植物細胞葉綠體DNA的分離純化
實驗方法原理 本實驗首先是制備植物新鮮組織勻漿、過濾,分離出完整的葉綠體,然后通過蔗糖密度梯度離心,把葉綠體與其他亞細胞結構分離開來。完整葉綠體經蛋白酶K酶解后,再通過酚-氯仿抽提獲得高純度的葉綠體DNA。實驗材料 植物新鮮幼嫩葉片試劑、試劑盒 緩沖液A(提取緩沖液)緩沖液B(裂解緩沖液)TE緩沖液蔗糖溶液乙酸鈉乙醇儀器、耗材 攪拌器冷凍離心機(Sorvall、Beckman等)筆刷(優質藝術筆刷)甩平式轉頭的超速離心機和合適的離心管恒溫水浴鍋用于酚抽提的50ml離心管30ml的離心管1.5ml的微量離心管微型離心機(1.5ml管)-20℃冰箱真空干燥儀實驗步驟 以下所有操作除特別指明外均在4℃進行。將攪拌器和離心管預冷,使用冷藏的緩沖液并在冰筒中操作。1.準備750ml緩沖液A,使用前往500ml緩沖液中加入BSA。2.收集25～30g健康的嫩葉,在提取之前可將植株置于黑暗中培養24～28h以降低淀粉含量。如果植物材料已被感染......閱讀全文
小鼠精原細胞的分離和純化
【摘要】 目的 探討小鼠精原細胞的分離純化。 方法 用組合酶消化法制備7～8d小鼠的生殖細胞懸液；用Percoll不連續密度梯度法分離精原細胞。 結果 所獲細胞懸液內活細胞、死細胞及細胞團的百分比分別為90.08%、9.92%及8.91%；平均每個睪丸可獲得4.136×105個細胞；精原細胞主要分布
小鼠精原細胞的分離和純化
【摘要】 目的 探討小鼠精原細胞的分離純化。 方法 用組合酶消化法制備7～8d小鼠的生殖細胞懸液；用Percoll不連續密度梯度法分離精原細胞。 結果 所獲細胞懸液內活細胞、死細胞及細胞團的百分比分別為90.08%、9.92%及8.91%；平均每個睪丸可獲得4.136×105個細胞；精原細胞主要分布
簡述巨噬細胞的分離和純化
1、取2～3公斤重的家兔，耳緣靜脈注射10ml空氣處死動物或注射2ml（含130mg）戊巴比妥麻醉動物。仰臥固定，消毒胸部，剪開胸壁。以下過程注意無菌操作。小心從環狀軟骨下方剪下氣管，分離心臟和血管，取出肺，剪去脂肪和結締組織。用無菌紗布小心擦凈肺表面，稱重。 2、分離肺泡巨噬細胞：用夾子夾住
小鼠精原細胞的分離和純化
實驗概要精原細胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化、運動、衰老、死亡等項生命活動的調節機制的深入研究，精子發生機理的進一步闡明以及精原細胞異體、異種移植技術的實際應用，都迫切需要找到一種可行的方法將其分離純化，以期得到較高產量和純度的有活力的精原細胞，用于體外培養。資料表明，從成年嚙齒類的睪丸分離粗線
如何進行質粒DNA的分離，純化和鑒定
分離質粒時，可以將質粒去得很干凈。方法為：先用TE之類的試劑將菌液懸浮起來，再用NaOH和SDS將菌液裂解（起裂解作用的主要是NaOH，但此時，SDS可以與蛋白很好的結合）。第三步，加入酸中合第二步中的堿，并且將SDS沉淀下來，同時，SDS和蛋白也一起沉淀下來，而基因組上面有很多的蛋白，這樣基因組就
磁珠法分離純化DNA原理及其步驟
磁珠法純化DNA主要是利用利息交換吸附材料吸附核酸，從而將核酸和蛋白質等其細胞中其他物質分離。本文主要概述了磁珠法純化DNA原理、核酸分離與純化的原則、核酸分離與純化的步驟。磁珠法 純化DNA原理磁珠法核酸純化技術采用了納米級磁珠微珠，這種磁珠微珠的表面標記了一種官能團，能同核酸發生吸附反應。硅磁(
磁珠法分離純化DNA原理及其步驟
相關專題 磁珠法純化DNA主要是利用利息交換吸附材料吸附核酸，從而將核酸和蛋白質等其細胞中其他物質分離。本文主要概述了磁珠法純化DNA原理、核酸分離與純化的原則、核酸分離與純化的步驟。?磁珠法 純化DNA原理磁珠法核酸純化技術采用了納米級磁珠微珠，這種磁珠微珠的表面標記了一種官能團，能同核酸發生吸附
磁珠法分離純化DNA原理及其步驟
??? 磁珠法純化DNA原理??? 磁珠法核酸純化技術采用了納米級磁珠微珠，這種磁珠微珠的表面標記了一種官能團，能同核酸發生吸附反應。硅磁(Magnetic Silica Particle)就是指磁珠微珠表面包裹一層硅材料，來吸附核酸，其純化原理類型于玻璃奶的純化方式。離心磁珠是指磁珠微珠表
