣品與檢測器不匹配：根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器檢測器衰減太多：調整衰減即可。檢測器時間常數太大：解決辦法為降低時間參數檢測器池窗污染：解決
HPLC基礎知識
鑒于HPLC應用在藥品分析中越來越多，因此每一個藥品分析人員應該掌握并應用HPLC。?（一）概論?一、液相色譜理論發展簡況?色譜法的分離原理是：溶于流動相（mobile phase）中的各組分經過固定相時，由于與固定相（stationary phase）發生作用（吸附、分配、離子吸引、排阻、親和）的
比較FPLC與HPLC
1、二者原理相同：都是由經典的液體柱層析引入氣相色譜理論，并且對相體進 行了改革，配用高壓輸液泵，采用高靈敏檢測器、梯度洗脫裝置、自動收集裝置和微機等發展起來的現代液相色譜。 2、特點：二者均具有快速、分辨率高、檢測靈敏度高、分離效能高等特點，而且FPLC還具有柱容量大、回收效率高及不易使生物大
HPLC名詞術語
色譜圖(Chromatogram)?:?色譜柱流出物通過檢測器時所產生的響應信號對時間的曲線圖,其縱坐標為信號強度,橫坐標為時間。色譜峰(Peak):色譜柱流出組分通過檢測器時產生的響應信號。峰底(Peak Base):峰的起點與終點之間連接的直線。峰高(Peak Height):峰最大值到峰底的距
HPLC基礎知識
鑒于HPLC應用在藥品分析中越來越多，因此每一個藥品分析人員應該掌握并應用HPLC。 （一）概論 一、液相色譜理論發展簡況 色譜法的分離原理是：溶于流動相（mobile phase）中的各組分經過固定相時，由于與固定相（stationary ph
HPLC分類及其原理
HPLC分類有很多種，可以根據不同的依據進行分類。1. 根據流動相和固定相的極性不同，HPLC可以分為正相色譜和反相色譜。正相高效液相色譜： 色譜柱中的固定相是由硅膠、氧化鋁等極性化合物組成。當色譜運行時，由于樣品中的極性化合物對固定相有較強的親和力，使它們在色譜柱中的保留時間比非極性化合物長，因此
HPLC填料的選擇
基質HPLC填料可以是陶瓷性質的無機物基質，也可以是有機聚合物基質。陶瓷性質的無機物基質主要是硅膠和氧化鋁。陶瓷性質的無機物基質剛性大，在溶劑中不容易膨脹。HPLC級的有機聚合物是基于交聯的苯乙烯-二乙烯苯或者甲基丙烯酸酯。有機聚合物基質剛性小，更易壓縮。溶劑或溶質容易滲入有機質基質中，導致填料顆粒
HPLC維護知識問答
1、為什么溶劑和樣品要過濾? 溶劑和樣品過濾非常重要，它會對色譜柱、儀器起到保護作用，消除由于污染對分析結果的影響。 色譜柱：由于填料顆粒很細，色譜柱內腔很小，溶劑和樣品中的細小顆粒會使色譜柱和毛細管容易堵塞。 儀器：溶劑和樣品中的細小顆粒會增加進樣閥的堵塞和磨損，同時也會增加泵頭內的藍
uhplc和hplc區別
hplc是高效液相色譜，uplc是超高效液相色譜，這兩個的區別是超高效液相色譜借助于HPLC（高效液相色譜）的理論及原理，涵蓋了小顆粒填料、非常低系統體積及快速檢測手段等全新技術，增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量。
HPLCICPMS和HPLCAFS助力食品安全檢測
近期，天津濱海新區召開2011年度科學技術獎勵大會，隆重表彰為濱海新區科技發展作出突出貢獻的單位和科技工作者。天津檢驗檢疫局動植物與食品檢測中心申報的天津檢驗檢疫局重點科技項目《食品安全關鍵因子的新型檢測技術研究與應用》(TK041-2009)榮獲科學技術進步獎二等獎。 該項目針
HPLC的故障及處理
(一) 保留時間變化1.柱溫變化 柱恒溫。2.等度與梯度間未能充分平衡 至少用10倍柱體積的流動相平衡柱。3.緩沖液容量不夠 用>25mmol/L的緩沖液。4.柱污染 每天沖洗柱。5.柱內條件變化 穩定進樣條件，調節流動相。6.柱快達到壽命 采用保護柱。(二) 保留時間縮短1.流速增加 檢查泵，重新
HPLC－故障及排除方法
詳細說明: 診狀 可能的原因 解 決 方 法 一 保留時間變化 1.柱溫變化 柱恒溫 2.等度與梯度間未能充分平衡 至少用10倍柱體積的流動相平衡柱 3.緩沖液容量不夠 用>25mmol/L的緩沖液 4.柱污染 每天沖洗柱 5.柱內條件變化 穩定進樣條件,調節流動相 6.柱快達到壽命 采
水質對HPLC的影響
高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）是一種有效可靠的技術，目前已成為許多實驗室研究的重要工具。HPLC最常見的一個問題就是溶劑中的污染物對分析結果的影響。1、顆粒顆粒可以損壞泵和注射器。顆粒也可以堵塞色譜柱并且熔化它，這會導致回
HPLC的故障及處理
(一) 保留時間變化?1.柱溫變化 柱恒溫。?2.等度與梯度間未能充分平衡 至少用10倍柱體積的流動相平衡柱。?3.緩沖液容量不夠 用>25mmol/L的緩沖液。?4.柱污染 每天沖洗柱。?5.柱內條件變化 穩定進樣條件，調節流動相。?6.柱快達到壽命 采用保護柱。?(二) 保留時間縮短?1.流速增
HPLC良好的連接方略
毛細管對高效液相色譜分離的影響 若高效液相色譜 (HPLC) 系統采用了不適當的連接方式或者應用不正確的毛細管，均可能導致均可能導致不良的峰擴寬，色譜柱的最佳分離效率就更無從談起。甚至還可能發生使用的柱子越細，其洗脫峰的擴寬反而越大的情況。本文將詳細介紹毛細管對高效液相色譜分離的影響，
水質對HPLC的影響
高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）是一種有效可靠的技術，目前已成為許多實驗室研究的重要工具。HPLC最常見的一個問題就是溶劑中的污染物對分析結果的影響。顆粒顆粒可以損壞泵和注射器。顆粒也可以堵塞色譜柱并且熔化它，這會導致回壓增