如何從T25瓶中轉移sf9細胞？能用胰蛋白酶消化嗎？
我們強力推薦使用脫落細胞的方法，因為這項技術破壞性最小，生活力最高。通過使用巴氏德吸液管，讓細胞上培養基流動。作為一種選擇你也可以輕輕拍打培養瓶。只有在絕對必要的情況下，才使用胰酶消化細胞。胰酶消化一個T25瓶的sf9細胞：1)去除培養基。2) 用2ml 1xPBS（足以覆蓋細胞表面）洗滌細胞，去除PBS.3) 加入2ml 1x胰酶EDTA（恰好覆蓋細胞表面）。4) 37 ℃孵育5到10分鐘。在儀器下檢測看到5分鐘后它們正在向上移動。5) 向細胞中加入2ml 細胞培養液，移入錐形管，用2ml培養液洗瓶壁，移入同一錐形管中。（培養基中的FBS終止了胰酶的活性。）6) 離心（1100rpm）沉淀細胞。去除培養基。7) 用新的培養基重新懸浮細胞。傳代。 24.在Sf9, Sf21, 和high Five細胞懸浮培養時，肝素的使用量是多少？ 為了防止懸浮培養細胞聚集的形成，使用肝素濃度為10單位/毫升細胞懸液。 ......閱讀全文
如何從T25瓶中轉移sf9細胞？能用胰蛋白酶消化嗎？
我們推薦使用脫落細胞的方法，此技術破壞性最小，生活力最高。通過使用巴斯德吸液管，讓細胞上培養基流動。作為一種選擇你也可以輕輕拍打培養瓶。只有在絕對必要的情況下，才使用胰酶消化細胞。
如何從T25瓶中轉移sf9細胞？能用胰蛋白酶消化嗎？
我們強力推薦使用脫落細胞的方法，因為這項技術破壞性最小，生活力最高。通過使用巴氏德吸液管，讓細胞上培養基流動。作為一種選擇你也可以輕輕拍打培養瓶。只有在絕對必要的情況下，才使用胰酶消化細胞。胰酶消化一個T25瓶的sf9細胞：1)去除培養基。2) 用2ml 1xPBS（足以覆蓋細胞表面）洗滌細胞，
胰酶消化一個T25瓶的sf9細胞
1. 去除培養基。 2. 用2ml 1xPBS（足以覆蓋細胞表面）洗滌細胞，去除PBS。 3. 加入2ml 1x胰酶EDTA（恰好覆蓋細胞表面）。 4. 37 ℃孵育5到10分鐘。在儀器下檢測看到5分鐘后它們正在向上移動。 5. 向細胞中加入2ml 細胞培養液，移入錐形管，用2ml培養液洗瓶壁，移入
細胞培養常見問題與解答4
22.在High Five無血清培養基中去污劑的濃度是多少？ High Five無血清培養基中去污劑的濃度：0.025 g/L Tween-80，1.0 g/L Pluronic Poly-all。 23.High Five細胞用多大的密度凍存？ 3.0x10E6 ce
細胞培養基的幾個問題
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細胞培養大攻略5
24、昆蟲細胞培養的最適PH值和滲透壓是多少？? ?生長培養基的PH值對細胞的增值和病毒或重組蛋白的生產均會產生影響。對于大部分鱗翅類昆蟲細胞系，在PH值 6.0－6.4范圍的大部分應用效果良好。培養鱗翅類昆蟲細胞系時，培養基的最適滲透壓是 345－380 mOsm/kg.。為保證可靠和持久的細胞培
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26、PFHM-II 和HYBRIDOMA-SFM之間有什么差別？ PFHM-II (Protein-free Hybridoma Medium)是不包含有蛋白質的單克隆抗體生產培養基。如果作為雜交瘤生產培養基使用，PFHM-II可能需要補充低水平的血清。HYBRIDOMA-SFM即是雜交瘤生產培養
怎樣將細胞從培養瓶中種到96孔板
總結下各種孔板細胞接種量僅供參考細胞培養瓶（板）生長面積容量與細胞數（大約）96孔板 4~5X104 35mm培養皿 1X106 48孔板 1.3X105 60mm培養皿 2.6X10624孔板 2.5X105 100mm培養皿 7X10612孔板 5X10 5 150mm培養皿 1.8X1076孔
臍血臍帶中干細胞分離實驗—非限制性體干細胞的分離
