微載體培養技術（microcarrierculturetechnique）原理操作2
5. 微載體培養操作要點 ●培養初期：保證培養基與微球體處于穩定的PH與溫度水平，接種細胞（對數生長期，而非穩定期）至終體積1/3的培養液中，以增加細胞與微載體接觸的機會。不同的微載體所用濃度及接種細胞密度是不同的。常使用2-3g/L的微載體含量，更高的微載體濃度需要控制環境或經常換液。 ●貼壁階段（3-8d）后，緩慢加入培養液至工作體積，并且增加攪拌速度保證完全均質混合。 ●培養維持期：進行細胞計數（胞核計數）、葡萄糖測定及細胞形態鏡檢。隨意細胞增殖，微球變得越來越重，需增加攪拌速率。經過3d左右，培養液開始呈酸性，需換液：停止攪拌，讓微珠沉淀5min，棄掉適宜體積的培養液，緩慢加入新鮮培養液（37℃），重新開始攪拌。 ●收獲細胞：首先排干培養液，至少用緩沖液漂洗1遍，然后加入相應的酶，快速攪拌（75-125r/min）20-30min。然后解離收集細胞及其產品。 ● 微載體培養的放大：可以通過增加微載體的......閱讀全文
微載體培養技術（microcarrier－culture－technique）原理操作2
5. 微載體培養操作要點 ●培養初期：保證培養基與微球體處于穩定的PH與溫度水平，接種細胞（對數生長期，而非穩定期）至終體積1/3的培養液中，以增加細胞與微載體接觸的機會。不同的微載體所用濃度及接種細胞密度是不同的。常使用2-3g/L的微載體含量，更高的微載體濃度需要控制環境或經常換液。 ●
微載體培養技術（microcarrier－culture－technique）原理操作1
一、微載體培養應用此技術于1967年被用于動物細胞大規模培養。經過三十余年的發展，該技術目前已漸日趨完善和成熟，并廣泛應用于生產疫苗、基因工程產品等。微載體培養是目前公認的最有發展前途的一種動物細胞大規模培養技術，其兼具懸浮培養和貼壁培養的優點，放大容易。目前微載體培養廣泛用于培養各種類型細胞，生產
微載體培養操作要點
●培養初期：保證培養基與微球體處于穩定的PH與溫度水平，接種細胞（對數生長期，而非穩定期）至終體積1/3的培養液中，以增加細胞與微載體接觸的機會。不同的微載體所用濃度及接種細胞密度是不同的。常使用2-3g/L的微載體含量，更高的微載體濃度需要控制環境或經常換液。●貼壁階段（3-8d）后，緩慢加入培養
微載體培養的原理
?? 微載體培養技術（micro-carrierculturetechnique）于1967年被用于動物細胞大規模培養。經過三十余年的發展，該技術日趨完善和成熟，廣泛應用于生產疫苗、基因工程產品等。??? 微載體是指直徑60-250μm，能適用于貼壁細胞生長的微珠。一般是由天然葡聚糖或者各種合成的聚
微載體培養的技術方法
微載體培養是指微載體以微小顆粒作為細胞貼附的載體，可提供相當大的貼附面積，由于載體體積很小，比重較輕，在輕度攪拌下即可使得細胞懸浮在培養液內，最終能夠使細胞在載體表面繁殖成單層的一種細胞培養技術。
微載體技術的培養優點
●表面積/體積（S/V）大，因此單位體積培養液的細胞產率高；●把懸浮培養和貼壁培養融合在一起，兼有兩者的優點；●可用簡單的顯微鏡觀察細胞在微珠表面的生長情況；●簡化了細胞生長各種環境因素的檢測和控制，重現性好；●培養基利用率較高；●放大容易；●細胞收獲過程不復雜；●勞動強度小；●培養系統占地面積和空
微載體培養的技術特點
●表面積/體積（S/V）大，因此單位體積培養液的細胞產率高； ●把懸浮培養和貼壁培養融合在一起，兼有兩者的優點； ●可用簡單的顯微鏡觀察細胞在微珠表面的生長情況； ●簡化了細胞生長各種環境因素的檢測和控制，重現性好； ●培養基利用率較高； ●放大容易； ●細胞收獲過程不復雜； ●勞動強
微載體的原理與操作
1.原理：其原理是將對細胞無害的顆粒-微載體加入到培養容器的培養液中，作為載體，使細胞在微載體表面附著生長，同時通過持續攪動使微載體始終保持懸浮狀態。貼壁依賴性細胞在微載體表面上的增殖，要經歷黏附貼壁、生長和擴展成單層三個階段。細胞只有貼附在固體基質表面才能增殖，故細胞在微載體表面的貼附是進一步鋪展
微載體細胞培養技術及應用原理
微載體細胞培養技術是細胞培養過程中常見的一種細胞培養技術。關于微載體細胞培養技術，以動物細胞為例，具體介紹如下： 一、微載體培養技術的應用 微載體培養技術于1967年被用于動物細胞大規模培養。經過三十余年的發展，該技術目前已漸日趨完善和成熟，并廣泛應用于生產疫苗、基因工程產品等。
Aseptic－Technique－and－Good－Cell－Culture－Practice
AimTo ensure all cell culture procedures are performed to a standard that will prevent contamination from bacteria, fungi and mycoplasma and cross con
