熒光定量PCR(也稱TaqMan PCR,以下簡稱FQ-PCR)是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術,該技術是在常規PCR基礎上加入熒光標記探針來實現其定量功能的,與變通PCR相比,FQ-PCR具有許多優點。本文擬就該技術的特點、原理和方法以及應用作一簡要敘述。1 特點FQ-PCR不僅具有普通PCR的高靈敏性,而且由于熒光探針的應用,可以通過光電傳導系統直接探測PCR擴增過程中熒光信號的變化以獲得定量結果,所以還具有DNA雜交的高特異性和光譜技術的高精確性,克服了常規PCR的許多缺點。如一般PCR產物都需通過瓊脂糖凝膠電泳和溴化乙錠染色紫外光觀察結果或通過聚丙烯酰胺凝膠電泳和銀染檢測,不僅需要多種儀器,而且費時費力,所使用的染色劑溴化乙錠對人體又有害,這些繁雜的實驗過程又給污染和假陽性提供了機會。而FQ-PCR只須在加樣時打開一次蓋子,其后的過程完全是閉管操作,不需要PCR后處理,避......閱讀全文
聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)可對特定核苷酸片斷進行指數級的擴增。在擴增反應結束之后,我們可以通過凝膠電泳的方法對擴增產物進行定性的分析,也可以通過放射性核素摻入標記后的光密度掃描來進行定量的分析。無論定性還是定量分析,分析的都是PCR終產物。但是在許多
定量PCR 定義 以參照物為標準對PCR終產物進行分析或對PCR過程的進行監測,來評估樣本中靶基因的拷貝數,稱為定量PCR相對定量→絕對定量, 手工操作→自動化檢測, 靈敏度與特異性多有很大的提高。 定量PCR的可行性 定量一般是在PCR擴增的指數期進行的。 特定的待擴增基因片段 起始含量越大,則指
PCR實驗室產品選擇指南 熒光 基團是吸收一定波長的光子后發射特定波長的光波,可以作為抗體等分子的標記物,實時熒光定量PCR中的Taqman探針常用熒光基團FAM標記熒光基團和TAMRA標記。 熒光基團 吸收特定波長的光子后熒光染料(通常稱為“熒光基團”或簡稱為“熒光
4月15日訊 達安基因發布2020年Q1業績預告,預計一季度凈利為1.86億元-2億元,同比增長558%-608%。報告期內,受新型冠狀病毒肺炎疫情影響,市場對新型冠狀病毒(2019-nCoV)核酸檢測試劑盒及核酸檢測儀器、相關耗材的需求量大幅度增長,對公司業績產生了積極影響。 中山大學達安基
實時熒光定量PCR(Real-time PCR,QPCR,熒光定量)分類以及實驗步驟介紹實時熒光定量PCR(Real-time PCR,QPCR,熒光定量)技術(Real-time quantitative PCR),是指在(QPCR,熒光定量)反應體系中加入熒光基因,
實時熒光定量PCR技術是指在PCR反應體系中加入熒光染料或熒光集團,利用熒光信號來實時監測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板濃度進行定量分析。 病原學檢測是動物疾病確診的關鍵點,而聚合酶鏈式反應(PCR)是目前病原檢測的最常用的分子生物學技術,具有高敏感性的特征。PCR技術發展已日趨完
實時熒光定量PCR技術(Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction簡稱Real Time PCR,如果用于RNA檢測,這被稱為逆轉錄實時PCR即Real-time RT-PCR)是實時PCR法,它是指對DNA或經過反轉入(RT-PCR
實時熒光定量PCR——一種科學準確的定量方法實時熒光定量PCR技術于1996年由美國Applied Biosystems公司推出,由于該技術不僅實現了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規PCR相比,它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點,目前已得到廣泛應用。本文試就其定量原理、
