動物細胞培養的培養步驟
注:所有步驟應在無菌無毒的超凈工作臺進行。胰蛋白酶處理時間不宜過長。取離體的動物組織,器官或細胞,剪碎并加入胰蛋白酶分解成單個細胞,配置形成細胞懸液。制備動物細胞培養液體培養基(需加入血清,保證無菌無毒),將細胞接種至培養基,放入二氧化碳培養箱中進行初代培養。當細胞增殖達到一定程度,出現接觸抑制現象時,用胰蛋白酶再次處理,并用細胞懸液吹打貼壁生長的細胞。進行細胞計數。依照計數結果,分瓶培養,進行傳代培養。獲得細胞系或細胞株。......閱讀全文
動物細胞培養的培養步驟
注:所有步驟應在無菌無毒的超凈工作臺進行。胰蛋白酶處理時間不宜過長。取離體的動物組織,器官或細胞,剪碎并加入胰蛋白酶分解成單個細胞,配置形成細胞懸液。制備動物細胞培養液體培養基(需加入血清,保證無菌無毒),將細胞接種至培養基,放入二氧化碳培養箱中進行初代培養。當細胞增殖達到一定程度,出現接觸抑制現象
動物細胞培養的培養步驟介紹
注:所有步驟應在無菌無毒的超凈工作臺進行。胰蛋白酶處理時間不宜過長。取離體的動物組織,器官或細胞,剪碎并加入胰蛋白酶分解成單個細胞,配置形成細胞懸液。制備動物細胞培養液體培養基(需加入血清,保證無菌無毒),將細胞接種至培養基,放入二氧化碳培養箱中進行初代培養。當細胞增殖達到一定程度,出現接觸抑制現象
動物細胞培養——細胞培養介紹
實驗方法原理目的細胞培養的評判性檢查。應用檢查常規維持的一致性;在復蘇、傳代、凍存前培養狀況的評估;對新的或實驗性情形反應的評估;確認明顯的污染物。訓練目標熟悉不同類型和不同密度的細胞培養的外觀;數碼或膠片相機的使用;滅菌物品和污染物間的區別,健康的和不健康的培養物間的區別;培養物生長階段的評估。監
細胞培養的步驟
細胞培養的步驟:1、細胞復蘇將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。將融化的細胞移入離心管中,加入37℃預熱的DMEM完全培養基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。加入DMEM完全培養基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養基,輕輕吹打混
動物細胞培養的一般步驟是什么
一、復蘇1.把凍存管從液氮中取出來,立即投入37℃水浴鍋中,輕微搖動。液體都融化后(大概1-1.5分鐘),拿出來噴點酒精放到超凈工作臺里。2.把上述細胞懸液吸到裝10ml培養基的15ml的離心管中(用培養基把凍存管洗一遍,把粘在壁上的細胞都洗下來),1000轉離心5分鐘。3.把上清液倒掉,加1ml培
細胞培養細胞培養的具體步驟
一、細胞復蘇將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。移入15ml離心管中,加入10ml預熱的DMEM完全培養基,輕輕吹勻,離心,2000rpmX2min,棄上清液。加入10ml DMEM培養基清洗,棄上清液。加入10ml DMEM完全培養基,輕輕吹打,接種于10cm盤中,在含5
動物細胞培養
動物細胞培養 基本練習 2.2 無菌技術I:吸取與移液 練習2 細胞培養介紹 2.2 無菌技術I:吸取與移液 練習3無菌技術II:準備培養基 練習4:單層細胞的換液 練習5:玻璃器皿的清洗和滅菌 練習
動物、植物細胞培養
動物細胞培養與植物細胞培養和微生物細胞細胞培養相比,動物細胞培養是當中最麻煩的。它需要一些特殊的條件:⑴血清:動物細動物細胞離體培養需要要到血清,通常使用小牛血清。血清相當于動物細胞離體培養的天然營養液,為動物細胞培養提供像礦物質微量元素、脂肪和激素的生長必需因子。⑵支持物:很多動物細胞有貼壁生長的
動物細胞培養和動物細胞培養的區別有哪些?
