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  • 翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗

    蛋白質翻譯后修飾 (PTM) 在細胞生物調節中發揮著基本作用。PTM 是 mRNA 翻譯后蛋白質的酶促共價化學修飾。蛋白質化學修飾非常重要,因為它們會潛在地改變蛋白質的物理或化學性質、組成、活性、細胞定位或穩定性。實際上,在氨基酸或蛋白質的 N 端或 C 端加入或移除化學基團會導致大部分蛋白質發生變化。一些 PTM 可以被動態地添加或移除,這是一種可逆的蛋白質功能實驗步驟一、引言蛋 白 質 翻 譯 后 修 飾 (P T M ) 在 細 胞 生 物 調 節 中 發 揮 著 基 本 作 用 。 P T M 是 m R N A 翻譯 后 蛋 白 質 的 酶 促 共 價 化 學 修 飾 。蛋 白 質 化 學 修 飾 非 常 重 要 ,因 為 它 們 會 潛 在 地 改 變 蛋白 質 的 物 理 或 化 學 性 質 、組 成 、活 性 、細 胞 定 位 或 穩 定 性 。實 際 上 ,在 氨 基 酸 或 蛋 白 質 的 N端 或 C 端 ......閱讀全文

    翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗

    蛋白質翻譯后修飾 (PTM) 在細胞生物調節中發揮著基本作用。PTM 是 mRNA 翻譯后蛋白質的酶促共價化學修飾。蛋白質化學修飾非常重要,因為它們會潛在地改變蛋白質的物理或化學性質、組成、活性、細胞定位或穩定性。實際上,在氨基酸或蛋白質的 N 端或 C 端加入或移除化學基團會導致大部分蛋白質發生變

    翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗

    翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗步驟 一、引言 蛋 白 質 翻 譯 后 修 飾 (P T

    翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗3

    三、蛋白質的硝化修飾 酪氨酸、色氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸側鏈的硝化與亞硝化作用構成了蛋白質硝化PT M 的主要部分。這些加成反應由發育、氧化應激及衰老過程中產生的活性氮介導。活性氮的增加是由一氧化氮和活性氧的過度反應或調控紊亂造成的(Yeo et al.,2008)。活性氮和活性氧能夠靶向于DN

    翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗6

    七、P T M 的定量分析當研究 P T M 的生物學意義時,如能了解一個特定修飾或一組P T M 的相對或絕對豐度通常會有幫助。這樣可以將不同的生物樣品間的目的修飾進行直接比較。例如, 將正常與疾病狀態下細胞或組織內某一 P T M 的豐度進行比較。定量分析這些變化能夠幫助深人了解 P T M 在

    翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗(五)

    六、CID、ECD和 ETD的對比 基于質譜的蛋白質組學分析依賴于氣相中肽段在低碰撞能量下斷裂, 在質量譜圖中形成峰。進而通過峰圖確定肽段序列,再推斷出相關蛋白質。完成肽段斷裂最主要的方法就是碰撞誘導解離(collision induced dissociation,C I

    翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗5

    六、CID、ECD和 ETD的對比基于質譜的蛋白質組學分析依賴于氣相中肽段在低碰撞能量下斷裂, 在質量譜圖中形成峰。進而通過峰圖確定肽段序列,再推斷出相關蛋白質。完成肽段斷裂最主要的方法就是碰撞誘導解離(collision induced dissociation,C I D ) ( S w a n

    翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗(三)

    2.2 糖基化糖 基 化 是 一 種 常 見 的 P T M , 并 且 已 經 證 明 能 夠 影 響 酶 的 活 性 、蛋 白 質 定 位 、穩 定 性 、信 號 轉 導 、細 胞 黏 附 和 蛋 白 質 相 互 作 用 (Spiro, 2002k 目 前 已 經 發 現 在 腫 瘤 惡

    翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗4

    五、質 譜 分 析質譜儀器的多種設計和配置都支持蛋白質組的動態性質及其相關 P T M 的研究工作 。對 鑒 定 PTM 而言,質譜儀的最重要的兩個特征(feature) 就是其質量準確度和分辨率 。與蛋白質鑒定不同 (其通常是基于鑒定同一蛋白質中的多個獨立肽段)P T M 必須通過單獨的 MS/M

    翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗6

    七、P T M 的定量分析 當研究 P T M 的生物學意義時,如能了解一個特定修飾或一組P T M 的相對或絕對豐度通常會有幫助。這樣可以將不同的生物樣品間的目的修飾進行直接比較。例如, 將正常與疾病狀態下細胞或組織內某一 P T M 的豐度進行比較。定量分析這些變化能夠幫助

    翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗(一)