微載體細胞培養技術及應用原理（二）
5.微載體培養操作要點? 培養初期：保證培養基與微球體處于穩定的PH與溫度水平，接種細胞（對數生長期，而非穩定期）至終體積1/3的培養液中，以增加細胞與微載體接觸的機會。不同的微載體所用濃度及接種細胞密度是不同的。常使用2-3g/L的微載體含量，更高的微載體濃度需要控制環境或經常換液。? 貼壁階
微載體細胞培養技術及應用原理（一）
微載體細胞培養技術是細胞培養過程中常見的一種細胞培養技術。關于微載體細胞培養技術，以動物細胞為例，具體介紹如下： 一、微載體培養技術的應用微載體培養技術于1967年被用于動物細胞大規模培養。經過三十余年的發展，該技術目前已漸日趨完善和成熟，并廣泛應用于生產疫苗、基因工程產品等。微載體培養是目前公認的
Cytodex－1,－Cytodex－3－球形微載體的使用（一）
用于細胞培養的微載體 微載體培養（microcarrier culture）是一種用于高產量培養貼壁細胞的實用技術。CytodexTM專用于培養各類動物細胞，其培養體積可以從數毫升到6000升以上。應用Cytodex微載體技術，可以實現簡單的貼壁細胞懸浮化培養，每毫升培養液可得到數百萬細胞。微載
顯微操作技術（micromanipulation－technique）
顯微操作技術（micromanipulation technique）是指在高倍復式顯微鏡下，利用顯微操作器（micromanipulator）進行細胞或早期胚胎操作的一種方法。顯微操作器是用以控制顯微注射針在顯微鏡視野內移動的機械裝置。顯微操作的基礎平臺--倒置研究級顯微鏡（例如OLYMPUS的I
沉淀反應技術(Precipitation－reaction－technique)（2）
2．取試管5支（5mm×50mm）置于試管架上，編號。第1、2試管內加炭疽沉淀血清，第3、4試管內加正常血清，第5管內加待檢抗原，分別用毛細滴管加至4mm～5mm。3．第1、4、5試管輕輕疊加等量緩沖液，第2、3試管輕輕疊加等量待檢抗原。為防止上下兩界面破壞，可將小試管從試管架取出，微傾斜，沿試管壁
免疫熒光技術(immunofluorescence－technique)2
實驗材料 1. 40 孔酶標板 ? 2. 1:300 乙肝表面抗原溶液 ? 3. 1:10 待測血清 ? 4. 健康人血清 ? 5. HBsAg 診斷血清 ? 6. 辣根過氧化物酶標記羊抗人 IgG 抗體（酶標二抗） ? 7. 抗原稀釋液（ pH9
微載體的應用原理
1.原理：其原理是將對細胞無害的顆粒-微載體加入到培養容器的培養液中，作為載體，使細胞在微載體表面附著生長，同時通過持續攪動使微載體始終保持懸浮狀態。 貼壁依賴性細胞在微載體表面上的增殖，要經歷黏附貼壁、生長和擴展成單層三個階段。細胞只有貼附在固體基質表面才能增殖，故細胞在微載體表面的貼附是進一步
層析技術(Layeranalise－technique)(2)
離子交換纖維素的優點為：①離子交換纖維素為開放性長鏈，具有較大的表面積，吸附容量最大；②離子基團少，排列稀疏，與蛋白質結合不太牢固，易于洗脫；③具有良好的穩定性，洗脫劑的選擇范圍廣。 2．離子交換交聯葡聚糖 離子交換交聯葡聚糖也是廣泛使用的離子交換劑，它與離子交換纖維素不同點是載體不同，常用交聯葡聚
293細胞培養(cell－culture)技術
1、293細胞明顯適應酸性環境,pH值在6.9～7.1時,可順利貼壁生長, 換液時動作要輕。一般用高糖的DMEM培養基。2、傳代：倒去廢液，PBS洗一次（輕），用0.02%EDTA與0.25%Trypsin消化，生長良好細胞，培養瓶中輕搖,使之流遍所有細胞表面,即將其吸除或棄去消化30s，然后吸去，
Vero－細胞在－WAVE－反應器中的微載體球轉球放大（五）
相比攪拌罐而言，WAVE 反應器在同一個培養袋中可以有更寬的培養范圍（10-100%工作體積），對于種子擴增和細胞消化的不同反應體積，都可以提供均勻有效的混合，從而實現微載體的原位消化，而無需特定的消化反應器。避免了消化前后微載體的轉移，操作簡單，均勻有效的混合有利于精密控制消化反應的條件，最大
New－Brunswick－S41i－CO2－恒溫搖床進行間充質干細胞擴增（一）
A Novel Method for the Expansion of Mesenchymal Stem Cells using an Eppendorf New Brunswick? S41i CO2 Incubator ShakerKhandaker Siddiquee and Ma Sha,
貼壁細胞培養方法（平面2D培養、攪拌式培養、微載體培...