葉綠體色素的提取與分離
植物葉綠體色素主要有三類：1）葉綠素 2）類胡蘿卜素 3）藻膽素。高等植物葉綠體中含有前兩類，藻膽素僅存在于藻類植物中。實驗方法原理葉綠體中含有綠色素（包括葉綠素a和葉綠素b）和黃色素（包括胡蘿卜素和葉黃素）兩大類。它們與類囊體膜蛋白相結合成為色素蛋白復合體。它們的化學結構不同，所以它們的物化性質（
葉綠體的分離與熒光觀察
實驗方法原理 組織勻漿后懸浮在等滲介質中進行差速離心，是分離細胞器的常用方法。一個顆粒在離心場中的沉降速率取決于顆粒的大小、形狀、密度、離心力及介質黏度等。同一離心場中，同一時間內，密度和大小不同的顆粒沉降速率不同。依次增加離心力和離心時間，就能使非均一的懸浮液中的顆粒按其大小、密度先后分批沉降在離
葉綠體色素的提取與分離
一、原理葉綠體中含有綠色素（包括葉綠素a和葉綠素b）和黃色素（包括胡蘿卜素和葉黃素）兩大類。它們與類囊體膜蛋白相結合成為色素蛋白復合體。它們的化學結構不同，所以它們的物化性質（如極性、吸收光譜）和在光合作用中的地位和作用也不一樣。這兩類色素是酯類化合物，都不溶于水，而溶于有機溶劑，故可用乙醇、丙醇等
葉綠體的分離與熒光觀察
實驗概要本實驗介紹了葉綠體分離的基本原理及操作步驟。有助于了解葉綠體分離的一般原理和方法，并熟悉應用熒光顯微鏡方法觀察葉綠體熒光現象。實驗原理葉綠體是植物細胞中較大的一種細胞器，能發生特有的能量轉換。利用低速離心機可以分離葉綠體，其分離在等滲溶液（0.35mol/L氯化鈉或0.4mol/L蔗糖溶液）
葉綠體色素的提取與分離
一、原理葉綠體中含有綠色素（包括葉綠素a和葉綠素b）和黃色素（包括胡蘿卜素和葉黃素）兩大類。它們與類囊體膜蛋白相結合成為色素蛋白復合體。它們的化學結構不同，所以它們的物化性質（如極性、吸收光譜）和在光合作用中的地位和作用也不一樣。這兩類色素是酯類化合物，都不溶于水，而溶于有機溶劑，故可用乙醇、丙醇等
葉綠體的分離與熒光觀察
葉綠體足植物細胞所特有的能量轉換細胞器，光合作川就是在葉綠體中進行的。由于具有這一重要功能，所以它一直是細胞生物學、遺傳學和分子生物學的重要研究對象。葉綠體是植物細胞中較大的一種細胞器，利用低速離心即可分離集中進行各種研究。實驗目的一、通過植物細胞葉綠體的分離。了解細胞器分離的一般原理和方法。二．觀
葉綠體DNA的結構功能特點
chloroplast?DNA（cpDNA），存在于葉綠體內的DNA。高等植物葉綠體的DNA為雙鏈共價閉合環狀分子，其長度隨生物種類而不同，其大小在120kb到217kb之間，相當于噬菌體基因組的大小，例如，T4噬菌體的基因組約165kb。葉綠體DNA不含5-甲基胞嘧啶，這是鑒定cpDNA及其純度的
關于葉綠體DNA的詳細介紹
12個cpDNA分子。葉綠體具有獨立基因組，被認為是內共生起源的細胞器。葉綠體基因組是多拷貝的，具有比較保守的環狀結構，但也存在著一些例外。葉綠體基因組主要用于編碼與光合作用密切相關的一些蛋白和一些核糖體蛋白。葉綠體基因表達調控是在不同水平上進行的，光和細胞分裂素對葉綠體基因的表達也起著重要的調
長白豬精原細胞的分離和純化
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 酶消化法制備2月齡未成熟長白豬睪丸組織的單細胞懸液，以 2 %～4 %牛血清白蛋白 (BSA)連續梯度作為分離介質，采用重力沉降法并結合細胞貼壁培養的方法分離精原細胞。 實驗
長白豬精原細胞的分離和純化
實驗方法原理酶消化法制備2月齡未成熟長白豬睪丸組織的單細胞懸液，以 2 %～4 %牛血清白蛋白 (BSA)連續梯度作為分離介質，采用重力沉降法并結合細胞貼壁培養的方法分離精原細胞。實驗材料長白種系公豬試劑、試劑盒膠原酶胰蛋白酶脫氧核糖核酸酶牛血清白蛋白胎牛血清RPMI 1640培養基HE染液PBS儀
長白豬精原細胞的分離和純化
一、材料和方法1、實驗動物長白種系公豬，2月齡，由北京養豬中心葦溝現代化豬場提供。取活體睪丸，立即放入1640營養液中，待分離細胞。2、主要試劑及材料膠原酶（CLS，Sigma），胰蛋白酶（Sigma），脫氧核糖核酸酶（DNase,Promega），牛血清白蛋白（BSA，中國醫學科學院天津血液研究所
