酶學委員會 (E. C.)列出了72種不同的外肽酶(http://www.expasy.ch/enzymes)。外肽酶只是在靠近多鏈的一側末端起作用,在游離N端起作用的酶釋放出單個的氨基酸殘基、二肽或三肽(即分別為氨肽酶、二肽基肽酶和三肽基肽酶);在游離C末端起作用的酶釋放出單個的氨基酸殘基(羧肽酶)或二肽(二肽基羧肽酶 )。其他外肽酶特異性水解二肽(二肽)或除去被異構肽鍵替換的、環化的,或交聯的末端殘基(即不是α羧基與α氨基的肽鍵)。外肽酶的命名和性質特點E.C已經建立了從乳酸菌氨肽酶發展起來的微生物氨肽酶系統命名法。對于認識尚未達到基因水平的按照其生化名字或縮寫,其后按發現的順序編號,如LepⅠ、Ⅱ和Ⅲ。如果認識已達到基因水平,就用Pep命名,其后跟上表示特征的詞的首字母,如Pep N。它是一種金屬氨肽酶,較適于作用N-末端含有脂肪族或帶負電荷的殘基 (Lys,Arg,Leu) ,但是不能作用于含有Pro的肽。谷氨酰胺肽酶和......閱讀全文
酶學委員會 (E. C.)列出了72種不同的外肽酶(http://www.expasy.ch/enzymes)。外肽酶只是在靠近多鏈的一側末端起作用,在游離N端起作用的酶釋放出單個的氨基酸殘基、二肽或三肽(即分別為氨肽酶、二肽基肽酶和三肽基肽酶);在游離C末端起作用的酶釋放出單個的氨基酸殘基(羧肽酶
氨肽酶的結構許多氨肽酶是鋅金屬酶類,鋅離子與底物的配基有關。多數微生物氨肽酶是單鏈多肽,其他的含有2、4或6個亞基。一些氨肽酶和羧肽酶含有糖,但都不含脂蛋白。X射線結晶方法揭示了牛晶狀體LAP的三維結構,表明它是一種在活性部位含有2個鋅離子的金屬酶,而哺乳動物間LAP具有結構相似性,不過也發現牛晶狀
反應特性所有的外肽酶作用的底物N-末端必須有1個游離的氨基,或者C-末端必須有1個游離的羧基,或者兩種結構都需要,而且,外肽酶從肽鏈末端水解1個肽鍵時,釋放的殘基不會多于3個。多肽末端的特定氨基酸、與肽鍵相鄰的氨基酸殘基的性質、多肽鏈的結構和長度共同決定外肽酶的活性。大多數氨肽酶的最適pH值在中性范
肽酶是能分解蛋白短肽的酶類總稱,大多存在于微生物細胞內,在發酵過程中當細胞自溶后,便釋放肽酶水解肽類形成氨基酸,作為風味前體。他們是所有生物存活所必需的一種酶,而且在所有蛋白質的編碼中,編碼肽酶的基因占了2%。根據催化類型可將肽酶大致分成六類:絲氨酸型、蘇氨酸型、半胱氨酸型、天冬氨酸型、谷氨酸型和金
根據催化類型可將肽酶大致分成六類:絲氨酸型、蘇氨酸型、半胱氨酸型、天冬氨酸型、谷氨酸型和金屬離子型肽酶。
通常情況下其底物是由肽鍵連接的兩個氨基酸殘基所組成的二肽化合物,并要求兩兩相鄰氨基酸殘基上的α-氨基和α-羧基同時存在。二肽酶在體內通常由腸黏膜細胞中產生并可分泌于胞外,把二肽水解為游離的氨基酸后,由腸壁吸收進入血液到達肝臟。
氨肽酶種類繁多,將氨肽酶按照不同特性進行分類對人們認識和了解氨肽酶有著很大的幫助。關于氨肽酶的分類方式有許多種,如按底物特異性、按在細胞中所處的位置、按催化特性、按最適 pH 等進行分類,下面介紹主要的三種分類方式?[1]??:(1) 根據氨肽酶底物特異性的不同將氨肽酶分為兩大類:一類是具有嚴格的底
如今,質粒載體中限制酶切位點的種類極為繁多,因而通常都有可能找到某種帶限制酶切位點恰恰與外源DNA片段本身毫無二致的載體。這就具備一個不可比擬的優點,也應是可以用相應的限制酶消化重組質粒崦回收外源DNA。另一種方案,則是把片段插入到載體中能產生匹配末端的任何位點中。例如,識別不同的六核苷酸的限制酶
如今,質粒載體中限制酶切位點的種類極為繁多,因而通常都有可能找到某種帶限制酶切位點恰恰與外源DNA片段本身毫無二致的載體。這就具備一個不可比擬的優點,也應是可以用相應的限制酶消化重組質粒崦回收外源DNA。另一種方案,則是把片段插入到載體中能產生匹配末端的任何位點中。例如,識別不同的六核苷酸的限制酶B
1.帶有非互補突出端的片段 用兩種不同的限制酶進行消化可以產生帶有非互補突出端的片段,刀就是最容蜴 克隆的片段。常用的大多數質粒載體均帶有由幾個不同限制酶的識別序列組成的多克隆位點。由于現有的多克隆位點如此多樣,因而幾乎總是能找到一種帶有與外DNA片段未匹配的限制切位點的載體。于是,采用所謂的定向