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    常用的分子生物學基本技術2

    IS PCR的技術特點 (1)既具有PCR的特異性與高靈敏性,又具有原位雜交的定位準確性;(2)測到低于2個拷貝量的細胞內特定DNA序列,甚至可檢測出單一細胞中的僅含一個拷貝的原病毒DNA;(3)有助于細胞內特定核酸序列定位與其形態學變化的結合分析;(4)可用于正常或惡性細胞,感染或非感染細胞的鑒定與區別。 IS PCR的基本方法 IS-PCR是PCR和原位雜交兩種技術的綾事,實質是一種將靶DNA或RNA在原位擴增后再進行原位雜交的技術,操作程序基本兼有兩種技術的所有過程,首先在適當處理的細胞和組織切片上滴加PCR反應液,然后把載玻片放入熱循環儀中進行擴增,最后通過標記的探針進行原位雜交檢測擴增產物。 初步應用 有關原位PCR技術應用成功的第一篇報道是對感染綿羊中樞神經系統visna病毒在綿羊脈絡從一細胞中檢查,通過PCR擴增,僅用150堿基對的短探針就可通過ISH檢查到了細胞內的visna病毒。從開始在試管內細胞行PCR擴增后......閱讀全文

    常用的分子生物學基本技術1

    DNA重組技術(或基因工程)是20世紀生物學的偉大成就,并已滲透到生命科學包括醫學 各個領域,為腫瘤的實驗研究和臨床診斷及治療提供了嶄新的技術和有用的工具。本附錄扼要介紹在分子腫瘤學領域中常用的分子生物學基本技術及其在腫瘤研究中的應用,著重介紹它們的原理和應用。至于具體的技術方法和操作步驟可參閱《分

    常用的分子生物學基本技術

    核酸分子雜交技術由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性,它已成為分子生物學中最常用的基本技術,被廣泛應用于基因克隆的篩選,酶切圖譜的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下(適宜的溫室度及離子強度等)可按堿基互補原成雙鏈。雜交的

    常用分子生物學和細胞生物學實驗技術介紹

    核酸分子雜交技術由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性,它已成為分子生物學中最常用的基本技術,被廣泛應用于基因克隆的篩選,酶切圖譜的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下(適宜的溫室度及離子強度等)可按堿基互補原成雙鏈。雜交的

    常用分子生物學和細胞生物學實驗技術介紹(一)

    核酸分子雜交技術由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性,它已成為分子生物學中最常用的基本技術,被廣泛應用于基因克隆的篩選,酶切圖譜的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下(適宜的溫室度及離子強度等)可按堿基互補原成雙鏈。雜交的

    實時熒光定量PCR技術介紹

    實時熒光定量PCR (real time fluorogenetic quantitative PCR, FQ-PCR),是在PCR定性技術基礎上發展起來的核酸定量技術。它是一種在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時檢測整個PCR過程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方

    講解實時熒光定量PCR技術

     實時熒光定量PCR (real time fluorogenetic quantitative PCR, FQ-PCR),是在PCR定性技術基礎上發展起來的核酸定量技術。它是一種在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時檢測整個PCR過程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析

    常用分子生物學和細胞生物學實驗技術介紹(二)

    核酸原位雜交用特定標記的已知順序核酸作為探針與細胞級或組織切片中核酸進行復性雜交并對其實行檢測的方法,稱為核酸原位雜交(nucleic acid hybridization in situ)。用來檢測DNA在細胞核或染色休上的分布,與細胞內RNA進行雜交以研究該組織細胞中特定基因表達水閏;還

    重組質粒的構建設計

    基因工程又稱遺傳工程、DNA 重組技術、分子克隆等。它是七十年代在分子生物學發展的基礎上形成的新學科。所謂基因工程,就是在分子水平上,用人工方法提取(或合成)某一生物的遺傳物質,在體外切割,拼接和重新組合,然后通過載體把重組的DNA 分子引入受體細胞,使外源DNA 在受體細胞中進行復制和表達。按人們

    重組質粒的構建設計

    基因工程基因工程又稱遺傳工程、DNA 重組技術、分子克隆等。它是七十年代在分子生物學發展的基礎上形成的新學科。所謂基因工程,就是在分子水平上,用人工方法提取(或合成)某一生物的遺傳物質,在體外切割,拼接和重新組合,然后通過載體把重組的DNA 分子引入受體細胞,使外源DNA 在受體細胞中進行復制和表達

    醫學真菌檢驗技術

    醫學真菌學檢查是診斷真菌病的重要依據,隨著真菌感染病例的日益增多,對實驗室的診斷也提出了更高的要求。不論是患者淺部或深部感染診斷,幾乎全依賴于臨床標本的真菌學檢查。特別是系統性真菌感染,其早期特異的診斷方法是挽救患者生命的關鍵,而病原真菌的形態結構十分多樣,在不同條件下同一真菌也可有不同特點的形態。

    江西省醫療機構臨床實驗室管理辦法實施細則

        第一章 總則     第一條 為加強我省醫療機構臨床實驗室的建設與管理,提高臨床檢驗水平,保證醫療質量和醫療安全,根據《醫療機構臨床實驗室管理辦法》,結合我省實際,制定本實施細則。    

    流式細胞技術基本原理應用和發展趨勢

    流式細胞術工作原理是在細胞分子水平上通過單克隆抗體對單個細胞或其他生物粒子進行多參數、快速的定量分析。它可以高速分析上萬個細胞,并能同時從一個細胞中測得多個參數,具有速度快、精度高、準確性好的優點,是當代最先進的細胞定量分析技術之一。光源、液流通路、信號檢測傳輸和數據的分析系統是流式細胞儀的主要組成

    盤點:31項與免疫學有關的分子生物學實驗技術

      現代分子生物學和免疫學的進展加深了我們對許多疾病的了解,并且導致了免疫新策略的產生,免疫學檢測方法可分為體液免疫和細胞免疫測定。本文盤點了與免疫學有關的分子生物學實驗技術匯總。  一、GST pull-down實驗  GST是指谷胱甘肽巰基轉移酶,GST pull-down實驗是一個行之有效的驗

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