免疫熒光技術(immunofluorescencetechnique)2
實驗材料 1. 40 孔酶標板 2. 1:300 乙肝表面抗原溶液 3. 1:10 待測血清 4. 健康人血清 5. HBsAg 診斷血清 6. 辣根過氧化物酶標記羊抗人 IgG 抗體(酶標二抗) 7. 抗原稀釋液( pH9.6 碳酸鹽緩沖液) 8. 洗滌液( pH7.4 磷酸鹽—吐溫緩沖液) 9. 血清稀釋液(含 0.1% 牛血清白蛋白的磷酸鹽—吐溫緩沖液) 10. 底物顯色劑(鄰苯二胺—— H 2 O 2 溶液) 11. 終止液( 2M H 2 SO 4 ) 實驗方法 1.包被抗原:用抗原稀釋液將HBsAg按1:300稀釋成工作濃度,加入到40孔酶標板1-9孔,每孔0.1ml。第......閱讀全文
免疫熒光技術(immunofluorescence-technique)2
實驗材料 1. 40 孔酶標板 ? 2. 1:300 乙肝表面抗原溶液 ? 3. 1:10 待測血清 ? 4. 健康人血清 ? 5. HBsAg 診斷血清 ? 6. 辣根過氧化物酶標記羊抗人 IgG 抗體(酶標二抗) ? 7. 抗原稀釋液( pH9
免疫熒光技術(immunofluorescence-technique)3
思考題 1. 酶聯免疫吸附實驗的基本原理是什么?常用方法有那些? ? 2. 間接法和直接法相比各有什么優缺點? ? 放射免疫測定法—— 125 I 標記技術 放射免疫測定 (radioimmunoassay, RIA) 是將同位分析的高靈敏度與抗原抗體反應的特異性相結合,
免疫熒光技術(immunofluorescence-technique)1
免疫熒光技術(immunofluorescence technique)是一種以熒光物作為標記物的免疫分析技術,熒光物質分子在特定條件下吸收激發光的能量后,分子呈激發態而極不穩定,其迅速回到基態時,可以電磁輻射形式釋放出所有的光能,發射出波長較照射光長的熒光。用熒光素與已知的抗體(或抗原,較少用
免疫熒光技術(immunofluorescent-technique)簡介
1、熒光免疫測定技術的概念將試劑抗原或試劑抗體用熒光素進行標記,試劑與標本中相應的抗體或抗原反應后,測定復合物中的熒光素,這種免疫技術,稱為免疫熒光素技術。2、技術分類(1)熒光抗體技術(熒光顯微鏡技術):抗原抗體反應后,利用熒光顯微鏡判定結果的檢測方法。(2)免疫熒光測定技術:抗原抗體反應后,利用
沉淀反應技術(Precipitation-reaction-technique)(2)
2.取試管5支(5mm×50mm)置于試管架上,編號。第1、2試管內加炭疽沉淀血清,第3、4試管內加正常血清,第5管內加待檢抗原,分別用毛細滴管加至4mm~5mm。3.第1、4、5試管輕輕疊加等量緩沖液,第2、3試管輕輕疊加等量待檢抗原。為防止上下兩界面破壞,可將小試管從試管架取出,微傾斜,沿試管壁
層析技術(Layeranalise-technique)(2)
離子交換纖維素的優點為:①離子交換纖維素為開放性長鏈,具有較大的表面積,吸附容量最大;②離子基團少,排列稀疏,與蛋白質結合不太牢固,易于洗脫;③具有良好的穩定性,洗脫劑的選擇范圍廣。 2.離子交換交聯葡聚糖 離子交換交聯葡聚糖也是廣泛使用的離子交換劑,它與離子交換纖維素不同點是載體不同,常用交聯葡聚
免疫熒光技術簡介
免疫熒光技術(Immunofluorescence technique) 1941年,Coons等于首次采用熒光素進行標記而獲得成功。這種以熒光物質標記抗體而進行抗原定位的技術稱為熒光抗體技術(fluorescent antibody technique)。該技術的主要特點是:特異性強、敏
免疫熒光技術簡介
免疫熒光技術(Immunofluorescence technique)1941年,Coons等于首次采用熒光素進行標記而獲得成功。這種以熒光物質標記抗體而進行抗原定位的技術稱為熒光抗體技術(fluorescent antibody technique)。該技術的主要特點是:特異性強、敏感性
Principles-of-Aseptic-Technique——2
Personnel Aseptic technique requires careful attention to a series of steps which begins with patient and instrument preparation and ends at final w
