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    活細胞直接觀察實驗

    實驗方法原理培養的活細胞在一般顯微鏡下觀察時,細胞是透明的,反差很小,難以觀察到細胞清晰結構,只有應用附有相差裝置的顯微鏡,才能使目的物與背底反差增強,能夠看清細胞的輪廓和一些微細結構如線粒體、核仁、染色質等。實驗材料細胞儀器、耗材相差聚光器相差接物鏡實驗步驟一、相差裝置的使用相差裝置或顯微鏡都由兩個主要部分組成:相差聚光器和相差接物鏡。在每個相差接物鏡的光學系統中都有一個光環透鏡;在聚光器里有數個可轉換的相位板,一定倍數的接物鏡使用時需與相應的相位板一致。相差觀察時對照明要求嚴格,光軸要對正,視野照明光度應均勻。1. 工作步驟(1)先調好相位板,使聚光器相位板號與接物鏡放大倍數(相位板)相一致;(2)然后抽出接目鏡,再換輔助望遠鏡,移動輔助鏡筒并調整聚光器相位板,使視野中兩個大小一樣的光環(如不同說明倍數不一致)必須相互吻合;(3)再重新換上原接目鏡,即成相差圖像;當更換不同倍數接物鏡時,需按上述過程重新調節。&n......閱讀全文

    FDA和NIST對細胞治療中的細胞計數

    近年來,由于細胞治療方法的興起,人們日益需求能夠高質量、穩健、有效進行細胞表征測定的方法。細胞計數,作為細胞療法中最基礎的檢測項目,現今需要更高的檢測可信度。2017年4月,美國國家標準與技術研究院(NIST)&食品與藥物管理局(FDA)共同舉辦了一場專注于細胞計數的研討會,聚焦于選擇、設計

    自學動手共聚焦顯微鏡熒光樣品的制備全過程

      一、樣品的預處理   樣品的預處理包括給藥、切片或細胞標本的制備。其中給藥過程要根據實驗目的來進行,在這里主要介紹切片和細胞標本的制備。   1、組織切片樣品的處理   其制作過程主要包括組織樣品固定、切片制作。組織切片的優點是能夠完好地保存細胞間的相互關系和結構,因此是生物醫學實驗中應用

    微核實驗在染色體水平檢測DN A損傷實驗

    實驗步驟 一、材料 1. 胞質分裂阻滯微核試驗 2. 微核的著絲點檢測 (1)從硬皮病 C R E S T 亞型的患者中取得的血清樣本。 (2) F I T C 標記的兔抗人 I g G 二抗。 (3) 過氧化物酶

    原代細胞基本實驗技術小結

      A 原代細胞分離技術   取人或動物體內(或胚胎)的組織,將其剪碎至1mm3的組織塊,再采用的如下方法進行分離培養:   一、懸浮細胞的分離方法   1、將血液、羊水、胸水或腹水等懸液直接轉至離心管中,1000rpm/分鐘離心5分鐘。   2、去掉上清,離心沉淀用無鈣、鎂的PBS

    組織學研究方法

    (一)一般光學顯微鏡術應用一般光學顯微鏡(簡稱光鏡)觀察組織切片是組織學研究的最基本方法。取動物或人體的新鮮組織塊,先用固定劑(fixative)固定(fixation),使組織中的蛋白質迅速凝固,防止細胞自溶和組織腐敗。常用的固定劑如灑精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化鋨等,一般常將幾種固定劑配制成混

    活體生物發光成像技術的最新進展

    活體動物體內光學成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物發光(bioluminescence)與熒光(fluorescence)兩種技術。生物發光是用熒光素酶(Luciferase)基因標記細胞或DNA,而熒光技術則采用熒光報告基團(GFP、RFP, Cyt及dyes等)進

    一體化細胞免疫熒光技術介紹(二)

    一體化免疫熒光技術應用舉例超過800篇參考文獻證明了使用ibidi產品進行免疫熒光檢測的優勢。1. Human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) cultured under flow conditions in μ-Slide I 

