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    MTT(噻唑藍)的染色原理及使用方法

    MTT全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide,漢語化學名為 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽,商品名:噻唑藍。是一種黃顏色的染料。MTT比色法,是一種檢測細胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚(Formazan)并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細胞中的甲瓚,用酶聯免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值,可間接反映活細胞數量。在一定細胞數范圍內,MTT結晶形成的量與細胞數成正比。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規模的抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點是靈敏度高、經濟。缺點:由于MTT經還原所產生的甲瓚產物不溶于水,需被溶解后才能檢測。這不僅使工作量增加,也會對實驗結果的......閱讀全文

    常規聚丙烯酰胺凝膠電泳實驗——檢測

    實驗方法原理常規聚丙烯酰胺凝膠電泳后的檢測,對于不同的目的,應采用不同的檢測方法。由于這種電泳方法不破壞蛋白質的生物活性,所以可選用的檢測方法很多。試劑、試劑盒丙烯酰胺單體貯液Tris-甘氨酸緩沖液貯液電極緩沖液樣品緩沖液過硫醆銨濃縮膠緩沖液貯液分離膠緩沖液貯液實驗步驟一、早期染色方法用染料和生物大

    Transwell侵襲實驗

    第一節 概念這里想明確兩個概念,一個是Transwell,另一個是腫瘤細胞侵襲模型。1. Transwell關于Transwell這個詞該如何解釋,查了很多資料也未見準確的注解,我覺得可以這么理解吧,trans-這個詞根有轉移、轉運、穿過等意思,well有小室的意思,可以從字面上理解,這是一類有通透

    Transwell侵襲實驗總結 (3)-操作步驟

    .步驟2.1 Transwell小室制備2.1.1 無基質膠Transwell小室制備① 包被基底膜:用50mg/LMatrigel 1:8稀釋液包被Transwell小室底部膜的上室面,4℃風干。如果需要在下室面鋪FN的話,可將200ul槍頭的尖端剪掉,吸取FN均勻涂抹在小室的下面。用膠原(col

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    主要用途冰凍切片NADH心肌黃酶活性染色試劑是一種旨在使用人工電子受體染料二甲基噻唑二苯基四唑嗅藍(MTT),受到NADH心肌黃酶催化還原,產生不溶性藍黑色色素沉淀,來分析冰凍組織樣品中酶活性的權威而經典的技術方法。該技術經過精心改良傳統方法、成功實驗證明的。主要適用于動物組織細胞的心肌黃酶活性定性

    細胞生物學實驗中細胞增殖的檢測方法

    1.檢測細胞代謝活性檢測細胞的代謝活性也可以反映細胞增殖的情況。在細胞增殖過程中乳酸脫氫酶的活性會增加,而活性的脫氫酶可以使得外源性的四唑鹽或者阿爾瑪藍(Alamar blue)還原成為帶有顏色還原產物。通過分光光度計或者酶標儀來讀取含染料培養基的吸光度,從而衡量細胞的代謝活性,檢測細胞增殖的情

    抗腫瘤藥物研究及新藥篩選(四)

    三、抗腫瘤藥物篩選及評價 以國立腫瘤研究所(Nationai Cancel Institute  NCI)為代表的美國抗腫瘤藥物篩選模式經歷了三個發展階段。?  1955-1985年,以動物移植性腫瘤為基本模型,以動物生命延長率和瘤重抑制率為藥物活性的基本評價指標,此階

    MTT比色法實驗原理、步驟及注意事項

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    用體外或體內試驗對機體的各種參與免疫應答的細胞進行鑒定、計數和功能測定,藉以了解機體的免疫狀態,并對某些臨床疾病的診斷,預后及療效觀察等也具有一定意義。一、免疫細胞的分離體外測定免疫細胞首先要從外周血或淋巴組織中分離所需的細胞。其主要方法是根據細胞的表面標記、理化性狀及功能等方面的差別進行設計。

    細胞活力檢測方法

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    菌落總數檢測的注意事項與快速檢測技術(二)

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    MTT法,又稱MTT比色法,可以用于:檢測細胞存活和生長。實驗方法原理MTT 分析法以活細胞代謝物還原劑 3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide, MTT 噻唑藍為基礎。MTT 為黃色化合物,是一種接受氫離子的染

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    腦膠質瘤微血管通透性灌注MRI研究進展

      膠質瘤是成人顱內最常見的腦腫瘤,根據病理組織學特征分為WHOⅠ-Ⅳ級。其中惡性膠質瘤約占3/4,進展迅速、侵襲性高、預后差且治療效果不佳。腫瘤新生微血管內皮細胞不成熟,緊密連接開放,微血管高通透性是腦膠質瘤的典型病理特征,與腫瘤惡性程度、分子分型及病人預后密切相關。  灌注MRI是臨床常用的評估

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    實驗方法原理培養的細胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長良好,所以要進行細胞計數。計數結果以每毫升細胞數表示。細胞計數的原理和方法與血細胞計數相同。 在細胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細胞,總細胞中活細胞所占的百分比叫做細胞活力,由組織中分離細胞一般也要檢查活力,以了解分離的過程對細

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