關于免疫熒光技術的基本內容
免疫熒光技術(Immunofluorescence technique )又稱熒光抗體技術,是標記免疫技術中發展最早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合,利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。 免疫
離心技術(centrifugation-technique)與離心機類型(2)
離心機類型通常所使用的離心機根據轉子轉速大小的不同可分為普通離心機、高速離心機和超速離心機三類。(1)普通離心機一般來說,最大轉速不超過6000r/min 者屬普通離心機;如國產的80—1型,LXJ—Ⅱ型等。離心機轉速與相對離心力的測算,如圖2—37。普通離心機轉子在室溫下運轉,轉子室內的溫度一般無
微載體培養技術(microcarrier-culture-technique)原理操作2
5. 微載體培養操作要點 ●培養初期:保證培養基與微球體處于穩定的PH與溫度水平,接種細胞(對數生長期,而非穩定期)至終體積1/3的培養液中,以增加細胞與微載體接觸的機會。不同的微載體所用濃度及接種細胞密度是不同的。常使用2-3g/L的微載體含量,更高的微載體濃度需要控制環境或經常換液。 ●
免疫球蛋白提取技術(Immunoglobulin-isolation-technique)2
九、蛋白定量技術???(一)雙縮脲測定法?1.原理??蛋白質中的肽鍵有雙縮脲反應,在堿性溶液中與二價銅離子形成藍紫色的絡合物,在一定的范圍內,顏色的深淺與蛋白質的含量成正比。此法特異性強,游離的氨基酸、小肽和核酸均不產生這種反應,但此法不夠敏感,僅能測出毫克水平。?2.試劑配制?硫酸銅(CuSO4·
免疫熒光細胞化學技術2
四、熒光抗體的保存 以0~4℃或-20℃低溫保存,防止抗體活性降低和蛋白變性。最好加入濃度為1:5000~10000的硫柳汞或1:1000~5000的疊氮鈉防腐,小量分裝如0.1~1ml,真空干燥后更易長期保存。[NextPage] 第三節 免疫熒光細胞化學染色方法 一、標本制作 可制作涂片
免疫熒光簡介
免疫熒光技術(Immunofluorescence technique )又稱熒光抗體技術,是標記免疫技術中發展最早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合,利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。
免疫熒光技術的技術特點
免疫熒光技術(Immunofluorescence technique )又稱熒光抗體技術,是標記免疫技術中發展最早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合,利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。
熒光抗體技術的原理和作用機制
免疫熒光技術(Immunofluorescence technique )又稱熒光抗體技術,是標記免疫技術中發展最早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合,利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。
免疫熒光標記技術的原理
免疫熒光標記技術(immunofluorescence technique)是將已知的抗體或抗原分子標記上熒光素,當與其相對應的抗原或抗體起反應時,在形成的復合物上就帶有一定量的熒光素,在熒光顯微鏡下就可以看見發出熒光的抗原抗體結合部位,檢測出抗原或抗體。
免疫熒光技術介紹
免疫熒光技術(Immunofluorescence technique )又稱熒光抗體技術,是標記免疫技術中發展最早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合,利用抗原抗體反應,再借助激光共聚焦顯微鏡進行組織或細胞內抗原
Immunofluorescence-...