    一種新型細胞劃痕實驗方法的介紹

    一.傳統細胞遷移實驗技術—劃痕實驗1.基本原理細胞劃痕(修復)法是簡捷測定細胞遷移運動與修復能力的方法,類似體外傷口愈合模型,在體外培養皿或平板培養的單層貼壁細胞上, 用微量槍頭或其它硬物在細胞生長的中央區域劃線,去除中央部分的細胞,然后繼續培養細胞至實驗設定的時間(例如72h),取出細胞培

    原代細胞基本實驗技術小結(二)

    D 原代細胞傳代技術 一、貼壁細胞的消化法傳代 1、吸除或倒掉瓶內舊培養液。 2、加入1ml左右消化液(胰蛋白酶或與EDTA混合液)輕輕搖動培養瓶,使瓶底細胞都浸入溶液中。 3、消化2-5分鐘后把培養瓶放置在顯微鏡下進行觀察,發現原貼壁的細胞逐漸趨于圓形,在還未漂起時,棄去消化液,加入培養

    一種新型細胞劃痕實驗方法的簡要介紹

    一.傳統細胞遷移實驗技術—劃痕實驗1.基本原理細胞劃痕(修復)法是簡捷測定細胞遷移運動與修復能力的方法,類似體外傷口愈合模型,在體外培養皿或平板培養的單層貼壁細胞上, 用微量槍頭或其它硬物在細胞生長的中央區域劃線,去除中央部分的細胞,然后繼續培養細胞至實驗設定的時間(例如72h),取出細胞培

    多功能單細胞顯微操作系統FluidFM BOT在活細胞提取中的...

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    微核實驗在染色體水平檢測DNA損傷實驗(一)

    實驗步驟一、材料1. 胞質分裂阻滯微核試驗2. 微核的著絲點檢測(1)從硬皮病 C R E S T 亞型的患者中取得的血清樣本。(2) F I T C 標記的兔抗人 I g G 二抗。(3) 過氧化物酶標記的兔抗人 I g G 。(4) 二胺基聯苯溶液(D A B ): I m g /m L 溶于

    細胞生物學的細胞增殖相關研究方法

      欄主要分為基因操作工具、細胞實驗部分、動物模型部分、組織水平部分、分子機制部分和實驗方案范例六大專題。接下來將為大家分享細胞生物學的細胞增殖相關研究方法。  MTT分析法  MTT為黃色化合物,是一種接受氫離子的染料,可作用于活細胞線粒體中的呼吸鏈,在琥珀酸脫氫酶和細胞色素C的作用下tetraz

    有關細胞生長狀況指標的檢測方法

    摘要: 細胞計數這是細胞培養中常用的基本技術之一,所用材料為細胞計數板、巴氏吸管和顯微鏡,步驟如下. 一、細胞計數 這是細胞培養中常用的基本技術之一.所用材料為細胞計數板.巴氏吸管和顯微鏡.步驟如下. 取清潔計數板和專用蓋玻片,用絲綢布輕輕擦干. 取

    細胞和細胞內含物的觀察-1

    細胞質內含有多種細胞器。有些細胞器如線粒體、高爾基體、內質網、溶酶體等普遍存在于各種細胞中,而另有些細胞器如葉綠體,只存在于植物細胞中。細胞質內的這些結構,除葉綠體外,一般在光學顯微鏡下不易看見,必須經過一定的固定染色方法處理后,才能看到大多數細胞器,或直接用相差顯微鏡觀察。線粒體線粒體是一種動態的

    原代細胞的培養與建系-3

    下面為美國標準細胞庫或細胞銀行(ATCC)入庫細胞的基本要求:   (1)培養簡歷 組織來源日期、物種、組織來源、性別、年齡、供體正常或異常健康狀態,細胞已傳代數等。   (2)凍存液 培養基和保護劑名稱。 &

    幾種常見的微生物基礎實驗

      本文介紹幾種常見的微生物基礎試驗的目的、原理、內容等,以便剛剛接觸微生物的同志們對試驗有個基本的認識. 實驗一 常用培養基的制備、滅菌與消毒一、實驗目的    1、掌握配制培養基的一般方法和步驟;掌握干熱天菌、高壓蒸汽滅菌及過濾除菌的操作方法; 

