血細胞分離培養方法和步驟2
收集渾濁帶分離獲得的淋巴細胞，用無鈣、鎂離子的PBS洗3次后，再用培養基洗1次后計數，分瓶培養。此法分離獲得淋巴細胞純度高。分離液的制備：9% Ficoll（20℃下相對密度約1.020）24份與33.4%泛影葡胺（用泛影鈉或Conray400也可，在20℃下相對密度約1.200）10份混合后，將其相對密度調至1.077金額可獲得淋巴細胞分離液，于121℃高壓蒸汽滅菌30min，室溫保存備用。若配制高相對密度的分離液用加入高濃度泛影葡胺來調整，若配制低相對密度的分離液用稀釋的Ficoll來調整。 （二）淋巴器官中淋巴細胞的分離： 從脾臟、淋巴結、扁桃體或胸腺等器官中制備淋巴細胞懸液，在免疫學研究中是經常用到的。方法如下。 無菌取上述淋巴器官，若為扁桃體，應將扁桃體在剝離外表的結締組織和血塊后，在含高濃度抗生素的洗液中4℃浸泡2-4h，以防污染。 將淋巴器官剪成碎塊，用鑷子壓擠碎塊，或在金屬絲網上研磨，用洗液沖......閱讀全文
接種、分離純化和培養技術
一、接種將微生物接到適于它生長繁殖的人工培養基上或活的生物體內的過程叫做接種.1、接種工具和方法在實驗室或工廠實踐中,用得最多的接種工具是接種環、接種針.由于接種要求或方法的不同,接種針的針尖部常做成不同的形狀,有刀形、耙形等之分.有時滴管、吸管也可作為接種工具進行液體接種.在固體培養基表面要將菌液
接種、分離純化和培養技術
一、接種 將微生物接到適于它生長繁殖的人工培養基上或活的生物體內的過程叫做接種。１、接種工具和方法 在實驗室或工廠實踐中，用得最多的接種工具是接種環、接種針。由于接種要求或方法的不同，接種針的針尖部常做成不同的形狀，有刀形、耙形等之分。有時滴管、吸管也可作為接種工具進行液體接種。在固體培養基表面
葉綠素的提取和分離實驗步驟
提取：（1） 取菠菜或其他植物新鮮葉片4-5片（2g左右），洗凈，擦干，去掉中脈剪碎，放入研。（2） 研缽中加入少量石英砂及碳酸鈣粉，加2-3ml 95％乙醇，研磨至糊狀，再加10-15ml 95％乙醇，離心35min，提取上清液過濾于三角瓶中，殘渣用10ml 95％乙醇沖洗，一同過濾于三角瓶中。（
葉綠素的提取和分離實驗步驟
提取：（1） 取菠菜或其他植物新鮮葉片4-5片（2g左右），洗凈，擦干，去掉中脈剪碎，放入研。（2） 研缽中加入少量石英砂及碳酸鈣粉，加2-3ml 95％乙醇，研磨至糊狀，再加10-15ml 95％乙醇，離心35min，提取上清液過濾于三角瓶中，殘渣用10ml 95％乙醇沖洗，一同過濾于三角瓶中。（
新生大鼠心臟細胞的分離和培養實驗_分離及培養程序
實驗材料Sprague Dawley 幼鼠試劑、試劑盒胰酶液乙醇儀器、耗材攪拌臺燒杯實驗步驟組織消化和分離細胞1. 在細胞操作間內，放一個加熱攪拌臺，上放一個裝有 100 ml 滅菌水的容量 600 ml 的燒杯，加熱至 37℃。2. 準備胰酶液。用水浴或溫箱使胰酶液溫度保持在 37℃。3. 做一個
細菌的分離培養、純培養和生化試驗
一、目的掌握細菌 ?培養、純培養與基本微生物操作技能，了解生化試驗原理、方法和意義。二、實驗內容（一）細菌的分離培養：傾注法和劃線法（傾注法：此法很少應用）本次試驗采用前一種方法）劃線法：融化普通瓊脂 ?培養基，倒平板，雜檢。取1號菌如圖1之一方法劃線，37℃培養24h。(二) 釣菌和純培養：觀察菌
細菌的分離培養、純培養和生化試驗
一、目的 掌握細菌 ?培養、純培養與基本微生物操作技能，了解生化試驗原理、方法和意義。 二、實驗內容（一）細菌的分離培養：傾注法和劃線法（傾注法：此法很少應用）本次試驗采用前一種方法）劃線法： 融化普通瓊脂 ?培養基，倒平板，雜檢。取1號菌如圖1之一方法劃線，37℃培養24h。
質壁分離實驗的方法步驟
選材：(1)選用紫色特別深的洋蔥外表皮；說明：Ⅰ：在實驗之前，最好將洋蔥放在水中浸泡一下，可以使洋蔥吸水多一些，而且代謝也比較旺盛，實驗效果明顯。Ⅱ：將洋蔥的外層剝去兩層，因為處于最外的可能已經死亡。(2)取表皮：在洋蔥的外表皮上，用刀片劃“井”字，用鑷子輕輕撕取一小塊；關鍵：最好撕取單層細胞，如果
培養嗜酸乳桿菌的器材和詳細的方法步驟
儀器及器皿THZ-C恒溫震蕩器,LRH-250生化培養箱,LDZX-50FB立式電熱壓力蒸汽滅菌器,SW-CJ-1F潔凈工作臺，百分之一電子天平，生物顯微鏡， 18×150試管,90mm培養皿，500ml三角瓶，10ml刻度吸管，1ml移液槍，吸耳球，玻璃珠（直徑4-6mm），pH試紙（5.5-9.