貼壁細胞培養方法（平面2D培養、攪拌式培養、微載體培養）優缺點比較貼壁細胞-----真正的貼壁、線性的放大（潮汐式反應器）細胞反應器是某種細胞的培養生長代謝過程的反應器，這個過程需要控制的條件比較多，比較復雜。細胞反應器根據工作方式和功能的分類：一、平面２Ｄ培養（培養皿、方瓶、滾瓶）：優點：成本低，
Principles－of－Aseptic－Technique——2
PersonnelAseptic technique requires careful attention to a series of steps which begins with patient and instrument preparation and ends at final woun
微載體細胞培養法介紹
（1）微載體選擇：先用利用三種小量微載體做培養實驗，觀察細胞在一定時間內細胞的吸著率和計算細胞數，以得到最大量細胞為佳。（2）水化：稱一定量的微載體放入容器中，按每克微載體加50～100ml的比例，加入無Ca2＋和Mg2＋的磷酸緩沖液（PBS），室溫下放置應不少于3小時，并不時輕微攪動，然后再用新鮮
離心技術（centrifugation－technique）與離心機類型(2)
離心機類型通常所使用的離心機根據轉子轉速大小的不同可分為普通離心機、高速離心機和超速離心機三類。(1)普通離心機一般來說，最大轉速不超過6000r/min 者屬普通離心機；如國產的80—1型，LXJ—Ⅱ型等。離心機轉速與相對離心力的測算，如圖2—37。普通離心機轉子在室溫下運轉，轉子室內的溫度一般無
免疫球蛋白提取技術(Immunoglobulin－isolation－technique)2
九、蛋白定量技術???（一）雙縮脲測定法?1．原理??蛋白質中的肽鍵有雙縮脲反應，在堿性溶液中與二價銅離子形成藍紫色的絡合物，在一定的范圍內，顏色的深淺與蛋白質的含量成正比。此法特異性強，游離的氨基酸、小肽和核酸均不產生這種反應，但此法不夠敏感，僅能測出毫克水平。?2．試劑配制?硫酸銅（CuSO4·
微載體
實驗方法原理以高濃度接種細胞和微珠，然后按照要求進行稀釋、攪拌和取樣。實驗材料起始培養物儀器、耗材生長培養基微載體攪拌培養瓶磁力攪拌器實驗步驟1. 按照所需最終培養液量的 1/3，以 2~3 g/L 混懸微珠。2. 用胰蛋白酶消化和計數細胞，以正常接種濃度的 3~5 倍將細胞接種到微珠懸液中。3.
微載體
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 以高濃度接種細胞和微珠，然后按照要求進行稀釋、攪拌和取樣。 實驗材料 起始培養物
微載體
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 以高濃度接種細胞和微珠，然后按照要求進行稀釋、攪拌和取樣。 實驗材料 起始培養物
植物細胞培養（plant－cell－culture）技術概述
植物細胞培養技術就是為了某種目的而在細胞水平上對離體植物細胞或原生質體進行的一系列生物工藝學操作。它包括分離、培養、再生以及一系列相關的操作。就有用化合物的生產來說，它主要是指在無菌條件下通過懸浮培養植物細胞生產有用化合物的過程。理論與技術基礎：植物細胞全能性、微生物液體深層發酵系統、遺傳工程