6、定量(1)浸泡 將膜片上的各蛋白質分離區帶分段剪下,分別置于相應的標有編號的試管內,然后各加入0.4mol/L的氫氧化鈉溶液進行浸泡。浸泡淡色帶所加入的0.4mol/L氫氧化鈉溶液的量為4ml,深色帶為8ml(此時的稀釋倍數是淡色帶的2倍)。室溫下的浸泡時間為 30min~60min。若在37℃水浴中浸泡,則為10min~15min。浸泡期間振蕩數次,使蛋白質區帶浸出。另外再剪取與色帶膜條大小相同的無色帶膜條作為空白,以相同的方式浸泡在0.4mol/L氫氧化鈉溶液中。(2)比色 浸泡完畢,將浸出的有色溶液在分光光度計上進行比色測定。測定波長為620nm,光徑為1cm。若浸出液有混濁或沉淀,則以4000r/min的轉速離心10min~20min除去,然后再取上清液進行比色測定。(3)計算 比色測定結束后,各組分的含量按下式計算:某蛋白質組分百分含量=某蛋白質組分的光吸收值/樣品中各蛋白質組分的光吸收值總和×100%......閱讀全文
帶電顆粒在電場作用下向著與其電性相反的電極移動的現象稱為電泳。如帶正電荷的粒子向負極移動,帶負電荷的粒子向正極移動。電泳技術是生物化學與分子生物學中的重要研究方法之一,利用電泳技術可分離許多生物物質,包括氨基酸、多肽、蛋白質、脂類、核苷、核苷酸及核酸等,并可用于分析物質的純度和分子量的測定等。電泳的
分散介質中的帶電粒子在直流電場的作用下,向著與其電性相反的電極移動的現象稱為電泳(electrophoresis)。蛋白質為兩性電解質,在不同pH溶液中帶不同的電荷,從而在直流電場中能夠泳動,這就是蛋白質的電泳現象。1937年瑞典化學家Tiselius首先建立了蛋白質的界面電泳技術,并成功地將血清
分散介質中的帶電粒子在直流電場的作用下,向著與其電性相反的電極移動的現象稱為電泳(electrophoresis)。蛋白質為兩性電解質,在不同pH溶液中帶不同的電荷,從而在直流電場中能夠泳動,這就是蛋白質的電泳現象。1937年瑞典化學家Tiselius首先建立了蛋白質的界面電泳技術,并成功地將血清蛋
原理 采用醋酸纖維素薄膜為支持物的電泳方法,叫做醋酸纖維素薄膜電泳。醋酸纖維素,是纖維素的羥基乙酰化所形成的纖維素醋酸酯。將它溶于有機溶劑(如:丙酮、氯仿、氯乙烯、乙酸乙酯等)后,涂抹成均勻的薄膜則成為醋酸纖維素薄膜。該膜具有均一的泡沫狀的結構,有強滲透性,厚度約為120微米。 醋酸纖
(一)醋酸纖維素薄膜電泳 醋酸纖維素是提纖維素的羥基乙酰化形成的纖維素醋酸酯。由該物質制成的薄膜稱為醋酸纖維素薄 膜。這種薄膜對蛋白質樣品吸附性小,幾乎能完全消除紙電泳中出現的“拖尾”現象,又因為膜的親水性比較小,它所容納的緩沖液也少,電泳時電流的大部分由樣 品傳導,所以分離速度快,電泳時間短,樣品
電泳法,是指帶電荷的供試品(蛋白質、核苷酸等)在惰性支持介質(如紙、醋酸纖維素、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等)中,于電場的作用下,向其對應的電極方向按各自的速度進行泳動,使組分分離成狹窄的區帶,用適宜的檢測方法記錄其電泳區帶圖譜或計算其百分含量的方法。 電泳技術的
一、目的掌握醋酸纖維素薄膜電泳法分離帶電顆粒原理;觀察核苷酸類物質的紫外吸收現象。二、原理帶電粒子在電場中向著與其自身帶相反電荷的電極移動的現象,稱為電泳。控制電泳條件(如pH 等),使混合試樣中的不同組分帶有不同的凈電荷,各組分在電場中移動的速度或方向各不相同,從而達到分離各組分的目的,這就是
醋酸纖維素薄膜是由醋酸纖維素加工制成的。醋酸纖維素薄膜作為是電泳支持體 有以下優點:①電泳后區帶界限清晰;②通電時間較短(二十分鐘至一小時);③它 對各種蛋白質(包括血清白蛋白,溶菌酶及核糖核酸酶)都幾乎完全不吸附,因此無 拖尾現象;④對染料也沒有吸附,因此不結合的染料能完全洗掉,無樣品