實驗概要Immunofluorescence ?is a technique used for light microscopy with a fluorescence microscope ?and is used primarily on biological samples. This tec
膠體金標記蛋白A技術(Protein-Agold-technique,-PAg法)2
(2)0、5mol/L,pH7.4 Tris-Hcl緩沖液:Tris,60.57g,1mol/L Hcl約420m1,調pH值至7.4,最后加雙蒸水至1000m1,此為儲備液。(3)0、05mo1/L Tris緩沖生理鹽水:氯化鈉8.5-9g;0.5mo1/L,pH7.4 Tris-Hcl緩沖液10
沉淀反應技術(Precipitation-reaction-technique)
一、???? 概述?可溶性抗原(如細菌浸出液、含菌病料浸出液、血清以及其他來源的蛋白質、多糖質、類脂體等)與其相應的抗體相遇后,在電解質參與下,抗原抗體結合形成白色絮狀沉淀,出現白色沉淀線,此種現象稱為沉淀反應。沉淀反應中的抗原叫沉淀原(precipitinogen),與沉淀原發生反應的抗體稱為沉淀
免疫印跡技術(Immunoblotting-technique)
免疫印跡技術又稱蛋白質印跡(Western blotting)是一種借助抗原鑒定特異性抗體的有效方法,該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫生化技術。本實驗以檢測可提取性核抗原(ENA)抗體為例。【實驗原理】先將ENA混合抗原經SDS-PAGE電泳,使各種抗原成分根據分子量不
顯微操作技術(micromanipulation-technique)
顯微操作技術(micromanipulation technique)是指在高倍復式顯微鏡下,利用顯微操作器(micromanipulator)進行細胞或早期胚胎操作的一種方法。顯微操作器是用以控制顯微注射針在顯微鏡視野內移動的機械裝置。顯微操作的基礎平臺--倒置研究級顯微鏡(例如OLYMPUS的I
免疫熒光反應與免疫組織化學有什么區別-最佳答案
免疫熒光技術(Immunofluorescence technique )又稱熒光抗體技術,是標記免疫技術中發展最早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合,利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。 免疫
免疫熒光反應與免疫組織化學有什么區別
免疫熒光技術(Immunofluorescence technique )又稱熒光抗體技術,是標記免疫技術中發展最早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合,利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。免疫組織化學
層析技術(Layeranalise-technique)
離子交換層析技術是以離子交換纖維素或以離子交換葡聚糖凝膠為固定相,以蛋白質等樣品為移動相,分離和提純蛋白質、核酸、酶、激素和多糖等的一項技術。(一)原理在纖維素與葡聚糖分子上結合有一定的離子基團,當結合陽離子基團時,可換出陰離子,則稱為陰離子交換劑。如二乙氨乙基(Dicthylaminoethyl,
沉淀反應技術(Precipitation-reaction-technique)(1)
一、 概述可溶性抗原(如細菌浸出液、含菌病料浸出液、血清以及其他來源的蛋白質、多糖質、類脂體等)與其相應的抗體相遇后,在電解質參與下,抗原抗體結合形成白色絮狀沉淀,出現白色沉淀線,此種現象稱為沉淀反應。沉淀反應中的抗原叫沉淀原(precipitinogen),與沉淀原發生反應的抗體稱為沉淀素(pre
免疫熒光技術簡介
免疫熒光技術(Immunofluorescence technique)又稱熒光抗體技術,根據抗原抗體反應的原理,將熒光素偶聯到已知的抗原或抗體上制成熒光探針,與血清或體液、細胞、組織中存在的相應抗體(或抗原)結合,從而對這些組織中存在的抗原或抗體進行定性、定量和(或)定位的檢測。抗體的選擇
Immunofluroescence-Technique
Fix cells in 2% formaldehyde in PBS/pH 7.4 for 15 min. at 20oC. 2% formaldehyde is made up fresh prior to use by dissolving the appropriate amount