pcr技術應用論文:熒光定量PCR技術在腫瘤研究中的應用
陳文學 鄒學森 陳岳青 黃秀珍 鐘禮瀑 (江西省腫瘤醫院 腫瘤研究所, 江西 南昌 330029) [摘要] 熒光定量PCR技術具有簡便、靈敏、準確等優點,目前已經在乙肝和性病的診斷和治療中得到了廣泛的應用,但在腫瘤方面的應用還處在研究和開發階段。本文綜述近年國內外相關熒光定量PCR技術在腫瘤研究中的應用。 [關鍵詞] FQ-PCR;腫瘤;人乳頭瘤病毒;EB病毒 腫瘤是危害人類健康的一種疾病,它的惡性程度與預后判斷主要依靠是否有轉移和病理切片分期。隨著分子生物學的迅猛發展,腫瘤研究領域的大量研究成果顯示,腫瘤的發生、發展、治療和預后與腫瘤細胞內部基因和腫瘤相關病毒有關。本文綜述了熒光定量PCR技術的原理及其在腫瘤研究中的應用。 1.單管熒光定量PCR技術的原理 單管熒光定量PCR(fluorogenic quantitative PCR, FQ PCR)的反應體系中除了......閱讀全文
pcr技術應用論文:熒光定量PCR技術在腫瘤研究中的應用
陳文學 鄒學森 陳岳青 黃秀珍 鐘禮瀑?(江西省腫瘤醫院 腫瘤研究所, 江西 南昌 330029)?[摘要] 熒光定量PCR技術具有簡便、靈敏、準確等優點,目前已經在乙肝和性病的診斷和治療中得到了廣泛的應用,但在腫瘤方面的應用還處在研究和開發階段。本文綜述近年國內外相關熒光定量PCR技術在腫瘤研究中
熒光定量PCR技術的應用
? ? 1、絕對定量分析? ? 這是熒光定量PCR技術的直接應用,可用于檢測病毒及細菌的濃度!? ??? ? 2、相對定量分析及實驗方案? ? 基因表達(gene expression)是指細胞在生命過程中,把儲存在DNA順序中遺傳信息經過轉錄和翻譯,轉變成具有生物活性的蛋白質分子. 遺傳物質DNA
熒光PCR/實時定量PCR技術應用簡介
一.熒光PCR原理1.熒光共振能量傳遞?(FRET)某熒光標記基團在激發光刺激下生成某波長的發射光,當另一屏蔽基團與其距離合適時,原發射光將會被屏蔽基團所吸收,并轉化為其他波長的發射光或熱能,稱之為FRET。2.熒光化學:熒光定量PCR所使用的熒光化學可分為兩種:熒光探針和熒光染料。PCR擴增時在加
熒光定量PCR儀技術及其在醫學中的應用
劉向國 謝國明 (重慶醫科大 重慶市 400016)摘 要 熒光定量PCR儀技術是一種新的核酸定量技術,該技木在PCR儀反應系統中引人了熒光標記探針,具有可實時監測,高靈敏性,高特異性和高精確性的特點,極大地克服了原有PCR儀技術的不足,擴大了PCR儀的應用范圍。關鍵詞 定量pcr;熒光;基因Flu
實時熒光定量PCR技術的應用
1. 基因工程研究領域 ① 基因表達研究:對β地中海貧血癥患者β與γ珠蛋白mRNA水平進行檢測,其結果特異性強、定量準確,為了解β地中海貧血的分子病理機制及其臨床診斷提供了可靠的檢測數據。 ② 轉基因研究:利用兩種發光探針及適當的循環閾值,擴增一個轉移后的基因和一個對照基因,以分析轉基因
熒光定量PCR儀技術及其在醫學中的應用(二)
3 在醫學中的應用3.1 病原體測定PCR技術的問世使病原體檢測能夠快速、方便地進行。由于PCR技術假陽性率太高,只要有微量病原體存在就可得到陽性結果,這并不能作為診斷依據, 只有當一定數量的病原體存在時才有臨床意義。因此,對模板準確定量顯得特別重要,應用熒光技術PCR儀就能夠快速、準確地得到結果。
熒光定量PCR儀技術及其在醫學中的應用(一)
?1 概述??????? 熒光定量多聚酶鏈式反應是一種新的核酸定量技術。該技術將熒光能量傳遞技術(fluorescence resonance energy transfer,FRET)應用于常規多聚酶鏈式反應(polymerase chain reaction,PCR儀中,從而進行定量檢測。FRE
熒光定量PCR應用——腫瘤篇
?? 腫瘤是是機體在各種致癌因素作用下,局部組織細胞在基因水平上失去對其生長的正常調控,從而導致其克隆性異常增生而形成的異常病變。學界將其分為良性和惡性兩大類。腫瘤作為全球疾病致死的重要元兇之一,如果發現和治療不及時,有可能導致人體消瘦、無力、貧血、食欲不振、發熱及臟器功能受損等,其后果極為嚴重。?
