成功克隆PKD第一個致病基因
近日，來自復旦大學、福建醫科大學與中國科學院上海神經科學研究所的研究人員應用先進的全外顯子測序技術，在8個家族性發作性運動誘發性運動障礙（簡稱為PKD）家系中，發現PRRT2基因上存在3種截短突變，并通過多層次驗證，結合PRRT2基因表達及蛋白定位研究，最終成功克隆了家族性PKD的第一個致病基因PRRT2，這對充分理解該病的分子發病機制以及提高本病臨床診治水平具有深遠意義，它巧妙地解決了20年來困擾國內外學者的難題。這一研究結果11月20日在《自然遺傳》雜志在線發表，該雜志的影響因子達36.377分。 該研究項目由國家自然科學基金和福建省科技計劃項目資助，領銜者是復旦大學附屬華山醫院的吳志英教授與福建醫科大學附屬第一醫院的王檸教授。 PKD也稱為發作性運動誘發性舞蹈手足徐動癥，是一種反復發作的、運動誘發的、持續時間短暫的運動障礙，卡馬西平治療有顯著療效，臨床上易被誤診為癲癇。自1967年首次報道后，陸續有關于散發性和家族......閱讀全文
成功克隆PKD第一個致病基因
近日，來自復旦大學、福建醫科大學與中國科學院上海神經科學研究所的研究人員應用先進的全外顯子測序技術，在8個家族性發作性運動誘發性運動障礙（簡稱為PKD）家系中，發現PRRT2基因上存在3種截短突變，并通過多層次驗證，結合PRRT2基因表達及蛋白定位研究，最終成功克隆了家族性PKD的第一個致病基因
PKD2基因的結構特點和主要作用
這個基因編碼多囊蛋白家族的一個成員。編碼蛋白是一種多程膜蛋白，具有鈣離子通道的功能，參與腎上皮細胞鈣離子轉運和鈣信號轉導該蛋白與多囊蛋白1相互作用，它們可能是參與腎小管形態發生的共同信號級聯的伙伴。該基因突變與常染色體顯性遺傳多囊腎病2型相關。
PKD2基因編碼的功能和結構描述
這個基因編碼多囊蛋白家族的一個成員。編碼蛋白是一種多程膜蛋白，具有鈣離子通道的功能，參與腎上皮細胞鈣離子轉運和鈣信號轉導該蛋白與多囊蛋白1相互作用，它們可能是參與腎小管形態發生的共同信號級聯的伙伴。該基因突變與常染色體顯性遺傳多囊腎病2型相關。This gene encodes a member o
PKD2基因突變因子與藥物介紹
這個基因編碼多囊蛋白家族的一個成員。編碼蛋白是一種多程膜蛋白，具有鈣離子通道的功能，參與腎上皮細胞鈣離子轉運和鈣信號轉導該蛋白與多囊蛋白1相互作用，它們可能是參與腎小管形態發生的共同信號級聯的伙伴。該基因突變與常染色體顯性遺傳多囊腎病2型相關[由RefSeq提供，2011年3月]This gene
基因克隆
外源DNA和質粒載體的連接反應?外源ＤＮＡ片段和線狀質粒載體的連接，也就是在雙鏈ＤＮＡ５'磷酸和相鄰的3'羥基之間?形成的新的共價鏈。如質粒載體的兩條鏈都帶5'磷酸，可生成４個新的磷酸二酯鏈。但如果質粒ＤＮＡ已去磷酸化，則吸能形成２個新的磷酸二酯鏈。在這種情況下產生的兩個雜交
PKD1L2基因的結構特點和主要作用
這個基因編碼多囊蛋白家族的一個成員。編碼的蛋白質包含11個跨膜結構域，即一個脂蛋白/ Cl 1-GPCR蛋白水解位點（GPS）結構域，和一個多囊蛋白-1，脂氧合酶，α毒素（PLAT）結構域。這種蛋白質可能是陽離子通道孔的組成部分這個基因在人類看來是一個多態性假基因，參考基因組編碼一個非功能性等位基因
PKD1L2基因編碼的功能和結構描述
這個基因編碼多囊蛋白家族的一個成員。編碼的蛋白質包含11個跨膜結構域，即一個脂蛋白/ Cl 1-GPCR蛋白水解位點（GPS）結構域，和一個多囊蛋白-1，脂氧合酶，α毒素（PLAT）結構域。這種蛋白質可能是陽離子通道孔的組成部分這個基因在人類看來是一個多態性假基因，參考基因組編碼一個非功能性等位基因
PKD1L2基因突變因子與藥物介紹
這個基因編碼多囊蛋白家族的一個成員。編碼的蛋白質包含11個跨膜結構域，即一個脂蛋白/ Cl 1-GPCR蛋白水解位點（GPS）結構域，和一個多囊蛋白-1，脂氧合酶，α毒素（PLAT）結構域。這種蛋白質可能是陽離子通道孔的組成部分這個基因在人類看來是一個多態性假基因，參考基因組編碼一個非功能性等位基因
1年3篇Science！施一公課題組最新研究發表－解析人源PKD1PKD2
