細菌總DNA的提取和鑒定
【目的和要求】1.學會CTAB法提取細菌總DNA。2.掌握DNA的瓊脂糖凝膠電泳法。【實驗原理】DNA在生物體內是與蛋白質形成復合物的形式存在的，因此提取出脫氧核糖核蛋白復合物后，必須將其中蛋白質去除。CTAB（溴代十六烷基三甲胺）是一種去污劑，它能與核酸形成復合物，在高鹽溶液中可溶并且穩定存在，若降低鹽濃度，CTAB與核酸的復合物會沉淀出來，而大部分蛋白和多糖仍溶于溶液中。DNA的電泳原理與蛋白質的電泳原理基本相同。DNA分子在高于其等電點的pH溶液中帶負電荷，在電場中向正極移動。由于DNA分子或DNA片斷的分子量差別，電泳后呈現遷移位置的差異。【實驗試劑和器材】（一）試劑：菌株（E.coli ）；蛋白酶K（20mg/ml）；瓊脂糖；標準DNA水解液1.10%SDS2．酚/氯仿/異戊醇（1/1/1）3.異丙醇；70%乙醇4．LB培養基：蛋白胨10g,酵母粉5g,NaCl 10g加蒸餾水至1升，然后滅菌備用。5．TE緩沖液：10......閱讀全文
CTAB法提取植物總DNA
實驗概要CTAB法是一種快速簡便的提取植物總DNA的方法，通過實驗掌握CTAB法從植物葉片提取DNA的原理和方法。?實驗原理CTAB ?(hexadecyltrimethylammonium ?bromide,十六烷基三甲基溴化銨)，是一種陽離子去污劑,具有從低離子強度溶液中沉淀核酸與酸性多聚糖的特
總DNA質量檢測及酶切
實驗目的：了解掌握檢測 DNA 質量的方法以及 DNA 定量的方法；了解影響 DNA 在瓊脂糖凝膠中泳動速率的因素；訓練 DNA 的瓊脂糖凝膠電泳操作及 DNA 的限制性內切酶操作。實驗原理：限制性內切酶能特異地結合于一段被稱為限制性酶識別序列的DNA序列之內或其附近的特異位點上,并切割雙鏈DNA。
小麥黃化苗總DNA的提取
實驗概要學習和掌握DNA的微量提取法。實驗原理小麥黃化苗經液氮研磨，可使細胞壁破裂，加入去污劑（如SDS），可使核蛋白體解析，然后使蛋白和多糖雜質沉淀，DNA進入水相，再用酚、氯仿抽提純化。本實驗采用SDS法，其主要作用是破膜。SDS屬陰離子去污劑，要溶解膜蛋白與脂肪，也可解聚核蛋白。SDS在溶液中
細菌總DNA的提取和鑒定
【目的和要求】1.學會CTAB法提取細菌總DNA。2.掌握DNA的瓊脂糖凝膠電泳法。【實驗原理】DNA在生物體內是與蛋白質形成復合物的形式存在的，因此提取出脫氧核糖核蛋白復合物后，必須將其中蛋白質去除。CTAB（溴代十六烷基三甲胺）是一種去污劑，它能與核酸形成復合物，在高鹽溶液中可溶并且穩定存在，若
植物總DNA提取方法和過程
植物總DNA提取植物總 DNA 的提取有多種方法,轉基因食品檢測中不同用途的 DNA 提取應該采用各自適宜的方法進行。下面介紹用于新鮮或干燥的植物性食品檢測的常見 DNA 提取方法。1、可用于 PCR 的粗提液微量制備1)原理與特點利用攪拌破碎食品組織,堿液破壞細胞壁然后再用緩沖液進行提取。此法主要
土壤總DNA的幾種提取方法
SDS?高鹽法（方案1）? ?具體步驟:?稱取1?g?土壤,放入研缽中,倒入適量的液氮,立即研磨;再倒入適量的液氮,研磨,重復3?次,使土壤顆粒研成粉末;?將13.5?ml?提取緩沖液（0.1?mol/L磷酸鹽[pH?=?8.0?]?,0.1?mol/L?EDTA?[pH?8.0?]?,0.1?mo
總DNA質量檢測及酶切實驗
實驗方法原理 在pH值為8.0~8.3時，核酸分子堿基幾乎不解離，磷酸全部解離，核酸分子帶負電，在電泳時向正極移動。采用適當濃度的凝膠介質作為電泳支持物，在分子篩的作用下，使分子大小和構象不同的核酸分子泳動率出現較大的差異，從而達到分離核酸片段檢測其大小的目的。核酸分子中嵌入熒光染料（如EB）后，在
總DNA質量檢測及酶切實驗
實驗目的是了解掌握檢測DNA 質量的方法以及DNA定量的方法；了解影響DNA在瓊脂糖凝膠中泳動速率的因素；訓練DNA的瓊脂糖凝膠電泳操作及DNA的限制性內切酶操作。來源：《遺傳學實驗教程》實驗方法原理在pH值為8.0~8.3時，核酸分子堿基幾乎不解離，磷酸全部解離，核酸分子帶負電，在電泳時向正極移動
總DNA質量檢測及酶切實驗
酶切法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 在pH值為8.0~8.3時，核酸分子堿基幾乎不解離，磷酸全部解離，核酸分子帶負電，在電泳時向正極移動。采用適當濃度的凝膠介質作為電泳支持
植物總DNA的快速少量抽提實驗
實驗方法原理 CTAB法：該方法簡便、快速，DNA產量高(純度稍次，適用于一般分子生物學操作)。 CTAB是一種非離子去污劑，植物材料在CTAB的處理下，結合65 °C水浴使細胞裂解、蛋白質變性、DNA被釋放出來。CTAB與核酸形成復合物，此復合物在高鹽（>0.7 mM）濃度下可溶，并穩