實驗原理醋酸纖維薄膜電泳是用醋酸纖維薄膜作為支持物的電泳方法。它具有簡便、快速、樣品用量少,應用范圍廣,分離清晰,沒有吸附現象等優點。目前已廣泛用于血清蛋白、脂蛋白、血紅蛋白、糖蛋白、多肽、核酸、同工酶及其他生物大分子的分析檢測,是醫學和臨床檢驗的常規技術。本實驗以醋酸纖維素為電泳支持物,分離各種血
二、透析和超濾1.透析(Dialysis):就是利用蛋白質分子不能通過半透膜(Semipermeable membrane)而小分子可以自由透過的性質,使蛋白質與小分子物質分開。作用:脫鹽、無機離子和小分子物質等。透析膜:動物膜、羊皮紙、火棉膠、賽璐玢或其他材料等。2.超濾(ultrafiltrat
電泳法,是指帶電荷的供試品(蛋白質、核苷酸等)在惰性支持介質(如紙、醋酸纖維素、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等)中,于電場的作用下,向其對應的電極方向按各自的速度進行泳動,使組分分離成狹窄的區帶,用適宜的檢測方法記錄其電泳區帶圖譜或計算其百分含量的方法。電泳技術的基本原理和分類在電場中,推動帶電質點運
醋酸纖維素薄膜是由醋酸纖維素加工制成的。醋酸纖維素薄膜作為是電泳支持體 有以下優點:①電泳后區帶界限清晰;②通電時間較短(二十分鐘至一小時);③它 對各種蛋白質(包括血清白蛋白,溶菌酶及核糖核酸酶)都幾乎完全不吸附,因此無 拖尾現象;④對染料也沒有吸附,因此不結合的染料能完全洗掉,無樣品處幾乎完全
醋酸纖維素薄膜是由醋酸纖維素加工制成的。醋酸纖維素薄膜作為是電泳支持體 有以下優點:①電泳后區帶界限清晰;②通電時間較短(二十分鐘至一小時);③它 對各種蛋白質(包括血清白蛋白,溶菌酶及核糖核酸酶)都幾乎完全不吸附,因此無 拖尾現象;④對染料也沒有吸附,因此不結合的染料能完全洗掉,無樣品處幾乎完全
電泳技術是一門古老而又年輕的技術。早在1809年俄國物理學家Reuss就進行了世界上第一次電泳實驗,此后各種電泳技術及儀器相繼問世,廣泛應用于蛋白質、氨基酸、核酸、其他有機化合物甚至無機離子等領域的分離和/或鑒定。近年來,先進的電泳技術和各種自動電泳分析系統被越來越多的臨床
電泳技術是一門古老而又年輕的技術。早在1809年俄國物理學家Reuss就進行了世界上第一次電泳實驗,此后各種電泳技術及儀器相繼問世,廣泛應用于蛋白質、氨基酸、核酸、其他有機化合物甚至無機離子等領域的分離和/或鑒定。近年來,先進的電泳技術和各種自動電泳分析系統被越來越多的臨床實驗室所采用檢驗|地帶網搜
電泳法,是指帶電荷的供試品(蛋白質、核苷酸等)在惰性支持介質(如紙、醋酸纖維素、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等)中,于電場的作用下,向其對應的電極方向按各自的速度進行泳動,使組分分離成狹窄的區帶,用適宜的檢測方法記錄其電泳區帶圖譜或計算其百分含量的方法。電泳技術的基本原理和分類在電場中,推動帶電質點運
1. 學習血紅蛋白電泳分離方法;2. 能辨認正常人和異常血紅蛋白的電泳圖譜; [實驗原理] 血紅蛋白是一種結合蛋白質,由血紅素和珠蛋白組成。正常人所含珠蛋白的多肽鏈有a、b、d 、e、g和z六種。這六種肽鏈的基因在人體發育的不同階段表達狀況不一。正常成人紅細胞中有三種血紅蛋白即HbA、
醋酸纖維薄膜電泳法 實驗方法原理 血紅蛋白是一種結合蛋白質,由血紅素和珠蛋白組成。正常人所含珠蛋白
醋酸纖維薄膜電泳法 實驗方法原理 血紅蛋白是一種結合蛋白質,由血紅素和珠蛋白組成。正常人所含珠蛋白
