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    植物細胞葉綠體DNA的分離純化

    實驗方法原理 本實驗首先是制備植物新鮮組織勻漿、過濾,分離出完整的葉綠體,然后通過蔗糖密度梯度離心,把葉綠體與其他亞細胞結構分離開來。完整葉綠體經蛋白酶K酶解后,再通過酚-氯仿抽提獲得高純度的葉綠體DNA。實驗材料 植物新鮮幼嫩葉片試劑、試劑盒 緩沖液A(提取緩沖液)緩沖液B(裂解緩沖液)TE緩沖液蔗糖溶液乙酸鈉乙醇儀器、耗材 攪拌器冷凍離心機(Sorvall、Beckman等)筆刷(優質藝術筆刷)甩平式轉頭的超速離心機和合適的離心管恒溫水浴鍋用于酚抽提的50ml離心管30ml的離心管1.5ml的微量離心管微型離心機(1.5ml管)-20℃冰箱真空干燥儀實驗步驟 以下所有操作除特別指明外均在4℃進行。將攪拌器和離心管預冷,使用冷藏的緩沖液并在冰筒中操作。1.準備750ml緩沖液A,使用前往500ml緩沖液中加入BSA。2.收集25~30g健康的嫩葉,在提取之前可將植株置于黑暗中培養24~28h以降低淀粉含量。如果植物材料已被感染......閱讀全文

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