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多聚酶鏈式反應即PCR（polymerase chain reaction）技術，應用這一技術可以將微量目的基因（DNA片段）擴增一百萬倍以上。PCR反應理論的提出和技術的完善對于分子生物學的發展具有特殊的意義，它以敏感度高、特異性強、產率高、重復性好以及快速簡便等優點迅速成為分子生物學研究中應用最為廣泛的方法之一，并使得很多以往無法解決的分子生物學研究難題得以解決。發明這一技術的K. Mullis因此貢獻而獲得了1993年度諾貝爾化學獎。一、PCR技術的工作原理PCR的基本工作原理是以擬擴增的DNA分子為模板，以一對分別與模板5'末端和3'末端互補的寡核苷酸片段為引物（primer），在耐熱DNA聚合酶的作用下，按照半保留復制的機制沿著模板鏈延伸直至完成新的DNA分子合成。重復這一過程，即可使目的DNA片段得以大量擴增（圖14-1）。組成PCR反應體系的基本成分包括：模板DNA、特異性引物、耐熱DNA聚......閱讀全文
一、目的基因的獲得 目的基因是指所要研究或應用的基因，也就是將要克隆或表達的基因。獲得目的基因是分子克隆過程中最重要的一步。目前用于獲得目的基因的方法有幾種，如限制性內切酶直接分離法、文庫篩選法、體外擴增法和人工合成法等，其中限制性內切酶法直接分離目的基因和多聚酶鏈式反應（PCR）或逆轉錄-
一、目的基因的獲得目的基因是指所要研究或應用的基因，也就是將要克隆或表達的基因。獲得目的基因是分子克隆過程中最重要的一步。目前用于獲得目的基因的方法有幾種，如限制性內切酶直接分離法、文庫篩選法、體外擴增法和人工合成法等，其中限制性內切酶法直接分離目的基因和多聚酶鏈式反應（PCR）或逆轉錄-多聚酶鏈式
聚合酶鏈式反應簡稱PCR（英文全稱：Polymerase Chain Reaction）（又稱：多聚酶鏈式反應），聚合酶鏈式反應，是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法，由高溫變性、低溫退火（復性）及適溫延伸等幾步反應組成一個周期，循環進行，使目的DNA得以迅速擴增，具有特異性強、靈敏度高、操作簡便
一、目的基因的獲得目的基因是指所要研究或應用的基因，也就是將要克隆或表達的基因。獲得目的基因是分子克隆過程中最重要的一步。目前用于獲得目的基因的方法有幾種，如限制性內切酶直接分離法、文庫篩選法、體外擴增法和人工合成法等，其中限制性內切酶法直接分離目的基因和多聚酶鏈式反應（PCR）或逆轉錄-多聚酶鏈式
專題一：RNA干擾技術（RNAi）1995年，康奈爾大學的Su Guo博士用反義RNA阻斷線蟲基因表達的試驗中發現，反義和正義RNA都阻斷了基因的表達，他們對這個結果百思不得其解。直到1998年， Andrew Fire的研究證明，在正義RNA也阻斷了基因表達的試驗中，真正起作用的是雙鏈RNA。這些
一、兼并引物（Degenerate Primer）PCR 密碼子具有兼并性，如表22-4，單以氨基酸順序推測編碼的DNA序列是不精確的，但可以設計成對兼并引物，擴增所有編碼已知順序的核酸序列。用兼并引物時寡核苷酸中核苷酸序列可以改變，但核苷酸的數量應相同。兼并度越低，產物特異性越強，設計引物時應盡
第五節 PCR各處應用模式 一、兼并引物（Degenerate Primer）PCR 密碼子具有兼并性，如表22-4，單以氨基酸順序推測編碼的DNA序列是不精確的，但可以設計成對兼并引物，擴增所有編碼已知順序的核酸序列。用兼并引物時寡核苷酸中核苷酸序列可以改變，但核苷酸的數量應相同。兼并度越低，
一、兼并引物（Degenerate Primer）PCR 密碼子具有兼并性，如表22-4，單以氨基酸順序推測編碼的DNA序列是不精確的，但可以設計成對兼并引物，擴增所有編碼已知順序的核酸序列。用兼并引物時寡核苷酸中核苷酸序列可以改變，但核苷酸的數量應相同。兼并度越低，產物特異性越強，設計引物時應盡