    一、引言蛋 白 質 翻 譯 后 修 飾 (P T M ) 在 細 胞 生 物 調 節 中 發 揮 著 基 本 作 用 。 P T M 是 m R N A 翻譯 后 蛋 白 質 的 酶 促 共 價 化 學 修 飾 。蛋 白 質 化 學 修 飾 非 常 重 要 ,因 為 它 們 會 潛 在 地

    翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗(五)

    六、CID、ECD和 ETD的對比基于質譜的蛋白質組學分析依賴于氣相中肽段在低碰撞能量下斷裂, 在質量譜圖中形成峰。進而通過峰圖確定肽段序列,再推斷出相關蛋白質。完成肽段斷裂最主要的方法就是碰撞誘導解離(collision induced dissociation,C I D ) ( S w

    翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗2

    二、用 于 鑒 定 P T M 的富 集 技 術2.1 磷酸化絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸殘基的可逆磷酸化也許是研究最為深人的 PT M 。蛋白質磷酸化信號網絡介導細胞對與不同的應激因子、生長因子、細胞因子以及細胞間相互作用作出響應。憐酸化還影響多種細胞進程,如增殖、凋亡 、遷移 、轉錄和蛋白質翻譯(W

    翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗(四)

    三、蛋白質的硝化修飾酪氨酸、色氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸側鏈的硝化與亞硝化作用構成了蛋白質硝化PT M 的主要部分。這些加成反應由發育、氧化應激及衰老過程中產生的活性氮介導。活性氮的增加是由一氧化氮和活性氧的過度反應或調控紊亂造成的(Yeo et al.,2008)。活性氮和活性氧能夠靶向于D

    翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗(二)

    二、用 于 鑒 定 P T M 的富 集 技 術2.1 磷酸化絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸殘基的可逆磷酸化也許是研究最為深人的 PT M 。蛋白質磷酸化信號網絡介導細胞對與不同的應激因子、生長因子、細胞因子以及細胞間相互作用作出響應。憐酸化還影響多種細胞進程,如增殖、凋亡 、遷移 、轉錄和蛋白

    翻譯后修飾

    中文名翻譯后修飾外文名Post-translational modification定義翻譯后修飾是指蛋白質在翻譯后的化學修飾。對于大部分的蛋白質來說,這是蛋白質生物合成的較后步驟。

    關于翻譯后修飾蛋白質的介紹

      前體蛋白是沒有活性的,常常要進行一個系列的翻譯后加工,才能成為具有功能的成熟蛋白。加工的類型是多種多樣的,一般分為以下幾種:N-端fMet或Met的切除、二硫鍵的形成、化學修飾和剪切。當合成蛋白質時,20種不同的氨基酸會組合成為蛋白質。蛋白質的翻譯后蛋白質其他的生物化學官能團(如醋酸鹽、磷酸鹽、

    蛋白質翻譯后修飾的驗證問題

    Why are proteins, detected by mass spectrometry, not validated by site-specific antibodies?The modified motif could be detected by mass spectrometry (

    關于翻譯后修飾的蛋白質的基本介紹

      前體蛋白是沒有活性的,常常要進行一個系列的翻譯后加工,才能成為具有功能的成熟蛋白。加工的類型是多種多樣的,一般分為以下幾種:N-端fMet或Met的切除、二硫鍵的形成、化學修飾和剪切。當合成蛋白質時,20種不同的氨基酸會組合成為蛋白質。蛋白質的翻譯后蛋白質其他的生物化學官能團(如醋酸鹽、磷酸鹽、

    Molecular-Cell:蛋白質翻譯后修飾調控植物脅迫反應

      甲基化修飾與一氧化氮(nitric oxide; NO)依賴的亞硝基化修飾是高度保守的蛋白質翻譯后修飾,這兩類修飾參與調控眾多生物學過程,包括調控非生物脅迫反應。但二者調控非生物脅迫的分子機制不甚清楚。   中國科學院遺傳與發育生物學研究所左建儒研究組在亞硝基化蛋白質組學研究中發現擬南芥蛋白質

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    用ETD線性離子阱質譜成功鑒定蛋白和翻譯后修飾

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    用ETD線性離子阱質譜成功鑒定蛋白和翻譯后修飾

    ?在翻譯后修飾和/或極堿肽的序列分析方面,電子轉移裂解( ETD )線性離子阱質譜是很有優勢的工具。傳統的誘導活化裂解(CAD)常用來鑒定蛋白,并試圖確定和找到他們修飾的位點,但這種技術有其本身固有的缺點,下面將詳細敘述。與線性離子阱的結合使用的ETD是蛋白質組學研究的一個可靠的技術,可以很容易

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