8月10日，清華大學施一公課題組在《Science》期刊發表了結構生物學領域的最新研究成果。值得關注的是，這也是施一公課題組繼今年1月和今年5月后，今年第三次在Science上發文。 腎臟是人體重要的生命器官，具有排出體內代謝產物，調節水、電解質平衡和調節內分泌系統等諸多生理功能。在多種病理條
Cell－Res：神經元突觸囊泡轉運的分子調控新機制
近日，中國科學院上海生命科學研究院神經科學研究所、腦科學與智能技術卓越創新中心、神經科學國家重點實驗室熊志奇研究組，在小腦和運動障礙研究領域取得進展。相關研究成果以《PRRT2缺失造成小腦內的突觸傳遞異常介導陣發性運動誘發性運動障礙》為題，在線發表在Cell Research上。研究人員系統地從
基因克隆技術
一、目的基因的獲得目的基因是指所要研究或應用的基因，也就是將要克隆或表達的基因。獲得目的基因是分子克隆過程中最重要的一步。目前用于獲得目的基因的方法有幾種，如限制性內切酶直接分離法、文庫篩選法、體外擴增法和人工合成法等，其中限制性內切酶法直接分離目的基因和多聚酶鏈式反應（PCR）或逆轉錄-多聚酶鏈式
基因克隆技術
一、目的基因的獲得 目的基因是指所要研究或應用的基因，也就是將要克隆或表達的基因。獲得目的基因是分子克隆過程中最重要的一步。目前用于獲得目的基因的方法有幾種，如限制性內切酶直接分離法、文庫篩選法、體外擴增法和人工合成法等，其中限制性內切酶法直接分離目的基因和多聚酶鏈式反應（PCR）或逆轉錄-
基因的圖位克隆
?圖位克隆(Ｍａｐ-ｂａｓｅｄｃｌｏｎｉｎｇ)又稱定位克隆(ｐｏｓｉｔｉｏｎａｌｃｌｏｎｉｎｇ),1986年首先由劍橋大學的Ａｌａｎｃｏｕｌｓｏｎ提出,用該方法分離基因是根據目的基因在染色體上的位置進行的,無需預先知道基因的ＤＮＡ順序,也無需預先知道其表達產物的有關信息,但應有以下兩方面的基本情況:
肝臟樣本外顯子組測序，揭示肝硬化中的復雜突變景觀
正常組織隨著年齡的增長而累積遺傳變化，但是在慢性退行性疾病的情況下，體細胞突變是否促進非惡性細胞的克隆擴增（clonal expansion）尚不清楚。 在一項新的研究中，來自美國國家糖尿病、消化與腎疾病研究所和德克薩斯大學西南醫學中心的研究人員通過對來自82名患者的患病肝臟樣本進行外顯子組測
基因克隆的載體類型
①在宿主細胞中能保存下來并能大量復制，且對受體細胞無害，不影響受體細胞正常的生命活動。②有多個限制酶（Restriction enzymes）切點，而且每種酶的切點最好只有一個，如大腸桿菌pBR322就有多種限制酶的單一識別位點，可適于多種限制酶切割的DNA插入。③含有復制起始位點，能夠獨立復制；通
基因克隆常見方法
、T4連接酶介導的DNA克隆傳統的分子克隆，通常需要使用相同的限制性內切酶酶切載體和目的片段，使得載體和片段產生相同的粘性或平末端，使用T4 DNA連接酶對其進行連接，轉化，挑取陽性克隆，得到重組質粒為了更方便的對DNA進行克隆，后續又將克隆的載體進行了簡化，出現了T載體，這樣就可以不用酶切，直接將
目的基因的亞克隆
實驗材料?E.coli JM109試劑、試劑盒?牛肉膏胰蛋白胨NaCl微量細菌基因組抽提試劑盒BamH IXho1 核酸內切酶凝膠電泳回收試劑盒儀器、耗材?高速臺式冷凍離心機水平電泳儀漩渦混合儀紫外檢測儀凝膠成像分析系統微量移液器及吸頭
目的基因的亞克隆
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 亞克隆的基本過程包括：(1)目的DNA片段和載體的制備；(2)目的DNA片段和載體的連接；(3)連接產物的轉化；(4)重組子篩選。 實驗材料
“電子”基因克隆－（sillcon－cloning）
利用計算機來協助克隆 基因，稱為“電子”基因克隆 （sillcon cloning），是與定位克隆 、定位候選克隆 策略并列的方法之一，即采用生物信息學的方法延伸EST序列，以獲得基因部分乃至全長的cDNA序列。EST數據庫的迅速擴張，已經并將繼續導致識別與克隆 新基因策略發生革命性變化。1
目的基因的亞克隆
實驗題目 ：目的基因的亞克隆一、實驗目的1、掌握細菌基因組提取的方法和原理。2、掌握限制性核酸內切酶處理基因組及其結果分析。3、掌握基因片段回收的方法。二、實驗原理細菌基因組的提取：通過堿法或者酶法裂解細菌之后，可以將胞內的核酸和蛋白質全釋放出來。DNA溶于1mol/L的NaCl中，不溶于 0.
