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    酵母剪接體分析實驗

    實驗方法原理 前接體是真核細胞核內剪接 mRNA 前體的大分子核糖核蛋白復合體,它由 5 種 snRNP 和大量的非 snRNP 蛋白組成,每一種 snRNP 由一個 snRNA 和幾種蛋白質構成。 試劑、試劑盒 Tris HCI 溶液 EDTA TE 乙酸鈉 SDS RNA 的勻漿緩沖液 RNA 的溶解緩沖液 Tris 堿 Tris EDTA 平衡苯酚 乙醇 硅烷化溶液 TPM8 緩沖液 mRNA ......閱讀全文

    年終盤點:2016年國內不容錯過的重磅生物研究

      時間總是過得很快,2016年馬上就要過去了,迎接我們的將是嶄新的2017年,2016年,我國有很多優秀科研機構的科學家們都做出了意義重大、影響深遠的研究成果,發表在國際頂級期刊上。本文中小編盤點了2016年我國科學家發表的一些重磅級研究,以饕讀者。   --結構生物學 --  1.清華大學 施一

    酵母前體mRNA剪接提取物實驗

    真核生物前體 mRNA ( pre-mRNA ) 的剪接分為兩步,即先從前體切去內含子,然后將兩個外顯子連接在一起形成成熟的  mRNA。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編:鄭曉飛。實驗方法原理剪接反應的典型做法是使用核提取物,即 S100 提取物補充 SR 蛋白或粗提取物的部分純化組

    酵母前體mRNA剪接提取物實驗

                實驗方法原理 剪接反應的典型做法是使用核提取物,即 S100 提取物補充 SR 蛋白或粗提取物的部分純化組分,最常使用的是 HeLa 細胞的提取物。前體 mRNA 底物通常采用噬菌體

    中國學者發表6篇Nature,在生命科學領域取得重大進展

      iNature  2019年9月4日,中國學者在Nature連續發表了6項成果,涉及生命科學,天文學,地球科學等不同的領域,iNature系統介紹這些成果:  【1】混合譜系白血病(MLL)家族的甲基轉移酶  -包括MLL1,MLL2,MLL3,MLL4,SET1A和SET1B-在賴氨

    酵母雙雜交技術及其在蛋白質組研究中的應用

    摘要  蛋白質組學是在后基因組時代出現的一個新興的研究領域, 它的主要任務是識別鑒定細胞、組織或機體的全部蛋白質, 并分析蛋白質的功能及其模式。 因此, 揭示蛋白質組中蛋白質間的相互作用關系也是蛋白質組學的重要內容之一。 酵母雙雜交技術是用來檢測蛋白質間是否相互作用的一

    酵母雙雜交技術及其在蛋白質組研究中的應用

         作為后基因組時代出現的新興研究領域之一, 蛋白質組學(proteomics)正受到越來越多的關注。 蛋白質組學的研究目標是對機體或細胞的所有蛋白質進行鑒定和結構功能分析。 蛋白質組學的研究不局限任何特定的方法。 高分辨率的蛋白質分離技術如二維凝膠電泳和高效液相

    2015年度“中國高校十大科技進展”項目評選揭曉

      2015年12月15日,由教育部科學技術委員會組織評選的2015年度“中國高等學校十大科技進展”經過形式審查、學部初評、項目終審評選專項工作和項目公示等流程后在京揭曉。  “中國高等學校十大科技進展”的評選自1998年開展以來,至今已18屆,這項評選活動對提升高等學校科技的整體水平、增強高校的科

    酵母剪接體分析實驗

    前接體是真核細胞核內剪接 mRNA 前體的大分子核糖核蛋白復合體,它由 5 種 snRNP 和大量的非 snRNP 蛋白組成,每一種 snRNP 由一個 snRNA 和幾種蛋白質構成。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編:鄭曉飛。實驗方法原理前接體是真核細胞核內剪接 mRNA 前體的大分子核糖核蛋

    包涵體的純化和復性總結

    關于包涵體的純化是一個令人頭疼的問題,包涵體的復性已經成為生物制藥的瓶頸,關于包涵體的處理一般包括這么幾步:菌體的破碎、包涵體的洗滌、溶解、復性以及純化,內容比較龐雜 一、菌體的裂解 1、怎樣裂解細菌?  細胞的破碎方法  1.高速組織搗碎

    2016年度中國科學十大進展發布!