長白豬精原細胞的分離和純化
實驗方法原理酶消化法制備2月齡未成熟長白豬睪丸組織的單細胞懸液，以 2 %～4 %牛血清白蛋白 (BSA)連續梯度作為分離介質，采用重力沉降法并結合細胞貼壁培養的方法分離精原細胞。實驗材料長白種系公豬 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
植物細胞線粒體DNA的提取
實驗方法原理分離線粒體DNA和葉綠體DNA的原理是基本一致的。本方法首先是分離完整的細胞器,然后從細胞器中提取DNA。要獲得高純度的細胞器DNA,關鍵是要把所要的細胞器與其他亞細胞結構分離開來,這可以通過差速離心或梯度離心來完成。完整的細胞器經裂解后,可以通過CsCl離心或酚-氯仿抽提獲得DNA。在
植物細胞線粒體DNA的提取
實驗方法原理?分離線粒體DNA和葉綠體DNA的原理是基本一致的。本方法首先是分離完整的細胞器,然后從細胞器中提取DNA。要獲得高純度的細胞器DNA,關鍵是要把所要的細胞器與其他亞細胞結構分離開來,這可以通過差速離心或梯度離心來完成。完整的細胞器經裂解后,可以通過CsCl離心或酚-氯仿抽提獲得DNA。
植物細胞的質壁分離與分離復原
一、原理 生長的植物細胞是一個滲透系統，活細胞的原生質及其表層具有分別透性，原生質層內部含有一個大液泡，具有一定的溶質勢。當細胞與外界高滲溶液接觸時，細胞內的水分外滲，原生質隨著液泡一起收縮而發生質壁分離，其后，當與清水（或低滲溶液）接觸，或當外面的溶質進入時，具有液泡的原生質體就又吸水而發生
動物基因組DNA－的分離純化實驗——鹽溶法
本實驗目的是掌握鹽溶法大量制備動物基因組DNA 的基本原理和方法，根據核糖核蛋白與脫氧核糖核蛋白在一定濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同進行分離, 然后用蛋白質變性沉淀劑去除蛋白,使核酸釋放出來, 再利用核酸不溶于乙醇的性質將核酸析出, 達到分離提純的目的。實驗方法原理根據核糖核蛋白與脫氧核糖核蛋白在一
葉綠體分離的實驗原理是什么
分離葉綠體色素的原理是類胡蘿卜素中，胡蘿卜素是不飽和的碳氫化合物，β—胡蘿卜素水解可生成2分子維生素A，葉黃素是由胡蘿卜素衍生的二元醇，不能與堿發生皂化反應，根據這一點，可以將葉綠素和類胡蘿卜素分開。提取光合色素過程中，關鍵是速度。提取光合色素過程中，因為光合色素都是脂溶性的，因此用丙酮這種有機溶劑
提取與分離葉綠體色素的原理
提取葉綠體色素的原理是葉綠素是葉綠酸的酯，在堿的作用下，可使其酯鍵發生皂化作用，生成葉綠酸的鹽，能溶于水。分離葉綠體色素的原理是類胡蘿卜素中，胡蘿卜素是不飽和的碳氫化合物，β—胡蘿卜素水解可生成2分子維生素A，葉黃素是由胡蘿卜素衍生的二元醇，不能與堿發生皂化反應，根據這一點，可以將葉綠素和類胡蘿卜素
葉綠體色素的分離（柱層析法）
原理 吸附劑如蔗糖、Al2 O3 、MgO、CaCO3 等對各種物質有不同的吸附力，吸附力的大小隨吸附劑的種類而異；同一吸附劑在不同的溶劑中吸附力的大小也不同。被吸附的物質由于其結構中極性基團的種類和數量不同，吸附力也不相同。各種官能團的極性大小次序為；－CH2 －CH2 －＜－CH=
從豌豆組織分離葉綠體實驗
葉綠體分離 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 葉子組織 試劑、試劑盒
從豌豆組織分離葉綠體實驗
葉綠體分離實驗材料葉子組織 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒PBF-Percoll 溶液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
純化DNA實驗_基因組DNA的快速純化
試劑、試劑盒尾部緩沖液蛋白酶 K儀器、耗材離心管玻璃棒實驗步驟第 1 天1. 大約 1.5 cm 長的尾部活檢樣品放在一個 1.5 ml 盛有 0.7 ml 尾部緩沖液的小離心管中，加 35 ul 10 mg/ml 蛋白酶 K，在 55℃ 振搖溫育過夜。尾部緩沖液（配 25 ml）50 mmol/L