    彗星實驗在環境毒理學中的應用實驗

    彗星實驗,又稱單細胞凝膠電泳實驗,是用來檢測幾乎所有有核細胞中 D N A 損傷的方法。彗星實驗與其他遺傳毒性檢測實驗相比有明顯優勢,但是由于它對實驗中的細微變化非常敏感,可導致結果變化較大。本章的目的在于提供環境毒性實驗中與堿性彗星實驗相關的背景信息和詳細的標準化操作流程。我們將闡述彗星實驗相關缺

    動物細胞培養及外源基因導入的原理和操作步驟

    實驗概要通過本實驗掌握傳代細胞培養的基本方法,了解無菌操作的基本原則。掌握磷酸鈣介導的貼壁細胞的通用轉染方法。了解細胞凋亡的形態特征,掌握細胞凋亡DNA梯度(“DNA Ladder”)電泳檢測法。實驗原理細胞培養是現代生物學研究中應用最為廣泛的技術之一。它的突出優點,一是研究對象是活的細胞,可長時期

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      在死亡之前,已變成皮膚細胞的細胞仍然是皮膚細胞。在過去十年,明顯的是,細胞身份并不是一成不變的,它能夠通過激活特異性的遺傳程序而得以重寫。如今,再生醫學領域面臨著一個問題:這種重寫應當采取常規方法,即成熟細胞首先轉化回干細胞,或者如果可行的話,采取一種更加直接的方法?  術語“終末分化(term

    彗星實驗在環境毒理學中的應用實驗

    實驗步驟 一、材料1.溶液1.2 玻璃器具和實驗器材(1) 移液器。(2) 吸 頭(10、 20、 100、 200、 1000 uL)。(3)刻 度 燒 瓶(100 m L 、 500m L 和 I L )。(4)量筒(100 m L 、 500 m L 和 1L )。(5)燒杯(250 m L

    活細胞成像2012最新進展及產品

      目前生物成像領域已經可以采用各種顯微技術和共聚焦等技術了,這提高了圖像的精確度,但是要觀察到深層組織活動并不容易,因此在一些活體成像,組織深部觀察等方面還需要更多的技術進步。2012年活體顯微技術,熒光顯微技術,以及活細胞成像方面都涌現出了不少重要的技術成果。   活體動物成像技術主

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    實驗步驟 一、材料 1.溶液 1.2 玻璃器具和實驗器材 (1) 移液器。 (2) 吸 頭(10、 20、 100、 200、 1000 uL)。 (3)刻 度 燒 瓶(100 m L 、 500m L 和 I L

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    由于細胞異質性的存在,單細胞層面的分析就變得十分重要。目前對于單細胞分析的方法主要還是通過化學、生物學的方法進行裂解后,提取內容物進行分析,然而這種方法往往會對樣本造成一些損傷。直接提取活細胞具有諸多優點,但是操作苦難。如今一種全新使用FluidFM科技的技術新報道有望提供一種活細胞提取新型的簡易方

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      Inscopix系列的大腦超微鈣成像系統一般用在嚙齒類動物身上的居多,因為設備體積小,重量輕,且在實驗時動物可以自由活動而成像質量不受影響,因此受到了很多神經科學研究者的青睞。   但在最近的一篇來自Inscopix公司和美國德克薩斯大學奧斯汀分校的研究人員在bioRxiv上發表的文章則描

    單克隆抗體的制備(三)

    3.2 免 疫 B 細胞的制備血清效價有意義(>1 : 1000)的免疫后動物可以提供抗原反應性B 細胞用于融合。這些細胞可以從脾臟或淋巴結中獲得。動物用吸人CO2 處死,在無菌操作下取組織,放 在 4°C無血清培養基中,最多可放lh 。用懾子或針頭輕輕打開組織脾臟或淋巴結的外包膜獲得

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    無血清技術及其培養基

    經歷了天然培養基、合成培養基后,無血清培養基和無血清培養成為當今細胞培養領域的一大趨勢。采用無血清培養可降低生產成本,簡化分離純化步驟,避免病毒污染造成的危害。 無血清培養基(serum free medium,SFM):是不需要添加血清就可以維持細胞在體外較長時間生長繁殖的合成培養基。但是它們

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