細胞培養用液的配制具體步驟與消毒方法2
六．血清的滅活細胞培養常用的是小牛血清，新買來的血清要在56℃ 水浴中滅火30分鐘后，再經過抽濾方可加入培養基中使用。七.HEPES溶液HEPES的化學全稱位羥乙基呱嗪乙硫磺酸（N’-a-hydroxythylpiperazine-N’- ethanesulfanic acid ）。對細胞無毒性
簡述細菌培養的步驟方法
以光合細菌培養方法為例。光合細菌培養的方法，按次序分為容器、工具的消毒，培養基的制備，接種和培養管理四個步驟。 （一）容器、工具的消毒參考、此處從略。 （二）培養基的制備 1．培養用水 如果培養的光合細菌是淡水種，菌種培養可用蒸餾水，生產培養可用消毒的自來水（或井水）配制。如果培養的光合
脂筏的分離和應用2
輔 助 方 案 4 DEAE 葡聚糖凝膠的制備材料D E A E 葡聚糖凝膠 A -25lmol/L N a O H0.5 m o l / L 乙酸：將 57. 5m l 的冰乙酸稀釋于2 L 水中甲醇溶 劑 A : 30 : 60 : 8 (V /V /V ) 氯仿/甲醇/水4L 側臂燒瓶帶濾 紙
微生物的接種、分離和培養以及無菌操作和接種室...（2）
2、平板劃線分離法平板劃線分離法是接種環在平板培養基表面通過分區劃線而達到分離微生物的一種方法。其原理是將微生物樣品在固體培養基表面多次作“由點到線”稀釋而達到分離目的。（1）倒平板 溶化牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基倒平板，水平靜置待凝。（2）在酒精燈光焰上灼燒接種環，待冷，取一接種環金黃葡萄球菌、大腸桿
血細胞的分離實驗技術
采血??（一）材料與試劑?1．抗凝劑（1）肝素：肝素是含硫酸基的粘多糖，常用其鈉鹽或鉀鹽，它能阻止凝血酶原轉化為凝血酶，進而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白，從而阻止血液凝固。常用的肝素溶液濃度為1 000U/ml，市售肝素多為100U~126U／mg。（2）乙二胺四乙酸（EDTA）：是一種螯合劑。用生理
血細胞的離心分離
在現代臨床醫學研究中，常常需要將全血中單核白細胞（淋巴細胞、大單核細胞）與紅細胞和多形核白細胞分離。在臨床治療應用中常常需要將全血作成分分離（全血分離成血漿，血小板，白細胞，紅細胞等等）（一）血細胞的實驗室純化：血液中存在著各種不同類型的血細胞，每種類型細胞有不同的特點和功能。醫學研究常常需要較純的
微生物分離培養和鑒定
1.培養基的選擇用自動血培養分析儀時選用相應的血培養瓶，如需氧+厭氧，需氧+高滲等。2.分離和鑒定 當觀察有細菌生長時或血培養儀陽性報警時，應及時作如下檢驗：（1）涂片染色鏡檢，結果及時與臨床聯系；（2）轉種血平板、巧克力平板、厭氧血平板或其他特殊培養基等分離培養純菌再進行鑒定；（3）同時做藥敏試驗
小鼠角質細胞的分離和培養
實驗步驟1) 將 1~2 天齡新生裸鼠窒息后，置于培養皿中，用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗凈裸鼠, 流水徹底沖洗，然后用 70% 乙醇洗兩次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3) 將小鼠從尾巴至鼻子的皮膚作一簡單切口，用大鼠牙齒鑷輕輕將整個身體的皮膚剝下，用一把鑷子夾住身體，另一把鑷子拉開皮膚。4) 將
接種、分離純化和培養技術（一）
一、接種 將微生物接到適于它生長繁殖的人工培養基上或活的生物體內的過程叫做接種。１、接種工具和方法 在實驗室或工廠實踐中，用得最多的接種工具是接種環、接種針。由于接種要求或方法的不同，接種針的針尖部常做成不同的形狀，有刀形、耙形等之分。有時滴管、吸管也可作為接種工具進行液體接種。在固體培養基表面
小鼠角質細胞的分離和培養
實驗試劑HBSS：?NaCl 8g/LKCl 400mg/LKH2PO4?60mg/L無水Na2PO4?47.86mg/L無水葡萄糖 1000mg/LNaHCO3?350mg/L實驗材料妊娠期BALB/c小鼠實驗步驟1. 將1~2天齡新生裸鼠窒息后，置于培養皿中，用1%碘聚乙烯吡咯烷酮液洗凈裸鼠，流
接種、分離純化和培養技術（二）