今天黨的十九大召開,習近平大大指出:中國特色社會主義進入新時代,我國社會主要矛盾已經轉化為人民日益增長的美好生活需要和不平衡不充分的發展之間的矛盾。想想都覺得高中政治課本過時了,而考研又多了一道大題。然而這些年,醫療領域進展可不止一點!就讓我們一起看看這些年,分子病理領域的發展! 其實相對于其
深度解讀熒光定量PCR儀所運用的技術 熒光定量PCR儀所用到的實時熒光定量PCR技術是通過對PCR擴增反應中每一個循環產物熒光信號的實時檢測,而實現對起始模板定量及定性分析的目的。在實時熒光定量PCR反應中,引入了一種熒光化學物質,隨著PCR反應的進行,PCR反應產物不斷累計,熒光信號強度也等
深度解讀熒光定量PCR儀所運用的技術 熒光定量PCR儀所用到的實時熒光定量PCR技術是通過對PCR擴增反應中每一個循環產物熒光信號的實時檢測,而實現對起始模板定量及定性分析的目的。在實時熒光定量PCR反應中,引入了一種熒光化學物質,隨著PCR反應的進行,PCR反應產物不斷累計,熒光
深度解讀熒光定量PCR儀所運用的技術 熒光定量PCR儀所用到的實時熒光定量PCR技術是通過對PCR擴增反應中每一個循環產物熒光信號的實時檢測,而實現對起始模板定量及定性分析的目的。在實時熒光定量PCR反應中,引入了一種熒光化學物質,隨著PCR反應的進行,PCR反應產物不斷累計,熒光
深度解讀熒光定量PCR儀所運用的技術 熒光定量PCR儀所用到的實時熒光定量PCR技術是通過對PCR擴增反應中每一個循環產物熒光信號的實時檢測,而實現對起始模板定量及定性分析的目的。在實時熒光定量PCR反應中,引入了一種熒光化學物質,隨著PCR反應的進行,PCR反應產物不斷累計,熒光信號強度也等比
實時熒光PCR檢測技術眾所周知,PCR(聚合酶鏈反應)技術自從1985年問世以來,經過十幾年的發展,已成為實驗室的常規技術。它是現代分子生物學研究中不可缺少的手段,是一種極為敏感的放大系統。相比于傳統的臨床診斷方法,核酸診斷是分子水平上的診斷技術,可以彌補傳統臨床診斷方法的某些缺陷,比如,核酸診斷能
聚合酶鏈式反應 ( PCR) 可對特定核苷酸片斷進行指數級的擴增 。在擴增反應結束之后,我們可以通過凝膠電泳的方法對擴增產物進行定性的分析,也可以通過 放射性核素摻入標記后的光密度掃描來進行定量的分析 。無論定性還是定量分析,分析的都是 PCR 終產物。但是在許多情況下,我們所感興趣的是未經 PCR
定量PCR是在定性PCR技術基礎上發展起來的核酸定量技術。實時熒光定量PCR技術于1996年由美國Applied biosystems公司推出,它是一種在PCR反應體系中加入熒光基團,利用對熒光信號積累的實時檢測來監測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。該
自1985年 Mullis 發明了體外多聚酶鏈反應(PCR)至今, PCR在遺傳病、病原體、癌基因等分子診斷領域和法醫鑒定等方面發揮了巨大作用.今天的第三代PCR技術, 即絕對定量的數字化 PCR也備受關注。來自西安交通大學生命科學與技術學院等處的研究人員近期發表綜述,介紹了 PCR 技術的發展
熒光定量PCR簡介 熒光定量PCR檢測技術誕生至今已10多年的時間,而其應用一直都沒廣泛展開,究其原因,無外乎受制于相關儀器、試劑和技術的發展。近期,尤其是08年以來,儀器和試劑是遍地開花,這也使科研人員均躍躍欲試,都想借此技術使自己的研究能突飛猛進,發展勢頭通過查找每年所發表的文章數可一目了然。據
熒光定量PCR的應用分子生物學研究1、核酸定量分析。 對傳染性疾病進行定量定性分析,病原微生物或病毒含量的檢測 , 比如近期流行的甲型H1N1流感, 轉基因動植物基因拷貝數的檢測,RNAi 基因失活率的檢測等。2 、基因表達差異分析。 比較經過不同處理樣本之間特定基因的表達差異 ( 如藥物處理、物理
聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction, PCR)是微量核酸擴增的有效工具,由于其靈敏、特異、快速等優點,在醫學上已廣泛應用與病毒、細菌病原體及遺傳病、腫瘤的早期診斷。隨著PCR技術的發展,特別是病毒或腫瘤的治療監測、疾病的診斷、機體基因表達調控方面,不僅需要檢測其存在是否
摘要:食品安全是決定我國經濟和社會發展中的關鍵問題,對提高人民生活質量有舉足輕重影響。現金,我國經濟和社會快速發展的同時,食品安全卻暴露出諸多問題。快速檢測技術這樣的大環境下應運而生,其不僅能夠在新社會背景下形成有效地檢測體制,還能對一些具有潛在安全性隱患的食品給予恰當的評價和定位,所以在食品加
聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction, PCR)自誕生之日起就決定了它不僅是一種高敏感、高特異的檢測核酸分子的定性方法,而且也是一個能對核酸分子進行精確定量的有力工具[1]。隨著分子生物學技術研究的不斷進展,定量PCR技術取得了突飛猛進的發展,不僅建立了一系
轉基因生物(Genetically Modified Organism,簡稱 GMO),是利用現代分子生物學技術改變基因組構成的生物,而非傳統的選擇育種,一般包括轉基因植物、 動物和微生物。轉基因食品就是利用上述的轉基因生物(包括植物、動物和微生物)加工而成的食品或食品添加劑。目前最受關注的絕大
摘要:指出了隨著人們生活水平的提高,食品安全越來越受到大家的重視。論述了目前食品安全檢測中常用的幾種現代檢測技術,主要有實時熒光定量PCR技術、核酸探針技術、酶聯免疫吸附技術(ELISA)和高效液相色譜-質譜連用技術(HPLC-MS)和近紅外光譜技術在食品安全檢測的應用及研究進展。
陳文學 鄒學森 陳岳青 黃秀珍 鐘禮瀑 (江西省腫瘤醫院 腫瘤研究所, 江西 南昌 330029) [摘要] 熒光定量PCR技術具有簡便、靈敏、準確等優點,目前已經在乙肝和性病的診斷和治療中得到了廣泛的應用,但在腫瘤方面的應用還處在研究和開發階段。本文綜述近年國內外相關熒光定量P
【摘要】目的 建立結核分枝桿菌的熒光定量PCR檢測方法,探討熒光 PCR檢測痰標本中結核分枝桿菌的應用價值。方法 根據結核分枝桿菌基因保守序列設計引物和探針,并構建標準品。對102例培養涂陽的結核痰液標本和45例非結核感染者的痰標本,應用熒光定量PCR法、痰涂片抗酸染色法檢測結核分枝桿菌。 結果 熒
感染性疾病有病原微生物引起,致病的病原微生物主要有病毒、細菌、衣原體、支原體和螺旋體等。這些病原體的傳統檢測方法通常采用形態學檢查,體外培養和免疫學試驗。但對某些難以培養的病原體,抗原抗體檢測不能判斷體內病原體 DNA 或 RNAde 復制情況,或存在檢測靈敏度低等問題。自聚合酶鏈反應( PCR )
摘要:隨著食品工業持續、快速地發展,傳統的方法已經不能夠 滿足當前對食品檢測的更高要求了,人們要求更為簡便快捷、靈活 性強、特異性高的先進的檢測方法,而現代的生物技術的快速發展 使食品的檢測方法更加多樣、準確、迅速及安全,也就是說生物技 術的應用滿足了現代食品檢測的更高要求。 關鍵詞:食品檢測;生物
數字PCR即Digital PCR(dPCR),它是一種核酸分子絕對定量技術。相較于qPCR,數字PCR可讓你能夠直接數出DNA分子的個數,是對起始樣品的絕對定量。數字PCR是近年來迅速發展起來的一種定量分析技術。該技術結果判定不依賴于擴增曲線的循環閾值(Ct),不受擴增效率的影響,具有很好的準確度
熒光定量PCR技術是通過熒光染料或熒光標記的特異性探針,對PCR產物進行標記跟蹤,實時監控反應過程。隨著PCR 反應的進行,反應產物不斷累積,熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環,收集一次熒光強度信號,這樣就可以通過熒光強度變化監測產物量的變化,結合相應的軟件對產物進行分析,可以得到熒光擴增曲線