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收集渾濁帶分離獲得的淋巴細胞，用無鈣、鎂離子的PBS洗3次后，再用培養基洗1次后計數，分瓶培養。此法分離獲得淋巴細胞純度高。分離液的制備：9% Ficoll（20℃下相對密度約1.020）24份與33.4%泛影葡胺（用泛影鈉或Conray400也可，在20℃下相對密度約1.200）10份混合后，將其相對密度調至1.077金額可獲得淋巴細胞分離液，于121℃高壓蒸汽滅菌30min，室溫保存備用。若配制高相對密度的分離液用加入高濃度泛影葡胺來調整，若配制低相對密度的分離液用稀釋的Ficoll來調整。 （二）淋巴器官中淋巴細胞的分離： 從脾臟、淋巴結、扁桃體或胸腺等器官中制備淋巴細胞懸液，在免疫學研究中是經常用到的。方法如下。 無菌取上述淋巴器官，若為扁桃體，應將扁桃體在剝離外表的結締組織和血塊后，在含高濃度抗生素的洗液中4℃浸泡2-4h，以防污染。 將淋巴器官剪成碎塊，用鑷子壓擠碎塊，或在金屬絲網上研磨，用洗液沖......閱讀全文
引言隨著廣譜抗菌藥物的廣泛應用、多種侵入性診療手段的普遍應用以及各種原因導致的免疫功能低下患者的日益增加, 血流感染的患病率呈逐年上升的趨勢。美國的統計數據顯示, 血流感染連續多年位于疾病死亡率排名前10位。國內報道院內血流感染的總死亡率平均為30%~40%。相對傳統培養鑒定流程, 基質輔助激光解析
本文介紹幾種常見的微生物基礎試驗的目的、原理、內容等,以便剛剛接觸微生物的同志們對試驗有個基本的認識. 實驗一 常用培養基的制備、滅菌與消毒一、實驗目的 1、掌握配制培養基的一般方法和步驟;掌握干熱天菌、高壓蒸汽滅菌及過濾除菌的操作方法;
原代細胞的培養與建系 細胞的來源多樣，培養方法也各不相同，凡是來源于胚胎、組織器官及外周血，經特殊分離
快速、準確鑒定血流感染病原菌是微生物實驗室的一項重要工作。血培養報陽后傳統的轉種和生化表型鑒定方法至少需要48 h, 而通過對血培養陽性樣本的前處理, 借助基質輔助激光解析電離飛行時間質譜（matrix-assisted laser desorption ionization-time of fli
本文介紹幾種常見的微生物基礎試驗的目的、原理、內容等,以便剛剛接觸微生物的同志們對試驗有個基本的認識. 實驗一 常用培養基的制備、滅菌與消毒一、實驗目的 1、掌握配制培養基的一般方法和步驟;掌握干熱天菌、高壓蒸汽滅菌及過濾除
實驗方法原理 采用植塊培養方法時，用少量培養液孵育，使骨組織塊貼附于培養瓶。骨組織塊浮起后觀察細胞長出情況。采用分離細胞的單層培養方法時，將松質骨切成 2~5 mm 大小，用膠原蛋白酶和胰蛋白酶消化。將混懸的細胞接種于培養瓶，用 F12 培養液培養。試劑、試劑盒 Hams F12 培養液用于細胞傳代
實驗步驟 一、桿狀病毒表達載體 最簡單的經典桿狀病毒表達載體是一個重組的桿狀病毒，其基因組含有一段外源核酸序列，通常為編碼目標蛋白質的dDNA，在多角體蛋白啟動子控制下進行轉錄。這個嵌合的基因由多角體蛋白啟動子和外源蛋白編碼序列組成
（一）一般光學顯微鏡術應用一般光學顯微鏡（簡稱光鏡）觀察組織切片是組織學研究的最基本方法。取動物或人體的新鮮組織塊，先用固定劑（fixative）固定（fixation），使組織中的蛋白質迅速凝固，防止細胞自溶和組織腐敗。常用的固定劑如灑精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化鋨等，一般常將幾種固定劑配制成混
實驗方法原理 采用植塊培養方法時，用少量培養液孵育，使骨組織塊貼附于培養瓶。骨組織塊浮起后觀察細胞長出情況。采用分離細胞的單層培養方法時，將松質骨切成 2~5 mm 大小，用膠原蛋白
成骨細胞原代培養實驗 實驗方法原理 采用植塊培養方法時，用少量培養液孵育，使骨組織塊貼附于培養瓶。
Nk細胞又稱自然殺傷細胞，是人體內抗癌活性最強的免疫細胞之一，它在骨髓中發育成熟后，主要存在于外周血、肝臟、腹膜腔和胎盤中，在遇到腫瘤病變細胞時就會把它們殺死，同時也會刺激身體產生抗腫瘤的免疫反應，所以被醫學界稱為“抗癌的第一道防線”。NK細胞主要分布于外周血，占外周血淋巴細胞總數的5-10％，無需
實驗方法原理 這一程序改自最先由 Daryl Stafford 及其同事描述的方法（Blin and Stanfford 1976)。 當需要大量哺乳動物 DNA，如用于 Somhe
實驗概要本實驗介紹了微生物分離和純化的基本原理，旨在掌握常用的分離純化微生物的方法、菌落特征的觀察、微生物的幾種接種技術、建立無菌操作的概念及無菌操作的基本環節。實驗原理從混雜微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過程稱為微生物分離與純化。平板分離法普遍用于微生物的分離與純化。其基本原理是選擇
實驗方法原理采用植塊培養方法時，用少量培養液孵育，使骨組織塊貼附于培養瓶。骨組織塊浮起后觀察細胞長出情況。采用分離細胞的單層培養方法時，將松質骨切成 2~5 mm 大小，用膠原蛋白酶和胰蛋白酶消化。將混懸的細胞接種于培養瓶，用 F12 培養液培養。 實驗材料骨標本試劑、試劑盒Hams F1
