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    活體電穿孔法介紹(二)

    電 壓電穿孔時在能量導入一定的情況下設計施加電壓的值。電壓過低或過高都會影響外源基因的表達。電壓過低時,無法造成細胞膜表面狀態的改變,因而外源D不能進入細胞內。電壓過高時,局部組織積聚過多熱量,造成細胞的死亡或組織失去功能,即使外源基因導入細胞,也無法進行正常的表達。哺乳動物常用的活體電壓大多為20~100VPcm ,最高電壓在250~750VPcm。電穿孔次數和時間有試驗證明,皮膚的電阻在每一次電穿孔后都有所降低,說明電穿孔使皮下組織形成孔道,且其大小隨電穿孔而變大,經過電穿孔的處理后外源基因更易在更深的真皮和毛囊內表達。但電穿孔次數不能過多,否則會對局部的細胞組織造成不可逆的損害,基本應在10 次以內,每組電穿孔時間應在20~100msec 。能量的測算電穿孔過程中能量的測算公式為: Q(J ) = V2 TP412R 其中Q 代表電穿孔時導入的能量,V 代表施加的電壓,T 代表電穿孔延續的時間,R 代表作用組織......閱讀全文

    活體電穿孔法介紹(一)

    1、什么是活體電穿孔活體電穿孔法(in vivo electroporation) 是將外源基因通過電場作用,導入動物目標組織或器官。由于這種方法能有效導入外源基因,可在多種組織器官上應用,并且效率較高。活體電穿孔法的原理很簡單,在直流電場作用的瞬間,細胞膜表面產生疏水或親水的微小通道105~1

    活體電穿孔法介紹

    1、什么是活體電穿孔活體電穿孔法(in vivo electroporation) 是將外源基因通過電場作用,導入動物目標組織或器官。由于這種方法能有效導入外源基因,可在多種組織器官上應用,并且效率較高。活體電穿孔法的原理很簡單,在直流電場作用的瞬間,細胞膜表面產生疏水或親水的微小通道105~115

    活體電穿孔法介紹

    1、什么是活體電穿孔 活體電穿孔法(in vivo electroporation) 是將外源基因通過電場作用,導入動物目標組織或器官。由于這種方法能有效導入外源基因,可在多種組織器官上應用,并且效率較高。活體電穿孔法的原理很簡單,在直流電場作用的瞬間,細胞膜表面產生疏水或親水的微小通

    活體電穿孔法介紹-1

    1、什么是活體電穿孔活體電穿孔法(in vivo electroporation) 是將外源基因通過電場作用,導入動物目標組織或器官。由于這種方法能有效導入外源基因,可在多種組織器官上應用,并且效率較高。活體電穿孔法的原理很簡單,在直流電場作用的瞬間,細胞膜表面產生疏水或親水的微小通道105~1

    活體電穿孔法介紹

    1、什么是活體電穿孔 活體電穿孔法(in vivo electroporation)是將外源基因通過電場作用,導入動物目標組織或器官。由于這種方法能有效導入外源基因,可在多種組織器官上應用,并且效率較高。活體電穿孔法的原理很簡單,在直流電場作用的瞬間,細胞膜表面產生疏水或親水的微小通道105~115

    活體電穿孔法介紹-3

    肝 臟由于肝臟的生理代謝十分旺盛,因此外源基因在肝臟中的表達時間往往很短暫,而且表達產物的水平也較低。為減少出血,可從小靜脈注入,然后在肝臟上施加電場,能顯著增強基因的表達。睪 丸相對于其他的轉基因方法,活體電穿孔法可使外源基因在睪丸中產生大量和持久的表達。此外,很多研究人員希望利用活體電穿孔法將外

    活體電穿孔法介紹-2

    電 壓電穿孔時在能量導入一定的情況下設計施加電壓的值。電壓過低或過高都會影響外源基因的表達。電壓過低時,無法造成細胞膜表面狀態的改變,因而外源D 不能進入細胞內。電壓過高時,局部組織積聚過多熱量,造成細胞的死亡或組織失去功能,即使外源基因導入細胞,也無法進行正常的表達。哺乳動物常用的活體電壓大多

