染色技術
由于微生物細胞含有大量水分(一般在80-90%以上),對光線的吸收和反射與水溶液的差別不大,與周圍背景沒有明顯的明暗差。所以,除了觀察活體微生物細胞的運動性和直接計算菌數外,絕大多數情況下都必須經過染色后,才能在顯微鏡下進行觀察。但是,任何一項技術都不是完美無缺的。染色后的微生物標本是死的,在染色過程中微生物的形態與結構均會發生一些變化,不能完全代表其生活細胞的真實情況,染色觀察時必須注意。 本節包括四部分: 一、染色的基本原理 二、染料的種類和選擇 三、制片和染色的基本程序 四、染色方法一、染色的基本原理 微生物染色的基本原理,是借助物理因素和化學因素的作用而進行的。物理因素如細胞及細胞物質對染料的毛細現象、滲透、吸附作用等。化學因素則是根據細胞物質和染料的不同性質而發生地各種化學反應。酸性物質對于堿性染料較易吸附,且吸附作用穩固;同樣,堿性物質對酸性染料較易于吸附。如酸性物質細胞核對于堿性染料就有化學親和力,易......閱讀全文
糖類染色實驗——糖原染色
實驗方法原理糖原由多糖衍化而來,是單純的多糖。糖原易溶于水,所以用特殊的 Carnoy 固定液或無水乙醇直接固定才能較好地保存糖原,常用高碘酸(periodic acid)-Shiff 反應(PAS)染色法。實驗材料石蠟組織切片試劑、試劑盒高碘酸蒸餾水堿性復紅鹽酸焦亞硫酸鈉(偏重亞硫酸鈉)雙重蒸餾水
人類染色體姊妹染色單體差別染色
?????姊妹染色單體區分染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)是70年代中期發展起來的染色體處理技術。Latt(1973)在培養的細胞中加入5-溴脫氧尿嘧啶核苷(BrdU),當用Hoechst33258 熒光染料染色時,發現了姊妹染色單體的色差反映和它們
間接染色步驟(細胞表面染色)
實驗概要間接標記需要兩個孵育步驟,先與一抗再與合適的第二抗體孵育,二抗(不是一抗)結合了熒光染料(FITC、PE、Cy5 等)。請注意這是一個普遍的程序,您可以根據自己的使用情況進行調整。實驗步驟1.?收集并洗滌細胞,然后確定細胞總數。細胞通常在聚苯乙烯的圓底 12 x 75 mm2 Falcon
糖類染色實驗——黏液物質染色
實驗方法原理在人體和動物體中能夠分泌黏液物質,依其物質中含有的酸基不同,所以分為中性黏液、酸性黏液和混合性黏液,也可被稱為中性黏多糖、酸性黏多糖和混合性黏多糖,常用 Mowry 阿爾辛藍高碘酸 Shiff 反應(ABPAS)染色方法。實驗材料石蠟組織切片試劑、試劑盒阿爾辛藍 8 GS冰醋酸蒸餾水麝香
姐妹染色單體分化染色方法
姐妹染色單體差別染色可使中期染色體顯示深淺不同的兩條單體,能借以觀察姐妹染色單體互換(SCE)現象。SCE是兩條染色單體在DNA合成中核苷酸序列發生互換而表現出來一種現象。即是細胞分裂是DNA同源重組的結果。SCE既是一種無害的變化(有生理波動),也可受射線、致突和致癌物三因素等作用而升高。SCE一
姐妹染色單體分化染色實驗
實驗概要本文介紹了姐妹染色單體分化染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)的實驗原理、操作步驟及注意事項等。實驗原理姐妹染色單體分化染色法(Sister ?chromatid ?differentiation,SCD)是20世紀70年代中期發展起來的染色體處
姐妹染色單體分化染色實驗
實驗方法原理 細胞被培養在含有 5-溴脫氧尿苷(5-Bromodeoxyuridine:BUdR)的培養基中,當細胞在DNA 合成時,BUdR 能作為核苷酸的前體取代胸腺嘧啶核苷(Thymidine:TdR)被摻入到新合成的DNA中。在第一個細胞周期時,由于半保留復制的機制,中期染色體的每條染色單體
姐妹染色單體分化染色實驗
實驗方法原理細胞被培養在含有 5-溴脫氧尿苷(5-Bromodeoxyuridine:BUdR)的培養基中,當細胞在DNA 合成時,BUdR 能作為核苷酸的前體取代胸腺嘧啶核苷(Thymidine:TdR)被摻入到新合成的DNA中。在第一個細胞周期時,由于半保留復制的機制,中期染色體的每條染色單體D
革蘭氏染色液-染色法
??1.葡萄球菌和大腸桿菌混合菌液。????2.結晶紫染色液。????3.革蘭氏碘液。????4.95%酒精。????5.番紅染液。????6.載玻片。方???法?????一、涂片標本的制備(見實驗一)????二、革蘭氏染色法?????1.初染:在上述已固定的涂片上,滴加結晶紫染液,染色1分鐘,水洗
染色質染色體和染色單體的區別
(1)、染色質和染色體的主要成分都是DNA和蛋白質,它們之間的不同,不過是同一物質在細胞分裂間期和分裂期的不同形態表現而已。 染色質出現于間期,呈絲狀。它們在核內的螺旋程度不一,螺旋緊密的部分,染色較深,有的螺旋松疏染色較淺,染色質在光鏡下呈現顆粒狀,不均勻地分布于細胞核中。細胞分裂時染色質細