二、分離純化 含有一種以上的微生物培養物稱為混和培養物（Mixed culture）。如果在一個菌落中所有細胞均來自于一個親代細胞，那么這個菌落稱為純培養（Pure culture）。在進行菌種鑒定時，所用的微生物一般均要求為純的培養物。得到純培養的過程稱為分離純化，方法有許多種。１、傾注平板法
小鼠角質細胞的分離和培養
實驗試劑HBSS： NaCl 8g/LKCl 400mg/LKH2PO4 60mg/L無水Na2PO4 47.86mg/L無水葡萄糖 1000mg/LNaHCO3 350mg/L實驗材料妊娠期BALB/c小鼠實驗步驟將1~2天齡新生裸鼠窒息后，置于培養皿中，用1%碘聚乙烯吡咯烷酮液洗凈裸鼠，流水徹底
小鼠角質細胞的分離和培養
實驗步驟 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 1) 將 1~2 天齡新生裸鼠窒息后，置于培養皿中，用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗凈裸鼠, 流水徹底沖洗，然后用 70% 乙醇洗兩次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3)
小鼠角質細胞的分離和培養
實驗概要本實驗是根據Hennings等（1980）的方法改進而來的。該方案也適用于原代大鼠角質細胞的分離。主要試劑HBSS： NaCl 8g/L KCl 400mg/L KH2PO4 60mg/L 無水Na2PO4 47.86mg/L 無水葡萄糖 1000mg/L NaHCO3 350mg/L實驗
小鼠角質細胞的分離和培養
實驗步驟 1) 將 1~2 天齡新生裸鼠窒息后，置于培養皿中，用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗凈裸鼠, 流水徹底沖洗，然后用 70% 乙醇洗兩次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3) 將小鼠從尾巴至鼻子的皮膚作一簡單切口，用大鼠牙齒鑷輕輕將整個身體的皮
細菌分離培養的基本要領和常用方法有哪些
一、基本要領菌種分離主要在培養皿上進行，常用的方法是稀釋法和劃線法。菌種分離的目的是是微生物的一個個體通過繁殖，在固體培養基上長出肉眼能見的群體，然后根據培養特征，用接種針調取所需菌種并在顯微鏡下檢查，證明為單一形狀的菌體。改變培養基條件也有助于菌種分離。沒有一種培養基或一種培養條件能夠滿足一切微生
小鼠海馬神經元細胞分離培養的步驟詳解
??小鼠神經元細胞中神經元是構成神經系統結構和功能的基本單位。細胞體位于腦、脊髓和神經節中，細胞突起可延伸至全身各器官和組織中。? ?（1）75%（體積分數）酒精消毒新生24h內的健康C57小鼠，在無菌條件下脫頸處死，剪開頭皮及顱骨，取出腦組織，置于盛冷的pH7.2，無鈣、鎂的D-Hank'
酶的分離純化方法介紹2
4.泡沫分離原理：將氣體通入含多種組分的溶液中，由于這些組分的表面活性由差異，因此在溶液的表面，某些組分將形成泡沫，泡沫的穩定性取決于操作條件及溶液的生物學特性。泡沫中含有更多的表面活性成分，故泡沫的組分種類及其含量與溶液中的不相同。這樣，溶液中的組分舅得以分離。蛋白質較易吸附與氣液界面，這有利于其
識別血細胞的方法和要點
??? 識別血細胞時一定要細心，根據血細胞的結構和發育演變規律，再來定該細胞的類型。一般按以下程序進行，即細胞的大小形態、邊緣是否整齊、有無偽足突出、核漿的比例、漿的多少和色澤、顆粒的有無、性質、多少、大小和分布情況；核的大小形態、核染色質結構及核仁的有無、數目、大小、形態和染色等，不能只就細胞的粗
識別血細胞的方法和要點
?? 識別血細胞時一定要細心，根據血細胞的結構和發育演變規律，再來定該細胞的類型。一般按以下程序進行，即細胞的大小形態、邊緣是否整齊、有無偽足突出、核漿的比例、漿的多少和色澤、顆粒的有無、性質、多少、大小和分布情況；核的大小形態、核染色質結構及核仁的有無、數目、大小、形態和染色等，不能只就細胞的粗略
分離培養技術的材料與方法
1、材料（1）培養基：培養支原體用培養基。（2）器材及試劑：L玻棒、馬血清、抑菌劑。2、方法（1）標本的采集;支原體常侵及人和動物的黏膜表面，可用滅菌棉拭子取分泌物接種于2—3ml支原體液體培養基的小管中。若標本是組織塊，可在滅菌乳缽或玻璃勻漿器中研成乳漿后接種。取樣后應盡快接種培養。分離培養：接種