第一節 概述 聚合酶鏈反應或多聚酶鏈反應（Polymerase Chain Reaction, PCR），又稱無細胞克隆技術(“free bacteria”cloning technique)，是一種對特定的DNA片段在體外進行快速擴增的新方法。該方法一改傳統分子克隆技術的模式，不通過活細胞，操作
1 概述 熒光定量多聚酶鏈式反應是一種新的核酸定量技術。該技術將熒光能量傳遞技術（fluorescence resonance energy transfer，FRET）應用于常規多聚酶鏈式反應（poly
劉向國 謝國明 (重慶醫科大 重慶市 400016)摘 要 熒光定量PCR儀技術是一種新的核酸定量技術，該技木在PCR儀反應系統中引人了熒光標記探針，具有可實時監測，高靈敏性，高特異性和高精確性的特點，極大地克服了原有PCR儀技術的不足，擴大了PCR儀的應用范圍。關鍵詞 定量pcr；熒光；基因Flu
植物病毒病是農業生產上一種重要病害，嚴重影響農作物的產量和質量, 目前還沒有1種治療效果較理想的藥劑，對發病植株做到早期診斷及提前檢測就顯得尤為重要。植物病毒學歷經近百年的發展，植物病毒的檢測方法與手段也在不斷發展與改進。常用的方法有侵染力測定法、血清學方法、電子顯微鏡計數和分子生物學法等。1.1侵
PCR（聚合酶鏈式反應）技術的基本原理類似于DNA的天然復制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性→退火→延伸三個基本反應步驟構成：①模板DNA的變性：模板DNA經加熱至93℃左右一定時間后，使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結合
艾滋病(AIDS)又稱獲得性免疫缺陷綜合征，是由人類免疫缺陷病毒(HIV)感染所引起的一種免疫缺陷性疾病。HIV感染的診斷是艾滋病預防控制 工作的重要組成部分，建立敏感實用的檢測方法對于監測、診斷或血液篩查，控制艾滋病的流行顯得尤為重要。以下本文就HIV的檢測技術現狀及進展做一綜述。1
摘要：近年來，微生物及其產生的各類毒素引發的食品污染層出不窮，微生物污染造成的食源性疾病仍是世界食品安全中令人頭痛的問題。隨著生物學技術和微電子技術的發展，食品微生物快速檢驗技術有了較大進展。PCR技術用于食品中致病微生物的檢測較之傳統方法具有快速、 特異、 敏感等特性 ,其優越性無可比擬 ,因
感染性疾病有病原微生物引起，致病的病原微生物主要有病毒、細菌、衣原體、支原體和螺旋體等。這些病原體的傳統檢測方法通常采用形態學檢查，體外培養和免疫學試驗。但對某些難以培養的病原體，抗原抗體檢測不能判斷體內病原體 DNA 或 RNAde 復制情況，或存在檢測靈敏度低等問題。自聚合酶鏈反應（ PCR ）
1實驗原理 1.1聚合酶鏈式反應（PCR）的基本構成 PCR指在引物指導下由酶催化的對特定模板（克隆或基因組DNA）的擴增反應，是模擬體內DNA復制過程，在體外特異性擴增DNA片段的一種技術，在分子生物學中有廣泛的應用，包括用于DNA作圖、 DNA測序、分子系統遺傳學等。 PCR基本原理
PCR（Polymerase Chain Reaction）即聚合酶鏈式反應是1986 年由Kallis Mullis 發現。這項技術已廣泛地應用于分子生物學各個領域，它不僅可用于基因分離克隆和核酸序列分析，還可用于突變體和重組體的構建，基因表達調控的研究，基因多態性的分析，遺傳病和傳染病診斷，腫瘤
自1985年 Mullis 發明了體外多聚酶鏈反應(PCR)至今, PCR在遺傳病、病原體、癌基因等分子診斷領域和法醫鑒定等方面發揮了巨大作用.今天的第三代PCR技術, 即絕對定量的數字化 PCR也備受關注。來自西安交通大學生命科學與技術學院等處的研究人員近期發表綜述，介紹了 PCR 技術的發展
聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction，PCR)可對特定核苷酸片斷進行指數級的擴增。在擴增反應結束之后，我們可以通過凝膠電泳的方法對擴增產物進行定性的分析，也可以通過放射性核素摻入標記后的光密度掃描來進行定量的分析。無論定性還是定量分析，分析的都是PCR終產物。但是在許多
近年來，我國科研院所、高等院校就食品安全檢測技術的研究與開發取得了明顯的進展。 色譜檢測技術的研究與應用普遍發展。色譜法創立已有近100年的歷史，但一直到20世紀40年代中期，仍然是人們所采用的唯一一種色譜方法。1952年，氣相色譜法被提出，使色譜法的發展前進了一大步，由于應用面廣泛而受到人們的重視
1、食品安全問題主要有害污染物:（1）農藥,化肥:有機磷,有機氯，硝酸鹽（2）獸藥：興奮劑，鎮靜劑，抗生素（3）重金屬離子：鎘，鉛，汞，鉻，砷，鉬（4）生物毒素：黃曲霉毒素，嘔吐毒素，肉毒素（5）致病菌：大腸桿菌，沙門氏菌，葡萄球菌。 2、快速檢測：包括樣品制備在內，能夠在短時間內出據檢測
47、水溶性非食用色素的快速檢測原理： 水溶性非食用色素與脫脂羊毛染色后不易去除的原理對部分水溶性非食用色素進行檢測。 48、味精谷氨酸鈉的快速檢測原理： 利用谷氨酸鈉的兩性作用，加入甲醛一固定谷氨酸鈉的堿性，使羥基顯示出酸性，用氫氧化鈉標準溶液滴定，以指示劑顯示為終點，得出樣品中谷氨酸
快速檢測技術廣泛用于食品安全快速檢測，臨床檢驗、檢驗檢疫、毒品檢驗等公共領域。食品安全快速檢測是指對食品利用便攜式分析儀器及配套試劑快速得到檢測結果的一種檢測方式。 1、食品安全問題主要有害污染物 （1）農藥,化肥:有機磷,有機氯，硝酸鹽
一、目的了解多聚合酶鏈反應DNA 擴增技術的基本原理和實驗應用，掌握PCR反應基本技術。二、原理PCR（Polymerase Chain Reaction）即聚合酶鏈式反應是1986 年由Kallis Mullis 發現。這項技術已廣泛地應用于分子生物學各個領域，它不僅可用于基因分離克隆和核酸序列分
一、目的了解多聚合酶鏈反應DNA 擴增技術的基本原理和實驗應用，掌握PCR反應基本技術。二、原理PCR（Polymerase Chain Reaction）即聚合酶鏈式反應是1986 年由Kallis Mullis 發現。這項技術已廣泛地應用于分子生物學各個領域，它不僅可用于基因分離克隆和核
PCR技術（多聚酶鏈式反應）是現代分子生物學的一個巨大突破，它能在體外迅速、 大量、靈敏地擴增基因片段。可是，經PCR技術擴增的大量相關基因片段如何能有效 拼接，卻是一個很值行探討的問題。傳統的方法是引入限制性內切酶位點，這不但操 作繁雜，而有時為了構建限性位點還會影響解讀三聯密碼的正確性。本介紹兩
一、實驗目的1．學習PCR基因擴增的基本原理和操作方法。2．理解PCR基因擴增在分子生物實驗技術中的重要性。3．了解引物設計的一般要求。二、實驗原理多聚酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction, PCR )：原理類似于DNA的變性和復制過程，即在高溫（93-95℃）下，待擴增的
(2) 血清學診斷：包括補體結合試驗、血凝抑制試驗以及中和試驗。血凝抑制抗體和 中和抗體存在于IgM和IgG兩種免疫球蛋白中，而補體結合抗體只存在于IgG部分內。 ① 補體結合試驗：特異性較高，是流行病學上確認乙腦的一種常用方法。 但因補體 結合抗體的出現較晚，動物大多于發病后2周左右才呈陽性反應
一、原理多聚酶鏈式反應（polymerase chain reaction , PCR）類似于DNA 的天然復制過程：經過變性、退火、延伸多次循環（圖1 ) , DNA 擴增倍數可達2 n 倍。即Y = ( 1 + X ) n式中，Y 為DNA 擴增倍數；X 為擴增效率；n 為循環次數二、材料（1）