    活體電穿孔法在基因治療方面的應用

    活體電穿孔法(in vivo electroporation) 是將外源基因通過電場作用,導入動物目標組織或器官。這種方法能有效導入外源基因,可在多種組織器官上應用,并且效率較高。活體電穿孔法的原理很簡單,在直流電場作用的瞬間,細胞膜表面產生疏水或親水的微小通道105~115μm ,這種

    知識課堂之活體電穿孔法其他活體基因導入方法的比較

      活體電穿孔法(in vivo electroporation) 是將外源基因通過電場作用,導入動物目標組織或器官。由于這種方法能有效導入外源基因,可在多種組織器官上應用,并且效率較高。活體電穿孔法的原理很簡單,在直流電場作用的瞬間,細胞膜表面產生疏水或親水的微小通道105~115μm ,這種通道

    基因電轉染系統的技術革新

    經過近30年的發展革新,電轉染已成為基因的功能研究領域中不可或缺的技術手段。下文不僅是一篇新上市的轉染儀器的介紹,更是電轉染儀技術革新的介紹,因為:            &nbs

    常用的分子生物學基本技術2

    IS PCR的技術特點 (1)既具有PCR的特異性與高靈敏性,又具有原位雜交的定位準確性;(2)測到低于2個拷貝量的細胞內特定DNA序列,甚至可檢測出單一細胞中的僅含一個拷貝的原病毒DNA;(3)有助于細胞內特定核酸序列定位與其形態學變化的結合分析;(4)可用于正常或惡性細胞,感染或非感染細胞的鑒定

    常用的分子生物學基本技術

    核酸分子雜交技術由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性,它已成為分子生物學中最常用的基本技術,被廣泛應用于基因克隆的篩選,酶切圖譜的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下(適宜的溫室度及離子強度等)可按堿基互補原成雙鏈。雜交的

    基因電轉化技術的創新介紹

    常規的轉染包括脂質體,電轉化和病毒法。普通的293、Hela等細胞系,脂質體轉染也能達到70-80%。而對于其他一些極難轉染的細胞,如原代神經元,原代神經干細胞,免疫細胞等來說,脂質體轉染不僅轉化效率很低(約10%),而且細胞死亡率極高。因此有些研究人員不得不轉用更加昂貴而且毒性更大的病毒包被法。病

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    BTX特殊電極的應用此次只將貼壁轉染、活體等進行總結,對于大規模的轉基因的應用,由于BTX公司有新的發展,故此次未將其列入,待下次完善后補充。1、Adherent Cell Transfections (ACT)貼壁細胞轉染?In-situ electroporation of cells in t

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    三,RNAi的應用前景RNAi 技術中的相關問題主要涉及以下幾點:(1) dsRNA 序列的選擇dsRNA 主要選自已知的cDNA 的開放閱讀框架(ORF) 中的基因區域。為防止mRNA 調控蛋白對RISC 與靶RNA 結合的干擾,應避免選擇包括:1) 起始密碼子下游或終止密碼的50~100 核

    國家藥監局印發食品安全檢驗機構技術裝備等基本標準

    關于印發餐飲服務食品安全檢驗機構技術裝備基本標準和現場快速檢測設備配備基本標準的通知 國食藥監食[2011]130號 各省、自治區、直轄市及新疆生產建設兵團食品藥品監督管理局:   為貫徹落實《食品安全法》、《食品安全法實施條例》以及《餐飲服務食品安全監督管理辦法》,逐步建立

    176種食品檢測儀器匯總

      1.電子天平:食品檢驗用試劑、樣品和標準品的稱量;  2.酸度計:食品檢驗過程中pH值的測定;  3.冷凍離心機:食品檢驗過程中營養成分或者污染物等的提取分離;  4.離心機:食品檢驗過程中營養成分或者污染物等的提取分離;  5.超凈工作臺:食品檢驗過程中提供局部超凈工作環境;  6.生物安全柜

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