1、培養基不同:植物細胞(固體培養基),動物細胞(液體培養基)。 2、培養基的成分不同:動物細胞培養必須利用動物血清,植物組織培養則不需要,而需要加入植物生長素。 3、產物不同:植物組織培養最后一般得到新的植物個體,而動物細胞培養因為動物體細胞一般不能表達其全能性,因此得到的是只含同一種的細
細胞培養的操作步驟
一、原代培養及其操作步驟原代分離細胞培養是指從供體內取出組織后,經機械以及消化分離成單個細胞或單一型細胞群,使之在體外模擬人體生理環境,在無菌、適當溫度和一定的營養條件下,生存、生長和繁殖。原代培養細胞常有不同的細胞成分,生長緩慢,但是更能代表所來源的組織細胞類型和表達組織的特異性特征。利用原代細胞
動物細胞培養1
動物細胞的培養對(1)動物體外細胞實驗較體內實驗便利可多次使用具有廣泛的用途(2)藥物和病毒等的機制研究(3)臨床前實驗等的研究。實驗材料動物細胞試劑、試劑盒水磷酸鹽緩沖液PH試紙儀器、耗材移液管細胞培養基紫外燈玻璃器皿
動物細胞培養7
無Ca2+和Mg2+的 Dulbecco 磷酸鹽緩沖液(D-PBSA)的制備與滅菌實驗方法原理目的在常壓下使用的等滲鹽溶液的制備。應用用于稀釋濃縮液.如稀釋2.5%腆蛋白酶;胰蛋自酶消化前的預漂洗,收集細胞或換試劑時的清洗溶液。因為它不含Can+和Mg汁,NaHCO3或葡萄糖,所以不適合長時間孵育。
動物細胞培養方法
體外培養的動物細胞可分為原代細胞與傳代細胞。原代細胞是指從機體取出后立即培養的細胞,進行傳代培養后的細胞即稱為傳代細胞。?任何動物細胞的培養均需從原代細胞培養開始。動物很多組織的細胞,如幼年動物的腎、肺、卵巢、精巢、肌肉及腫瘤等組織的細胞較易培養,而神經細胞等則較難培養。原代細胞培養步驟如下:首先取
動物細胞培養的培養條件簡介
1、無菌、無毒的環境:對培養液和所有培養用具進行無菌處理,通常還要在培養液中加入一定量的的抗生素,以防被污染。此外應定期更換培養液,以便清除代謝產物防止細胞代謝產物累積對細胞自身產生危害。 2、營養物質:無機物(無機鹽、微量元素等),有機物(糖、氨基酸、促生長因子等) 3、血清和血漿 (提供
動物細胞培養的原理
動物細胞在液體培養基上進行正常的生命活動,并發生有絲分裂進行增殖。
動物細胞培養的原理
動物細胞在液體培養基上進行正常的生命活動,并發生有絲分裂進行增殖。
動物細胞培養的定義
動物細胞培養是從動物機體中取出相關的組織,讓它分散成單個細胞,然后放在適宜的培養基中讓這些細胞生長和增殖。培養產品一般是細胞產品或細胞分泌物。
動物細胞培養的應用
培養各種正常或病變的動物細胞,用于生理病理研究。培養動物細胞,用于判斷和檢測某些物質對于細胞的毒性大小。作為動物基因工程的受體細胞。作為皮膚或器官移植的供體細胞。
動物細胞培養的簡介
在所有的細胞離體培養中,最困難的是動物細胞培養。下面是它所需要的特殊條件。 ⑴血清:動物細胞離體培養常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生長必需因子,如激素、微量元素、礦物質和脂肪。在這里,血清等于是動物細胞離體培養的天然營養液。 ⑵支持物:大多數動物細胞有貼壁生長的習慣。離體培養常用
動物細胞培養的要求
動物細胞培養在所有的細胞離體培養中,最困難的是動物細胞培養。下面是它所需要的特殊條件。⑴血清:動物細胞離體培養常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生長必需因子,如激素、微量元素、礦物質和脂肪。在這里,血清等于是動物細胞離體培養的天然營養液。⑵支持物:大多數動物細胞有貼壁生長的習慣。離體培養常用
細胞培養傳代培養的培養步驟