電泳技術是一門古老而又年輕的技術。早在1809年俄國物理學家Reuss就進行了世界上第一次電泳實驗,此后各種電泳技術及儀器相繼問世,廣泛應用于蛋白質、氨基酸、核酸、其他有機化合物甚至無機離子等領域的分離和/或鑒定。近年來,先進的電泳技術和各種自動電泳分析系統被
實驗方法原理血紅蛋白是一種結合蛋白質,由血紅素和珠蛋白組成。正常人所含珠蛋白的多肽鏈有a、b、d 、e、g和z六種。這六種肽鏈的基因在人體發育的不同階段表達狀況不一。正常成人紅細胞中有三種血紅蛋白即HbA、 HbA2 和 HbF。HbA(a2b2)是正常成人紅細胞中的最主要的血紅蛋白,占
【概述】帶電顆粒在電場作用下,向著與其電性相反的電極移動,稱為電泳(electrophoresis, EP)。利用帶電粒子在電場中移動速度不同而達到分離的技術稱為電泳技術。 1807年,由俄國莫斯科大學的斐迪南·弗雷德里克·羅伊斯(Ferdinand Frederic Reuss)最早發現。
[實驗目的]1. 學習血紅蛋白電泳分離方法;2. 能辨認正常人和異常血紅蛋白的電泳圖譜;[實驗原理]血紅蛋白是一種結合蛋白質,由血紅素和珠蛋白組成。正常人所含珠蛋白的多肽鏈有a、b、d 、e、g和z六種。這六種肽鏈的基因在人體發育的不同階段表達狀況不一。正常成人紅細胞中有三種血紅蛋白即HbA、&nb
二、醋酸纖維素薄膜電泳法1.儀器裝置電泳室及直流電源同紙電泳。2.試劑(1) 巴比妥緩沖液(pH8.6)取巴比妥 2.76g,巴比妥鈉15.45g,加水溶解使成1000ml。(2) 氨基黑染色液取 0.5g的氨基黑10B,溶于甲醇50ml、冰醋酸10ml及水40ml的混合液中。 (3) 漂洗液取乙醇
作者:翟玉華 朱嘉芷 張惠玲 宿莉 陳文明 王清濤 多發性骨髓瘤是單克隆漿細胞惡性增殖性疾病。增生的漿細胞產生結構均一的單克隆免疫球蛋白(M蛋白)。近幾年來由于醋酸纖維素薄膜蛋白電泳的廣泛應用,臨床上M蛋白的檢出率也逐漸增高,國外報道65歲以上健康人群可檢出M蛋白者占3%,并隨年齡增長而增高,這類
實驗概要血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳技術實驗原理 帶電粒子在電場中移動的現象稱為電泳。電泳技術被廣泛用于蛋白質、核酸和氨基酸等物質的分離和鑒定,電泳過程中帶電粒子的移動速度與粒子荷電量、電場強度、粒子重量與半徑及介質的粘度等有關。其中粒子荷電量又受周圍介質的
【目的和要求】1. 掌握聚丙烯酰胺凝膠電泳的基本原理2. 掌握垂直板狀凝膠電泳槽的使用和凝膠的配制方法。3. 學會利用相對遷移率分析蛋白質種類。【實驗原理】帶電顆粒在電場的作用下,向著與其相反的電極移動,稱為電泳。電泳做為一種物質分離及鑒定技術,其原理在于任一物質質點,由于其本身的解離作用或由于表面
各電泳法,除另有規定外,照下述方法操作。一、紙電泳法1.儀器裝置包括電泳室及直流電源兩部分。常用的水平式電泳室裝置如圖,包括兩個電泳槽A和一個可以密封的玻璃(或相應材料)蓋B;兩側的電泳槽均用有機玻璃(或相應材料)板C分成兩部分;外格裝有鉑電極(直徑0.5~0.8cm)D;里格為可放濾紙E的有機玻璃
實驗概要血紅蛋白是一種結合蛋白質,由血紅素和珠蛋白組成。正常人所含珠蛋白的多肽鏈有a、b、d 、e、g和z六種。這六種肽鏈的基因在人體發育的不同階段表達狀況不一。正常成人紅細胞中有三種血紅蛋白即HbA、 HbA2 和 HbF。HbA(a2b2)是正常成人紅細胞中的
清蛋白電泳檢查:蛋白質等生物分子在緩沖液中帶負或正電荷,在電場中向陽極移動,稱為電泳。由于其等電點、分子大小、形狀、帶電荷量多少有差異,使不同的蛋白質分子具有不同的電泳遷移率,在一定的支持介質中可借以分離各種蛋白質。在臨床化學中常用的電泳技術有:醋酸纖維素薄膜、瓊脂糖凝膠法、免疫電泳法、聚丙烯酰胺法