      鈷/氧化鈷雜化二維超薄結構電催化還原CO2為液體燃料01  1、研制出將二氧化碳高效清潔轉化為液體燃料的新型鈷基電催化劑  將二氧化碳在常溫常壓下電還原為碳氫燃料,是一種潛在的替代化石原料的清潔能源策略,并有助于降低二氧化碳排放對氣候造成的不利影響。實現二氧化碳電催化還原的關鍵瓶頸問題是將二氧化

    中科院多項成果入選2016年中國科學十大進展

       2月20日,科學技術部基礎研究司與高技術研究發展中心聯合召開“2016年度中國科學十大進展解讀會”,發布了2016年度中國科學十大進展。中國科學院相關單位獨立或合作取得的7項重大科學成果入選,包括:研制出將二氧化碳高效清潔轉化為液體燃料的新型鈷基電催化劑;開創煤制烯烴新捷徑;揭示水稻產量性狀雜

    外顯子捕獲與擴增

                實驗材料 大腸桿菌菌株 HB101 質粒 pSPL3 COS-7 細胞 載體 pBluescriptⅡ

    2019年中國學者86篇Cell,Nature及Science文章匯總

      2019年上半年很快就結束了,iNature盤點了中國學者在Cell,Nature及Science發表的成果,我們發現總共有86篇(截至2019年6月24日),具體介紹如下:  4-6月發表的文章  【1】2019年6月21日,西北工業大學王文,中科院昆明動物研究所/BGI 張國捷及丹麥哥本哈根

    施一公團隊破解結構生物學最大難題之一

    施一公  北京時間8月21日凌晨,著名的《科學》雜志在線發表了清華大學生命科學學院施一公教授研究組的兩篇具有里程碑意義的論文,宣布得到了高分辨率的剪接體三維結構和剪接體對前體信使RNA執行剪接的基本工作機理,從而將分子生物學的“中心法則”在分子機理的研究上大幅度向前推進。  “這項研究成果的意義很可

    兩院院士評選中國世界十大科技進展新聞揭曉

       由中國科學院、中國工程院主辦,中國科學院學部工作局、中國工程院辦公廳、中國科學報社承辦,中國科學院院士和中國工程院院士投票評選的2015年中國十大科技進展新聞、世界十大科技進展新聞,2016年1月19日在京揭曉。  此項年度評選活動至今已舉辦了22次。評選結果經新聞媒體廣泛報道后,在社會上產生

    施一公團隊85后清華女博士:4篇SCI論文 影響因子累積破百

      杭婧,清華大學醫學院2012級直博生,師從施一公教授,研究方向是剪接體領域的結構生物學研究。她共發表SCI論文4篇,以第一作者身份在《自然》上發表文章一篇,在《科學》上發表文章兩篇,影響因子累積破百。  2015年9月11日,兩篇闡釋生命大分子剪接體結構的文章以雜志當期封面的形式,“背靠背”發表

    開年新篇!施一公團隊Science再發剪接體新成果

      2016年1月8日,清華大學生命學院施一公教授研究組在《科學》(Science)就剪接體的結構與機理研究再發長文(Research Article),題為《U4/U6.U5 三小核核糖核蛋白復合物3.8埃的結構:對剪接體組裝及催化的理解》(The 3.8 A Structure of the U

    常用的分子生物學基本技術

    核酸分子雜交技術由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性,它已成為分子生物學中最常用的基本技術,被廣泛應用于基因克隆的篩選,酶切圖譜的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下(適宜的溫室度及離子強度等)可按堿基互補原成雙鏈。雜交的

    2012國家自然科學基金評審結果名單之復旦大學(生物類)

      來自國家自然科學基金委員會的消息,國家自然科學基金委員會公布了2012年度面上項目、重點項目、重大國際(地區)合作研究項目、青年科學基金項目、地區科學基金項目、海外及港澳學者合作研究基金項目、科學儀器基礎研究專款項目等方面的評審結果。有關評審結果將通知相關依托單位,其科研管理人員可登錄

    2018前10月生物醫學風云榜 袁隆平 曹雪濤及施一公等上榜

      經過特殊的算法,我們得到了2018年前10個月中國生物醫學風云榜人物及最火爆的3個重大學術界事件,能夠上榜的風云人物/事件,都曾長時間占據過100多個公生物醫學公眾號的頭版頭條。  在此,我們精選了其中的3個事件及16位風云榜人物。我們對其進行了劃分,分別是:6星級的3個事件,分別位諾貝爾獎,國