實驗材料臍帶血來源的MNCs(CB-MNCs)試劑、試劑盒滅菌起始培養基擴增培養基0.05%的胰蛋白酶含EDTAPBSA儀器、耗材T25培養瓶實驗步驟(a)制備和分離臍帶血來源的MNCs(CB-MNCs)。(b)如果使用凍存的CB-MNCs,復蘇的細胞可以用于培養，不需要其他分離步驟。(c)用起始培
非限制性體干細胞（USSCs）的分離
試劑和材料：?1.?起始培養基；2.?擴增培養基；3.?0.05%胰蛋白酶，含EDTA；4.?PBSA；5.?T25培養瓶；實驗方法：1.?制備和分離臍帶血來源的MNCs（CB-MNCs）；2.?如果使用凍存的CB-MNCs，復蘇的細胞可以用于培養，不需要其他分離步驟；3.?用起始培養基按5×106
臍血臍帶中干細胞分離實驗
實驗方法原理 實驗材料 臍帶血來源的MNCs(CB-MNCs)試劑、試劑盒 滅菌起始培養基擴增培養基0.05%的胰蛋白酶含EDTAPBSA儀器、耗材 T25培養瓶實驗步驟 (a)制備和分離臍帶血來源的MNCs(CB-MNCs)。(b)如果使用凍存的CB-MNCs,復蘇的細胞可以用于培養，不需要其他分
臍血臍帶中干細胞分離實驗
非限制性體干細胞（unrestricted somatic stem cells，USSCs)的分離 臍血來源胚胎樣干細胞（cord blood-derived embryonic-like stem cells，CBEs)的分離 臍血來源多能前體細胞（cor
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養huvecs細胞變大了還能用嗎
用cck8測過的細胞還可以繼續養化學法合成生物柴油有以下缺點：反應溫度較高、工藝復雜；反應過程中使用過量的甲醇，后續工藝必須有相應的醇回收裝置，處理過程繁復、能耗高；油脂原料中的水和游離酸會嚴重影響生物柴油得率及質量；產品純化復雜，酯化產物難于回收；反應生成的副產物難于去除，而且使用酸堿催化劑產生大
懸浮細胞能用培養皿養嗎
體外培養細胞重要的生長特點有：貼附和伸展以及接觸抑制和生長的密度限制。貼附并伸展，是多數體外培養細胞的基本生長特點。雖然血細胞如淋巴細胞在活體體內并無聚集的傾向并在體外可于懸浮狀態中生長，但是大多數的哺乳動物細胞在體內和體外均附著于一定的底物而生長，在體外時這些底物可以是其他細胞、膠原、玻璃或塑
OVCAR3細胞;人卵巢腺癌細胞
培養條件：?胎牛血清至終濃度為10％。環境：空氣，95％;二氧化碳（CO2），5％；溫度，37℃細胞凍存：?液氮凍存（凍存液基礎培養基+20%FBS+10%DMSO）細胞運輸：?干冰運輸（2ml凍存管）或活細胞運輸（T25瓶）注意事項凍存細胞接收后的處理：1.干冰運輸，收到細胞后立即轉入-80℃冰箱
使用二氧化碳培養箱培養HCC827細胞
? ?凍存細胞接收后的處理：? ? ? ?1.干冰運輸，收到細胞后立即轉入-80℃冰箱短暫中轉或直接復蘇；? ? ? ?2.收到細胞后，若發現干冰已經完全揮發、凍存管瓶蓋破裂脫落,請立即拍照后與我們聯系。?? ? ? ?復蘇細胞接收后的處理：? ? ? ?1.收到細胞后，請首先檢查培養瓶是否破損或漏
寡轉移非小細胞肺癌可以從局部治療中獲益
非小細胞肺癌(NSCLC)是全球癌癥死亡的主要原因,臨床研究發現約50%的患者被診斷出肺癌時已經發生了遠處轉移。長久以來，手術/放療等局部治療手段應用范圍多限于局限期非小細胞肺癌。ⅢB、Ⅳ期的NSCLC患者只能通過系統性的治療進行攻克。然而治療效果往往不理想，患者的5年生存率不到1%，中位生存期
影響心肌細胞差速貼壁的因素總結
大部分文獻報導差速時間是2小時，但我個人做實驗是遇到的情況說明2小時有些長了，已經有心肌細胞貼壁，而且把上層懸液吸出后轉移，不知道為什么不好帖壁，成活率較低。我用的是0.125%胰酶分次消化。我覺得影響心肌細胞貼壁的因素可以總結為如下幾點：1、所用老鼠的品系以及年齡SD大鼠和Wister大鼠還是有很
胰蛋白酶，組織細胞消化的理想之選
胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），CAS：9002-07-7，為蛋白酶的一種，EC3.4.4.4，是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。來源于胰腺的一種絲氨酸蛋白酶，由223個氨基酸殘基組成的單鏈多肽，底物特異性是帶正電荷的賴氨酸和精氨酸側鏈。胰酶主要切割賴氨酸和精氨酸羧基端，當兩者之一緊
神經膠質細胞培養實驗_胰蛋白酶消化法
實驗材料大鼠試劑、試劑盒CMF-Hanks液胰蛋白酶DMEM F12儀器、耗材水浴鍋培養箱實驗步驟一、原代培養1. ?選用生后1周的新生大白鼠，用碘酒,酒精棉球消毒，斷頭取其大腦皮層組織。?2. ?解剖顯微鏡下，剝離腦膜，切除大腦髓質部分。?3. ?將大腦皮質在無Ca2+、Mg2+Hanks液(CM
細胞攻略－|－PK15(豬腎細胞)細胞培養教程（尚恩生物）
▲細胞正常生長形態照片細胞名稱：PK-15(豬腎細胞)細胞別稱：?PK(15); PK (15); PK 15; PK15; Porcine Kidney-15細胞貨號:?SNL-131生長特性:?貼壁培養條件:?DMEM+10% FBS+1% P/S培養環境:?空氣，95%；二氧化碳 (CO2)，
胰蛋白酶消化細胞的時間為何要嚴格控制
原因：消化時間太短,消化就不充分,不能使細胞充分分散開來；消化時間太長,會導致細胞膜表面蛋白大量被分解,從而導致細胞死亡!
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臍血臍帶中干細胞分離實驗—臍血來源多能前體細胞分離
實驗材料臍血來源的MNCs。試劑、試劑盒滅菌培養基0.05%胰蛋白酶含EDTAPBSA儀器、耗材T25培養瓶實驗步驟(a)分離和制備臍血來源的MNCs。(b)如果使用凍存的CB-MNCs,復蘇的細胞可以用于培養，不需要其他分離步驟。(c)細胞復蘇后在30 min內，用臺盼藍染色進行活細胞計數。(d)
正常大兔主動脈平滑肌細胞培養
實驗材料：1.?正常大兔主動脈2.?不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素，pH7.23.?消化液：0.125%胰蛋白酶，0.1%膠原酶Ⅰ4.?細胞培養瓶（T25）5.?手術刀、解剖剪、解剖鑷、眼科剪，眼科鑷6.?網篩（100目）7.?離心管（15m
人流產胎兒成纖維細胞和包皮來源成纖維細胞的取材
實驗概要人流產胎兒成纖維細胞（Human fetal fibroblast）和包皮來源成纖維細胞的取材主要試劑細胞基礎培養液、DPBS、0.25%Trypsin主要設備35 mm培養皿、4孔培養板、濾器、2 mL、5 mL、10 mL、15 mL、25 mL、50 mL離心管，T25培養瓶、細胞計數
細胞傳代、培養的方法
實驗原理：將動物機體的各種組織從機體中取出，經各種酶（常用胰蛋白酶）、螯合劑（常用EDTA）或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖，這一過程稱原代培養。細胞在培養瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續生長，同時 也將細胞數量擴大，就必須進行傳代（再培養
酶消化法從Wharton膠中分離干細胞
試劑和材料：1. 培養基：完全LG-DMEM：含2mmol/L的左旋谷氨酰胺的低糖DMEM，添加10%熱滅活胎牛血清，100U/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素；2. PBSA；3. 胰蛋白酶，2.5%；4. 膠原酶A，0.1%用PBSA配制；5. 培養瓶；6. 圓錐形離心管，50ml；7. 剪刀
關于酶消化法的胰蛋白酶消化的基本介紹
1、加入消化液：小心吸出舊培養液，用PBS清洗（沖洗），加入適量消化液（胰蛋白酶液），注意消化液的量以蓋住細胞最好，在37℃培養箱消化2min。 2、顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若細胞質回縮，細胞間不再連接成片，表明此時細胞消化適度。 3、加入培養液：更換吸管，加入新鮮的培養