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    LCM顯微切割

    這段時間做的LCM顯微切割少量組織,提取ng量級RNA的過程奉上。此類RNA可以經兩輪擴增后上樣進行基因芯片的研究;或直接作為模板進行RT-PCR的研究。雖然過程復雜一些,目前看效果還是不錯。 標本來自新鮮的動物或人體的組織標本,取材后液氮速凍后,-80℃存放備用。 標本冰凍切片的要求: 1.每例標本切取覆膜切片5張,玻璃切片一張,厚度8 μm,不染色。切片過程中盡量保持冰凍低溫,保持無RNA酶狀態。 2.每張切片放置一張組織切片,盡量減少“粗切”。 3.用抗RNA酶液清潔所有標本可能接觸的地方,包括手套、切片、切片盒。用全新的切片盒運送切片。 4.每個標本相對應的切片應該標記相應標本的標號以及切取的連續號碼。所有切片剩余的組織重新放入原來的標本儲存管中,-80℃存放。 5.每例標本均應用一枚新的刀片,并且用抗RNA酶液擦拭,防止 RNA的......閱讀全文

    四款主流的激光捕獲顯微切割平臺(上)

      眾所周知,哺乳動物組織并非同源的。它是由不同的細胞類型組成,其功能、形態和基因表達皆不同。在很多時候,我們開展組織水平的研究,測定肝臟或腫瘤的基因表達,其實這樣只能得到混合群體的平均數。通常我們會忽略個體差異,但最近發表在《Cell》雜志上的一篇文章為我們敲響了警鐘。   懷特黑德生物醫學研究

    四款主流的激光捕獲顯微切割平臺(下)

      目前市場上主要有四家公司提供激光顯微切割的平臺,他們分別是Arcturus/Life Technologies、徠卡、蔡司和MMI。在上一篇文章中,我們介紹了前兩個,這回則帶您看看MMI和蔡司的產品,以及新手該如何選擇。   MMI   瑞士MMI公司的單細胞獲取平臺有兩大旗艦產品:Ce

    Wes全自動蛋白印跡技術助力微量蛋白樣品的檢測

      科學家經常通過蛋白質的表達及修飾情況來揭示對應樣品的生理或病理狀態。WesternBlot是進行蛋白檢測的最經典技術。核酸檢測對樣品量的要求極低,因為DNA或RNA具備體外擴增的性質。而蛋白質檢測只能受限于能夠獲得的原始樣品量。傳統WesternBlot每個泳道所需的蛋白總量達10-100μg,

    激光顯微細胞分離技術

      在基礎醫學研究中涉及越來越多的如某一疾病狀態組織中,多種基因或遺傳變化,區別發展中的組織細胞群以及疾病狀態組織細胞,將有助于了解疾病發生的分子機制。因此,在下一代的分子分析方法將需要進入微觀世界及自動化程度高。對某一特殊個體的切片進行遺傳指紋圖譜鑒定,將有助于診斷及指導治療。 

    特定細胞類型標記的細胞核分離

    從大量的植物或動物組織中分離出特異性的細胞類型是費力和棘手的。為了研究表觀遺傳學上的改變和在不同細胞系中不同表達的基因,如癌細胞與正常細胞,或者擬南芥中兩種類型的表皮細胞(epidermal cell),人們通常必須采用激光捕獲顯微切割(laser capture microdissection,

    基因芯片篩選發現大腸癌早期診斷分子標志物

      大腸癌是人類最常見的惡性腫瘤之一,其發病率位居全球惡性腫瘤第三位。2006年國家衛生部的統計數據顯示,我國大腸癌死亡率已位居惡性腫瘤第五位,其發病率在40歲開始上升,至60-75歲時達到高峰。發病率呈逐年上升趨勢。對大腸癌的早期診斷有助于大腸癌的治療,減少病死率。   早期診斷包括兩方面含義:

    布魯克總裁專訪:科學大咖靈感加磅 timsTOF創新廣泛開花

      分析測試百科網訊 東方人的思維更偏向于實用主義,比如大家常認為創新來自于應用驅動;世界上還有一種創新首先來自于技術或理論的突破,然后再去尋找應用的方向,布魯克的timsTOF便是后者。2016年發布Trapped Ion Mobility捕集離子淌度質譜后,引起了組學和臨床領域科學大咖們的廣泛興

    Cancer Cell:聯合共同鑒定診斷混合型肝癌生物標志物

      肝細胞癌(HCC)和肝內膽管癌(ICC)是原發性肝癌(PLC)的兩種主要類型,分別占約80%和15%。肝細胞合并肝內膽管細胞癌(cHCC-ICC)是一種罕見的PLC,研究顯示肝細胞和膽管上皮分化發病率在0.4%和14.2%之間變化。與HCC和ICC相比,cHCC-ICC具有更強的侵襲行為和更差的

    循環內腫瘤細胞測序與分析最新進展和挑戰!