熒光定量PCR技術及其應用(一)
熒光定量PCR(也稱TaqMan PCR,以下簡稱FQ-PCR)是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術,該技術是在常規PCR基礎上加入熒光標記探針來實現其定量功能的,與變通PCR相比,FQ-PCR具有許多優點。本文擬就該技術的特點、原理和方法以及應用作一簡
熒光定量PCR技術及其應用(二)
3 應用由于FQ-PCR具有高靈敏性,高特異性和高精確性的特點,目前,該項技術已被應用于病原體測定、腫瘤基因檢測、免疫分析、基因表達、突變及其多態性的研究等多個領域。3.1 病原體測定由于PCR技術的問世,使得病原體檢測能夠快速而方便的進行。但由于其高靈敏性,實驗操作很容易受到污染而出現假陽性。只要
熒光定量PCR技術及其應用(一)
熒光定量PCR(也稱TaqMan PCR,以下簡稱FQ-PCR)是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術,該技術是在常規PCR基礎上加入熒光標記探針來實現其定量功能的,與變通PCR相比,FQ-PCR具有許多優點。本文擬就該技術的特點、原理和方法以及應用作一簡
熒光定量PCR技術的的應用范圍
熒光定量PCR的應用范圍有哪些,自從熒光定量PCR被發明以后,其應用對生物科學發展所起的作用非常重要,熒光定量PCR的應用的應用大概有下面的這些領域。? ? 1、核酸定量分析。 對傳染性疾病進行定量定性分析,病原微生物或病毒含量的檢測 , 比如近期流行的甲型H1N1流感, 轉基因動植物基因拷貝數的檢
實時熒光定量PCR技術及在我國衛生應急中的應用
?實時熒光定量PCR技術(Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction簡稱Real Time PCR,如果用于RNA檢測,這被稱為逆轉錄實時PCR即Real-time RT-PCR)是實時PCR法,它是指對DNA或經過反轉入(RT-PCR)的RNA
實時熒光定量PCR技術及在我國衛生應急中的應用
實時熒光定量PCR技術(Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction簡稱Real Time PCR,如果用于RNA檢測,這被稱為逆轉錄實時PCR即Real-time RT-PCR)是實時PCR法,它是指對DNA或經過反轉入(RT-PCR
實時熒光定量PCR儀在藥物研究中的應用
新藥開發研究,人用藥物及其他藥物 針對一些感染性疾病的藥物,如各種病毒病、細菌病等,在新藥的開發過程中,快速了解藥物對疾病進程的影響可以為新藥開發節約大量的人力、時間和資金,與以前所用的Elisa等方法相比,實時熒光定量PCR技術可以快速、準確、定量、靈敏地測定血液或組織中病原體的含量,因此有
熒光定量PCR在中醫藥研究中的應用
摘要:熒光定量PCR是一種新的核酸定量技術,該技術在PCR儀反應系統中引入了熒光標記探針,通過熒光信號積累實時監測整個PCR進程,使PCR擴增和終產物檢測全處在封閉的條件下進行,從而具有實時監測、無污染、快速、靈敏、精確、特異等特點,極大的克服了原有PCR儀技術的不足,其最主要的優勢是能對待測樣本起
實時熒光定量-PCR技術原理與應用
聚合酶鏈式反應 ( PCR) 可對特定核苷酸片斷進行指數級的擴增 。在擴增反應結束之后,我們可以通過凝膠電泳的方法對擴增產物進行定性的分析,也可以通過 放射性核素摻入標記后的光密度掃描來進行定量的分析 。無論定性還是定量分析,分析的都是 PCR 終產物。但是在許多情況下,我們所感興趣的是未經
實時熒光定量-PCR技術原理與應用
聚合酶鏈式反應 ( PCR) 可對特定核苷酸片斷進行指數級的擴增 。在擴增反應結束之后,我們可以通過凝膠電泳的方法對擴增產物進行定性的分析,也可以通過 放射性核素摻入標記后的光密度掃描來進行定量的分析 。無論定性還是定量分析,分析的都是 PCR 終產物。但是在許多情況下,我們所感興趣的是未經 PCR
熒光定量PCR技術特點、原理及其應用3