    Cell雜志最受關注的五篇文章(4月)

      論文的通訊作者、BIDMC癌癥中心腫瘤學家、哈佛醫學院醫學副教授Gerburg Wulf說:“這項研究證實了PI3K作為一個主要的調控因子整合了癌細胞的結構和它的代謝。”糖分解與細胞結構是如何協調的?Wulf說,答案是一個驚人簡單的生物物理機制。  Wulf解釋道:“在正常細胞中,來自外部的信號

    探索物質結構之透射電子顯微鏡

    眼睛是人類認識客觀世界的第一架“光學儀器”,但它的能力卻是有限的,通常認為人眼睛的分辨率為0.1 mm。17世紀初,光學顯微鏡(圖1)出現,可以把細小的物體放大到千倍以上,分辨率比人眼睛提高了500 倍以上,這也是人類認識物質世界的一次巨大突破。隨著科學技術的不斷發展,直接觀察到原子是人們一直以來的

    大滿貫!2019年施一公團隊連續發表Cell,Nature,Science文章

      2015年,通過單粒子冷凍電子顯微鏡(cryo-EM)分析確定剪接體的第一個近原子分辨率結構,報道了來自S. pombe的ILS復合物。從那時起,已經闡明了13種冷凍-EM結構,大部分分辨率在3.3和5.8之間,已經闡明了來自釀酒酵母的組裝剪接體的七種不同狀態,人類剪接體的7種不同狀態的11種這

    雙雜交和其他雙成分系統實驗

                實驗材料 載體和酵母菌 試劑、試劑盒 緩沖液和溶液 SD

    Nat Rev Genetics | 環狀RNA的合成與功能

      環狀RNA(circular RNA,circRNA)是一種新興的內源性非編碼RNA(noncoding RNA,ncRNA),是繼microRNA (miRNA)以及long noncoding RNA (IncRNA)后非編碼RNA家族中極具研究潛力的新成員。越來越多的研究表明,環狀RNA具

    常用的分子生物學基本技術1

    DNA重組技術(或基因工程)是20世紀生物學的偉大成就,并已滲透到生命科學包括醫學 各個領域,為腫瘤的實驗研究和臨床診斷及治療提供了嶄新的技術和有用的工具。本附錄扼要介紹在分子腫瘤學領域中常用的分子生物學基本技術及其在腫瘤研究中的應用,著重介紹它們的原理和應用。至于具體的技術方法和操作步驟可參閱《分

    Cell雜志12月最受關注的八篇文章

      Cell創刊于1974年,現已成為世界自然科學研究領域最著名的期刊之一,并陸續發行了十幾種姊妹刊,在各自專業領域里均占據著舉足輕重的地位。Cell以發表具有重要意義的原創性科研報告為主,許多生命科學領域最重要的發現都發表在Cell上。本月《Cell》前十名下載論文為:  A Method for

    蛋白質純化所需的生物提取物制備的實驗

    實驗步驟一、化學法和酶法細胞裂解微量的細胞裂解經常通過化學法或酶法或二者共同采用來完成。例如, 超聲和弗式細胞壓碎器 (Frenchpress 均質機) 都不便于用在收集小于或等于 5 mL 的培養液的情況,而且應用這些機械的方法經常會遇到過度的產熱和樣品被氧化等問題。微量細胞裂解的簡化方面的重大進

    蛋白質純化所需的生物提取物制備的實驗

    實驗步驟 一、化學法和酶法細胞裂解 微量的細胞裂解經常通過化學法或酶法或二者共同采用來完成。例如, 超聲和弗式細胞壓碎器 (Frenchpress 均質機) 都不便于用在收集小于或等于 5 mL 的培養液的情況,而且應用這些

    胞內晶體蛋白基因的釀酒酵母真核表達

    實驗概要本實驗將釀酒酵母作為胞內晶體蛋白的攜帶和表達宿主,同時,作為可能的營養體喂養海洋線蟲P. redivivus將所表達的目的蛋白導入線蟲機體,觀察線蟲的生長、發育、繁殖或是死亡情況,探討胞內晶體蛋白對昆蟲病原線蟲以外的線蟲是否具有營養作用。為此,首先構建一種重組大腸桿菌,其所攜帶的重組質粒能夠

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