      循環腫瘤細胞(CTC)從原發性腫瘤組織脫落并被循環系統中的血液沖走。 這些CTC可以在循環系統中長存或殖民于新位置,并在遠端器官形成轉移性克隆。 目前,CTC分析已經成為臨床上有效檢測腫瘤進展和預后的工具。隨著下一代測序(NGS)和單細胞測序(SCS)技術的進步,科學家可以獲得CTC的完整基因組

    2018中國質譜大會生命科學與醫學集錦

      分析測試百科網訊 2018年11月24日-26日,2018年中國質譜學術大會在廣州東方賓館盛大召開。本次大會包括一個報告主論壇,21個主題分論壇,共300余場演講報告。在“生命科學與醫學”分論壇上,數十位業內專家學者帶來精彩的演講報告,吸引參會人員駐足聆聽。分析測試百科網作為本次活動的合作媒體,

    顯微標本的制作-切片

    顯微標本的制作4.1  橫切制片或縱切制片4.1.1  藥材的預處理   將應觀察的部位、切成適當大小的塊或段,一般以寬lcm、長3cm為宜,切面削平整。質地軟硬適中的樣品可直接進行切片;質地堅硬的則需先使其軟化后再切片。制片的預

    在基因組范圍定位DNA甲基化

      DNA甲基化在哺乳動物基因表達中扮演了重要角色。盡管通過線粒體遺傳且隨時間穩定,但是細胞分化、疾病或環境影響都會改變DNA甲基化的模式。近年來,科學家們開發出多種新方法,試圖在基因組范圍定位DNA甲基化。   盡管從理論上來說,全基因組亞硫酸氫鹽測序能讓研究人員全面觀察甲基化組,但它還是面臨技

    Ettan DIGE熒光差異蛋白表達分析系統

    原理和應用:    Ettan DIGE熒光差異蛋白表達分析系統在傳統雙向電泳技術的基礎上,結合了多重熒光分析的方法,在同一塊膠上共同分離多個分別由不同熒光標記的樣品,并第一次引入了內標的概念,極大地提高了結果的準確性,可靠性和重復性。在DIGE技術中,每個蛋白點都有它

    Nat Genet:女性常見乳腺腫瘤的遺傳基因med12突變

      乳腺纖維腺瘤(Fibroadenomas),發生于乳腺小葉內纖維組織和腺上皮的混合性瘤,是乳房良性腫瘤中最常見的一種。乳腺纖維腺瘤可發生于青春期后的任何年齡的女性,但以18~25歲的青年女性多見。圖片來源于網絡  最近,新加坡國立癌癥中心、杜克新加坡國立醫學研究所和新加坡總醫院的科學家組成的一個

    女性常見乳腺腫瘤的遺傳學原因

      乳腺纖維腺瘤(Fibroadenomas),發生于乳腺小葉內纖維組織和腺上皮的混合性瘤,是乳房良性腫瘤中最常見的一種。乳腺纖維腺瘤可發生于青春期后的任何年齡的女性,但以18~25歲的青年女性多見。  最近,新加坡國立癌癥中心、杜克新加坡國立醫學研究所和新加坡總醫院的科學家組成的一個多學科小組,對

    單細胞基因組測序如何實現:從實驗到分析,步步解析

      隨著生命科學研究的微觀化,基于細胞群體的研究方法已不適用于某些研究領域(如腫瘤異質性、早期胚胎發育等)。單細胞基因組測序通過在單個細胞水平上進行測序,解決了用組織樣本無法獲得不同細胞間的異質性信息或樣本量太少無法進行常規測序的難題,為科學家研究單個細胞的行為、機制等提供了新的方向。  【應用概覽

    跨越精神分裂癥研究的鴻溝—從基因組研究到疾病機制

      精神分裂癥等精神疾病癥狀復雜,對其發病機制的研究較為困難。近年來,全基因組關聯分析研究(Genome-Wide Association Study,GWAS)報道了百余個精神分裂癥顯著相關的遺傳位點,指向數百個基因。然而,這些易感位點大部分位于基因組的非編碼區域,且由于連鎖不平衡效應的存在,易感

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