這一程序改自最先由 Daryl Stafford 及其同事描述的方法（Blin and Stanfford 1976)。 當需要大量哺乳動物 DNA，如用于 Somhern 雜交或者用噬菌體 λ 載體構建基因組文庫時，應選用這一方法。從 5X107 培養的非整倍體細胞 ( 如 HeLa 細
第六節 自動化技術在微生物檢驗中的應用 微生物鑒定的自動化技術近十幾年得到了快速發展。數碼分類技術集數學、計算機、信息及自動化分析為一體，采用商品化和標準化的配套鑒定和抗菌藥物敏感試驗卡或條板，可快速準確地對臨床數百種常見分離菌進行自動分析鑒定和藥敏試驗。目前自動化微生物鑒定和藥敏分析系統已
第六節 自動化技術在微生物檢驗中的應用 微生物鑒定的自動化技術近十幾年得到了快速發展。數碼分類技術集數學、計算機、信息及自動化分析為一體，采用商品化和標準化的配套鑒定和抗菌藥物敏感試驗卡或條板，可快速準確地對臨床數百種常見分離菌進行自動分析鑒定和藥敏試驗。目前自動化微生物鑒定和藥敏分析系統已在世界
微生物的分離純化和計數一般用于（1）某些產品檢定，如根瘤菌劑等產品檢定，生物制品檢驗；（2）土壤含菌量測定；（3）食品、水源的污染程度的檢驗。實驗方法原理一、自然條件下，微生物常以群落狀態存在，這種群落往往是不同種類微生物的混合體。為了研究某種微生物的特性或者要大量培養和使用某種微生物，必須從這些混
分離培養細胞 實驗方法原理 骨豁肌源性成肌細胞能夠培養從幾種成年動物骨骼肌分離的成肌細胞。在培養條
分離培養細胞 實驗方法原理 骨豁肌源性成肌細胞能夠培養從幾種成年動物骨骼肌分離的成肌細胞。在培養條
一、 實驗目的 1、了解微生物 分離和純化的原理；2、掌握常用的分離純化微生物的方法；3、掌握菌落特征的觀察。4、學習掌握微生物的幾種接種技術 5、 建立無菌操作的概念，掌握無菌操作的基本環節二、實驗原理 從混雜微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過程稱為微生物分
4、從3中所獲得的中性粒細胞進行純化 1）因為方法3只能獲得80－85%純度的中性粒細胞，可以把方法2與方法3聯合對中性粒細胞進行純化。 2）收集從方法3 dextran沉降所得到的富含白細胞的血漿，275g*6min，離心。
實驗步驟一、材料1. 胞質分裂阻滯微核試驗2. 微核的著絲點檢測(1)從硬皮病 C R E S T 亞型的患者中取得的血清樣本。(2) F I T C 標記的兔抗人 I g G 二抗。(3) 過氧化物酶標記的兔抗人 I g G 。(4) 二胺基聯苯溶液（D A B ): I m g /m L 溶于
實驗步驟 一、材料 1. 胞質分裂阻滯微核試驗 2. 微核的著絲點檢測 (1)從硬皮病 C R E S T 亞型的患者中取得的血清樣本。 (2) F I T C 標記的兔抗人 I g G 二抗。 (3) 過氧化物酶
基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜(matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)是20世紀80年代發展起來的一種新型軟電離有機質譜, 作為一種新興的蛋白質組學
基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜(matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)是20世紀80年代發
基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜(matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)是20世紀80年代發展起來的一種新型軟電離有機質譜, 作為一種新興的蛋白質組學檢測技
骨豁肌源性成肌細胞能夠培養從幾種成年動物骨骼肌分離的成肌細胞，可用于（1）肌細胞的結構研究（2）肌細胞功能研究（3）對肌細胞的相關課題研究（4）臨床細胞移植。實驗方法原理骨豁肌源性成肌細胞能夠培養從幾種成年動物骨骼肌分離的成肌細胞。在培養條件下，成肌細胞仍繼續表達一些分化特征。成肌細胞稱衛星細胞，分
實驗方法原理 做透射電鏡觀察需進行切片、固定和包埋細胞過程，與一般組織切片法大體相似，其最大的難題是如何把細胞完整無損地從培養瓶皿壁上包埋下來。自從定型產品塑料薄膜問世后，這一困難已被克服。應用無菌塑料薄膜是極其理想的支持物，比用蓋玻片、微孔濾紙、云母和卵殼膜等支持物都好。把細胞直接培養在塑料薄膜上
實驗方法原理 這一程序改自最先由 Daryl Stafford 及其同事描述的方法（Blin and Stanfford 1976)。 當需要大量哺乳動物 DNA，如用于 Somhern 雜交或者用噬菌體 λ 載體構建基因組文庫時，應選用這一方法。從 5X107 培養的非整倍體細胞 ( 如