1、附著型胞(adherentcell)(1)吸掉舊培養液。(2)用D-PBS洗滌細胞一至二次。(3)加入trypsin-EDTA溶液(1ml/25cm2,2ml/75cm2),37℃作用數分鐘,于倒立顯微鏡下觀察,當細胞將要分離而呈現圓粒狀時,吸掉trypsin-EDTA溶液。(若不移去tryps
細胞培養原代培養的操作步驟
混勻操作要領(1)火焰消毒吸管,用Hanks液冷卻和濕潤管內壁(這是因為剛分離的組織細胞易粘在管壁上)(2)吸管頭插入管底(3)用吸管反復輕輕吹打組織塊器械的使用(1)用工作臺消毒鑷子取浸泡在酒精中消毒的器械。(2)器械置無菌干紗布內嚓一下。迅速通過火焰,冷卻后使用。(3)用過的器械置另一加蓋的器皿
細胞培養細胞培養的操作步驟及注意事項
一、細胞復蘇將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。移入15ml離心管中,加入10ml預熱的DMEM完全培養基,輕輕吹勻,離心,2000rpmX2min,棄上清液。加入10ml DMEM培養基清洗,棄上清液。加入10ml DMEM完全培養基,輕輕吹打,接種于10cm盤中,在含5
細胞培養,提取pbmc步驟
1、一般取外周血5ml,放置于含有肝素的抗凝管,混勻10余次。2、然后將5ml外周血用無血清1640培養基稀釋一倍,混勻!(新采的外周血最好在2h內提取)3、取另一離心管,加入5ml淋巴細胞分離液(中科院TBD的、不貴100元,200ml),然后將稀釋后的外周血緩慢的沿離心管壁加入(注意一定要緩慢沿
細胞培養的具體步驟
一、細胞復蘇將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。移人15ml離心管中,加入10ml預熱的DMEM完全培養基,輕輕吹勻,離心,2000rpmX2min,棄上清液。加入10ml DMEM培養基清洗,棄上清液。加入10ml DMEM完全培養基,輕輕吹打,接種于10cm盤中,在含5
細胞培養的具體步驟
一、細胞復蘇將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。移入15ml離心管中,加入10ml預熱的DMEM完全培養基,輕輕吹勻,離心,2000rpmX2min,棄上清液。加入10ml DMEM培養基清洗,棄上清液。加入10ml DMEM完全培養基,輕輕吹打,接種于10cm盤中,在含5
細胞培養的具體步驟
一、細胞復蘇將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。移入15ml離心管中,加入10ml預熱的DMEM完全培養基,輕輕吹勻,離心,2000rpmX2min,棄上清液。加入10ml DMEM培養基清洗,棄上清液。加入10ml DMEM完全培養基,輕輕吹打,接種于10cm盤中,在含5
動物細胞培養培養液成分
體外細胞培養所需營養物質與體內基本相同,例如,需要糖、氨基酸、無機鹽、促生長因子、微量元素等。將細胞所需的上述物質按其種類和所需數量嚴格配制而成的培養基,稱為合成培養基。由于動物細胞生活的內環境還有一些成分尚未研究清楚,所以需要加入動物血清以提供一個類似生物體內的環境,因此在使用合成培養基時,通
動物細胞培養——基本練習
實驗方法原理 這部分是一名實習生或學生應當首先接觸的內容。大部分是簡單易懂并易于操作的,為了使實驗比較有趣,操作方案和備選方案以相互參考的方式詳細列出。每一個操作方案中材料部分的指定數量見操作說明,但可以按比例調節。表2.1中黑體部分的練習是必需的。 首先有必要參觀介紹組織培養的設施,這
動物細胞培養主要儀器
一、潔凈間擺放的儀器(一)提供細胞培養環境的儀器l.CO2培養箱指能精密控制并提供恒溫、恒濕、潔凈、恒定CO2濃度的儀器,利用該儀器可使用培養皿、多孔板((6-96孔板)、培養方瓶等進行細胞培養。根據容積大小,有60-190L臺式,也有上下堆疊落地式。根據通氣狀況,一般通CO2和空氣,也有3氣(CO