3.2腫瘤研究意大利Gelmini等[2]用FQ-PCR技術檢測乳腺癌標本c-erbB-2基因拷貝數目變異情況。他們以β-肌動蛋白基因為參照探索最佳實驗條件,當擴增循環數在28~31之間時,△RQ與模板DNA有著較好的劑量依賴關系。他們在此條件下擴增了c-erbB-2基因和β-球蛋白基因,發現△RQ
熒光定量PCR技術特點、原理及其應用2
3 應用由于FQ-PCR具有高靈敏性,高特異性和高精確性的特點,目前,該項技術已被應用于病原體測定、腫瘤基因檢測、免疫分析、基因表達、突變及其多態性的研究等多個領域。3.1 病原體測定由于PCR技術的問世,使得病原體檢測能夠快速而方便的進行。但由于其高靈敏性,實驗操作很容易受到污染而出現假陽性。只要
實時熒光定量-PCR技術原理與應用(一)
實時熒光定量 PCR技術原理與應用聚合酶鏈式反應 ( PCR) 可對特定核苷酸片斷進行指數級的擴增 。在擴增反應結束之后,我們可以通過凝膠電泳的方法對擴增產物進行定性的分析,也可以通過 放射性核素摻入標記后的光密度掃描來進行定量的分析 。無論定性還是定量分析,分析的都是 PCR 終產物。但是
實時熒光定量-PCR技術原理與應用(二)
SYBR Green I 在核酸的實時檢測方面有很多優點,由于它與所有的雙鏈 DNA 相結合,不必因為模板不同而特別定制,因此設計的程序通用性好,且價格相對較低。利用熒光染料可以指示雙鏈 DNA 熔點的性質,通過熔點曲線分析可以識別擴增產物和引物二聚體,因而可以、區分非特異擴增,進一步地還可
熒光定量PCR技術特點、原理及其應用1
熒光定量PCR(也稱TaqMan PCR,以下簡稱FQ-PCR)是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術,該技術是在常規PCR基礎上加入熒光標記探針來實現其定量功能的,與變通PCR相比,FQ- PCR具有許多優點。本文擬就該技術的特點、原理和方法以及
熒光定量PCR技術的熒光定量PCR的方法
接下來我們就來了解一下熒光定量的主要方法,我們如何選擇合適的方法?熒光定量PCR所使用的熒光化學可分為兩種:熒光探針和熒光染料。而熒光定量 PCR 的方法相應的可分為特異類和非特異類兩類,特異性檢測方法是在PCR反應中利用標記熒光染料的基因特異寡核苷酸探針來檢測產物;而非特異性檢測方法是在在PCR反
熒光定量PCR技術
熒光定量pcr(也稱taqmanpcr,以下簡稱fq-pcr)是美國pe(perkinelmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術,該技術是在常規pcr基礎上加入熒光標記探針來實現其定量功能的,與變通pcr相比,fq-pcr具有許多優點。
PCR技術-PCR技術的應用
一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶鏈式反應具有的特色之一。
PCR技術-PCR技術的應用
一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill?Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase?chain?reaction)--聚合酶鏈式反應具有的特色之一。這也
PCR技術-PCR技術的應用
一滴殘留在裙子上的精液使得美國總統Bill Clinton不得不坦承他與白宮實習生有不正當的關系。因為他知道現在的生物科技就連一個精子也能被用來做為證據。這種將極微量的生物標本化為可供鑒定的現代技術正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶鏈式反應具有的特色之一。
時熒光定量PCR技術
?? 時熒光定量PCR技術即是在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號實時監測整個PCR進程,zui后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR避免了傳統PCR以終產物檢測定量產生的偏差,提高實驗的重復性。該技術已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化;比較不同組織的 mRNA