基因克隆技術1
一、目的基因的獲得目的基因是指所要研究或應用的基因，也就是將要克隆或表達的基因。獲得目的基因是分子克隆過程中最重要的一步。目前用于獲得目的基因的方法有幾種，如限制性內切酶直接分離法、文庫篩選法、體外擴增法和人工合成法等，其中限制性內切酶法直接分離目的基因和多聚酶鏈式反應（PCR）或逆轉錄-多聚酶鏈式
目的基因的亞克隆
目的基因的亞克隆可應用于：（1）進一步分析目的基因；（2）基因重組。實驗方法原理亞克隆的基本過程包括：(1)目的DNA片段和載體的制備；(2)目的DNA片段和載體的連接；(3)連接產物的轉化；(4)重組子篩選。實驗材料E.coli JM109試劑、試劑盒牛肉膏胰蛋白胨NaCl微量細菌基因組抽提試劑盒
基因分離克隆的方法
1 基因芯片技術分離目的基因生物芯片是高密度固定在固相支持介質上的生物信息分子的微列陣。列陣中每個分子的序列及位置都是已知的，并按預先設定好的順序點陣。基因芯片是生物芯片的一種，其上固定的是核算類物質，主要用于DNA、RNA分析。分為DNA芯片和微點陣兩種。分離目的基因是是指從基因組中發現或找出某個
目的基因的亞克隆
目的基因的亞克隆所謂亞克隆就是對已經獲得的目的DNA片段進行重新克隆，其目的在于對目的DNA進行進一步分析，或者進行重組改造等。??? 亞克隆的基本過程包括：(1)目的DNA片段和載體的制備；(2)目的DNA片段和載體的連接；(3)連接產物的轉化；(4)重組子篩選。?一、試劑準備1．LB液體培養基：
基因克隆技術概述
基因克隆技術是分子生物學的核心技術，其目的是獲得某一基因或DNA片段的大量拷貝，用于深入分析基因的結構與功能，并可達到人為改造細胞以及物種遺傳性狀的目的。基因克隆的一項關鍵技術是DNA重組技術，它利用酶學方法將不同來源的DNA分子進行體外特異性切割，重新拼接組裝成一個新的雜合DNA分子。在此基礎上將
基因克隆的常用方法
基因克隆的常用方法 基因(gene)是遺傳物質的最基本單位,也是所有生命活動的基礎。不論要揭示某個基因的功能,還是要改變某個基因的功能,都必須首先將所要研究的基因克隆出來。特定基因的克隆是整個基因工程或分子生物學的起點。本文就基因克隆的幾種常用方法介紹如下。
Nature揭示新型癌癥致病基因
來自英國癌癥研究中心(Cancer Research UK)的科學家們在小鼠中發現了一個防止卵巢癌的新基因，如果其發生缺陷就可以提高形成這一疾病的機會。這項研究發表在9月4日的《自然》(Nature)雜志上。 這一稱作為HELQ的基因，可幫助修復細胞增殖時DNA復制過程中所發生的所有的
NatureGenetics揭示兒童癌癥致病基因
來自約翰霍普金斯大學Kimmel癌癥中心和費城兒童醫院(CHOP)的科學家們在對74個兒童神經母細胞瘤進行全基因組測序后，發現ARID1A和ARID1B兩個基因發生改變的患兒相比無此基因改變的患兒生存期縮短了四分之三。這一發現有可能最終導致早期確認患有侵襲性神經母細胞瘤的兒童，他們或許需要接受其
Cell子刊：基因測序揭示血癌致病基因
由圣猶他兒童研究醫院-華盛頓大學兒科癌癥基因組計劃領導的一項研究證實一種融合基因導致了一種預后極差的罕見兒童白血病亞型30%的病例。 研究結果提供了首個證據表明一種錯誤導致了顯著比例的兒童急性巨核細胞白血病(AMKL)。AMKL約占兒童急性髓系白血病(AML)的10%。這一發現為推動迫切所
癲癇的鑒別診斷
（一） 暈厥（syncope）表現為突然短暫的可逆性意識喪失伴姿勢性肌張力減低或消失，由全腦血灌注量突然減少引起，并隨著腦血流的恢復而正常。該疾病有精神緊張、疼痛刺激等等誘因，可有較長前驅癥狀，站立或坐位多見，皮膚蒼白，發作后無意識模糊和自動癥，無驚厥伴尿失禁及舌咬傷，發作間期腦電圖正常。 （